S11 Pasteurella, Francisella ve Legionella PDF

 Pasteurella  Küçük fakültatif anaerop, Gram negatif bir kokobasildir.  Nadiren flamentöz yapı gösterir.  Hayvanların ağız florasında bulunmaktadırlar.  Hayvan ısırması, tırmalaması yada;  yiyeceklerinden yenmesiyle insana bulaşmaktadır.  Bi...

 Pasteurella  Küçük fakültatif anaerop, Gram negatif bir kokobasildir.  Nadiren flamentöz yapı gösterir.  Hayvanların ağız florasında bulunmaktadırlar.  Hayvan ısırması, tırmalaması yada;  yiyeceklerinden yenmesiyle insana bulaşmaktadır.  Bipolar boyanma Pasteurella  İnfekte dokulardan yapılan sürme preparatlarda karakteristik bipolar tarzda boyanırlar.  Aerob ve fakültatif anaerob koşullarda kolayca üreyebilirler.  Kan ve serum içeren besiyerlerinde daha kolay gelişirler. Pasteurella  Pasteurella multocida tavuk kolerası olarak biline hastalığın etkendir.  Pasteurella multocida ve çok nadir enfeksiyon yapan P.canis insanlarda hastalık yapabilirler.  Pasteurella  Üç tip hastalık yaparlar. 1- Lokalize sellülit ve lenfoadenit (köpek veya kedi ısırması sonucu oluşur. Daha çok P.multocida ile olur. ) 2- Solunum fonksiyonları yetersiz olanlarda kronik solunum yolları tutulumu, pnömoni 3-İmmün yetmezliği olanlarda karaciğer tutulumu da görülen sistemik enfeksiyon Nadir olarak bakteriyemi ve menenjit yaparlar. Pasteurella multocida  P.multocida ;  Kanlı ve Çukulatamsı agarda iyi ürerken,  Mac Concey ve benzeri besiyerlerinde zayıf ürer.  Bir gecede kanlı agarda ürer ve indol yaptığından küf gibi kokar.  Antibiyotiklerin çoğuna duyarlıdır.  Penisilin, tetrasiklin, sefalosporin ve florokinolonlar etkili olmaktadır. OKSİDAZ +  FRANCİSELLA TULARENSİS  Çok küçük Gram (-) bir kokobasildir.  Tularemi hastalığının etkenidir.  Glandular fever, rabbit fever yada kene ateşi de denmektedir.  Francisella tularensis biyokimyasal özelliklerine göre üç alt tipe ayrılmış olup insan enfeksiyonlarıyla en sık ilişkili 2 tip;  F. tularensis subsp. tularensis (Tip A),  F.tularensis subsp. holarctica (Tip B) FRANCİSELLA TULARENSİS Fizyoloji ve Yapı  Francisella çok küçük soluk boyanan Gram negatif bir kokobasildir.  Hareketsizdir ve ince bir LPS kapsülü vardır.  Kapsülleri fagositozu engellemektedir.  Güç üremektedir ve üreyebilmek için sistein gereksinimi...  Zorunlu aerop, 3 gün veya daha fazla…  FRANCİSELLA TULARENSİS Patagonez ve immünite  Hücre içi parazitidir.  Makrofaj ve Retikülo endotelyal sistem hücrelerinde fagosom- lizozom füzyonunu engelleyerek buralarda uzun süre canlı kalabilir.  Patojenik kökenler polisakkaritten zengin bir kapsül antifogositik özellikte  Endotoksin var fakat aktivitesi diğer Gram negatif basillerden çok az  Erken dönemde doğal immün yanıt geç dönemde T hücre aracılı immün yanıt etkili, B hücre aracılı immünitenin önemi daha az..  FRANCİSELLA TULARENSİS Epidemiyoloji Rezervuarlar; vahşi memeliler, evcil hayvanlar, kuşlar, balıklar, kan emen artrapodlardır; İnsan enfeksiyonlarında en sık tavşan, kedi, sert keneler ve sinek ısırıkları ile ilgilidir  Kontamine gıda, artropod sokması, aerosol solunması ve enfekte hayvanlarla temas sonucu bulaşır. İnsan rastlantısal konak Artrapodlar aracılığı ile deriden ve inhalasyon yoluyla bulaşmada enfektif doz düşüktür; Sindirim yoluyla bulaşmada ise daha fazla sayıda bakteri alınması gerekir. Laboratuvar enfeksiyonlarına dikkat edilmelidir. FRANCİSELLA TULARENSİS  Tulareminin klinik bulgulara bağlı gelişen formları:  Ülseroglandüler (Dünyada en sık),  Oküloglandüler,  Tifoid,  Glandüler  Pnömonik  Orofaringeal formda olabilirler.  Ağız yoluyla alınmasından sonra görülen orofaringeal form Türkiye’de en sık görülen form.  Vücuda cilt, mukoza ya da solunum yolundan girebilmektedir.  Enfeksiyon gelişmesi için 50 bakteri yetmektedir  Çok bulaşıcı olması ve çok düşük dozla enfeksiyon yapabilmesi nedeniyle biyoterör silahı olabilme potansiyeline sahiptir Orofaringeal Tularemi  Francisella tulerensis Laboratuvar tanı  Hastalık tablosuna göre;  Lenf nodu aspiratı, balgam ve kan incelenebilir.  Lenf nodu aspiratları genellikle olumlu sonuç vermektedir.  Gram boyaması ile bakterini görülmesi zordur.  Bakteri çok küçüktür.  Floresan işaretli antikorlarla boyama iyi sonuç vermektedir. FRANCİSELLA TULARENSİS Laboratuvar tanı  7-10 günde antikorları oluşur.  Mikroaglütinasyon testi (MA) en yaygın olan serolojik tanı yöntemidir.  Serumda 1/160 düzeyinde antikor saptanması tanı için yeterli olur.  Brucella ile çapraz reaksiyon verdiği unutulmamalıdır.  Francis besiyerinde, Hücre kültürlerinde hücre içinde ve yumurtanın korioallanyoik membranında ( CAM) üretilebilmektedir.  Glukoz-sistein agar da 1-3 günde küçük koloni yapar. Basit besiyerlerinde üremez. FRANCİSELLA TULARENSİS Laboratuvar tanı  Sistein eklenmiş çukulatamsı agar iyi bir seçenektir.  Yine sistein eklenmiş Lejyonella besiyerlerinde de üremektedir.  Kobay ve fareye pasajlar yapılarak hayvanlarda da üretilebilmektedir.  Uzun süre inkube edilmelidir.  Bakteri geç üremektedir.  Kan kültürleri de bir haftadan fazla inkübe edilmelidir. FRANCİSELLA TULARENSİS Laboratuvar tanı Antiserumla da tanımlanır.  Kültürdeki üreme ile antiserum karşılaştırılır. Referans laboratuarlarında çalışılmalıdır.  Çok bulaşıcı ve tehlikelidir. Tedavi Enfeksiyonlarında streptomisin ve gentamisin etkili olmaktadır.  1976 yılında Filadelfia’da LEGİONELLA toplantıya katılan Amerika Lejyonerlerinde pnömoni salgını çıkıyor.  Bulunan etkene bu nedenle Legionella deniyor.  Genellikle sularda yaşayan saprofit bir bakteridir.  Elli türü olup, yarısı insan hastalıklarıyla ilişkili bulunmuştur.  Enfeksiyonların %90’ından L.pneumophila sorumludur.  Genel besiyerlerinde üreyemez.  Konvansiyonel boyalarla iyi boyanmaz. Fizyoloji ve yapı  Zorunlu aeroptur. LEGIONELLA  Bakteri ince uzun ve pleomorfik basil yapısındadır.  Örneklerde, kısa kokobasil; besiyerinde uzun olabilen yapıda görülürler.  Dokuda ‘Dieterle silver’ ile boyanarak görülebilirler.  İlk izolasyonda suplementli besiyerinde üreyebilmektedir.  İlk izolasyonda L-cystein ve demir isterler.  Bakteri konaktan yada besiyerinden demir alarak yaşayabilmektedir.  Demir alma yeteneği yoksa hastalık yapamazlar.  Non-fermantatif bakteriler olup aminoasit metabolizmasıyla enerji sağlarlar.  Legionella Patogenez ve immünite  Havadaki bakterilerin solunmasıyla alınırlar.  Doğada serbest yaşayan amiplerde;  Konakta ise alveolar makrofajlarda, monosit ve epitel hücrelerinin içinde bulunurlar.  Makrofajlarda üreyebilmeleri enfeksiyon için önemlidir.  Endositozla hücre içine girerler.  Fagolizozom füzyonu inhibe edilerek;  süperoksit,  hidrojen peroksit ve  hidroksil radikallerinin toksik etkilerine maruz kalmaktan kurtulurlar.  Legionella Patogenez ve immünite Enfekte makrofajlardan inflamatuar yanıtı tetikleyen kemokin ve sitokinler salınır. Bakteriler hücre içinde çoğalır ve proteolitik enzimler, ayrıca fosfataz, lipaz ve nükleazlar salarak hücrenin ölümüne neden olurlar. Asıl koruyucu bağışıklık hücresel bağışıklıktır.  Salgısal bağışıklığın etkisi çok azdır.  T helper (TH1) hücreleri uyarımı ile makrofajlar aktive edilmedikçe hücre içindeki bakteriler öldürülemezler.  Lenfositlerin oluşturduğu interferon gamanın (IFNγ) Legionella eliminasyonunda etkisi büyüktür.  Legionella Epidemiyoloji  Bütün dünyada sporadik ve epidemik olguları görülür.  Bakteriler su depoları, soğutma kuleleri ve soğutucular ile duş başlıkları, kaplıca suları ve doğal su kaynaklarında bulunurlar.  Kontamine aerosollere maruziyet (hastane buhar makineleri, klima, duş başlıkları, su fıskiyeleri, girdaplı havuz sistemleri gibi) enfeksiyonlara neden olur.  Sıcak su ve şehir suyu klor düzeylerinde canlı kalırlar.  Sulardaki amiplerde parazit olarak ta bulunurlar.  Su sistemlerinde oluşan biyofilmlerde bulunurlar.  Legionella Epidemiyoloji  Genellikle immün sistemi zayıf insanlarda daha kolay enfeksiyon yapmaktadır.  Hastane enfeksiyonlarına neden olmaktadır. Vakaların % 25’i hastane ortamında gelişmektedir. Legionella Klinik hastalıklar  Asemptomatik enfeksiyonlarının çok olduğu düşünülmektedir.  İki formda hastalık yapmaktadır. 1- Pontiac Ateşi:  Ateş, titreme, miyalji, kırgınlık, baş ağrısı gibi bulgular olmuştur. 2-5 gün süren ve kendiliğinden iyileşen bir hastalıktır.  Legionella Klinik hastalıklar 2- Lejyoner Hastalığı:  Ciddi bir pnömoni formudur.  Tedavi edilmezse sağlıklı insanların % 15’i, immün sistemi zayıf insanların %75’ini öldürür.  2-10 gün süren kuluçka dönemimden sonra ateş, titreme, kuru öksürük, baş ağrısı olur.  GIS, karaciğer ve böbrekleri sık tutar. Filmde birden fazla lobta konsolidasyonlu pnömoni saptanır.  Akciğer dokusunda mikroabseler oluşur. Tedavi olmayanlarda pulmoner fonksiyonlar bozulur.  Tanı için mutlaka laboratuvar verilerine ihtiyaç duyulur. Labaratuvar Tanı:  Mikroskopi, kültür ve serolojik Legionella yöntemler uygulanır.  Kültür altın standarttır.  DFA (direkt floresan antikor) yöntemiyle örneklerde bakteri saptanması,  İdrarda antijen aranması ve  PCR ile bakteri spesifik nükleik asitlerinin saptanması da giderek yaygınlaşan etkili tanı yöntemlerdir.  Bakteriler gram ile zayıf boyanırlar.  Küçük ve intraselüler olduklarından zor fark edilirler.  Doku örneklerinde Dieterle silver ile boyanarak görülebilirler.  Balgam gibi klinik örneklerde floresan ile işaretli Lejyonella antikorları ile bakterilern floresan mikroskopla aranması (DFA) hızlı sonuç sağlar.  Ama yöntem kültür kadar duyarlı değildir. Legionella/Labaratuvar Tanı İdrarda antijen aranması:  Hastaların idrarında atılan Legionella serogrup 1’e spesifik LPS antijenlerini saptar.  Test hastaların %60-90’ını saptamaktadır.  Legionella pneumophila serogrup 1, enfeksiyonlarının % 90’ından sorumludur ancak;  hastane enfeksiyonlarının sadece yarısından sorumlu olduğu için hastane enfeksiyonlarında tutarlılığı daha azdır.  Hastalar tedavi edilmiş olsa da idrarlarında antijen bulunabilir.  Antijen hastaların idrarında bir yıl kadar kalabilir.  PCR kullanılarak balgam, bronkoalveolar sıvılarda Legionella nükleik asitleri belirlenebilir ve tür düzeyinde tanımlama yapılabilir. Legionella / Labaratuvar Tanı KÜLTÜR:  İlk izolasyonda besiyerinde demir ve L.cystein olmalıdır.  Buffered Charchol Yeast Agar (BCYE) Kültür için en çok kullanılmaktadır.  İçine diğer bakterilerin üremesini engellemek için antibiyotikte katılabilir.  % 5 CO2 li ortamda 3-5 günde üremektedirler.  Kolonileri toprak-cam gibi görülür.  L.cystein olmayan besiyerinde üremeyip BCYE agarda üreyen bakteriler büyük olasılıkla Legionella’dır.  Kültürde üremiş bakterinin DFA ile tanısı kesinleşir.  Legionella And Labaratuvar Tanı 11 Hastalarda EIA ile veya IFA ile spesifik antikorlar araştırılabilir.  İki serum örneği arasında dört misli titre artışı tanı koydurucudur. Tedavi ve Korunma İn vitro etkili olduğu görülen antibiyotiklerle tedavi başarısız olabilmektedir. Makrolid ve florokinolonlar daha başarılı sonuçlar sağlamaktadır. Su kaynağının hiperklorinasyonu ve aşırı ısıtılması kısmen başarı sağlamaktadır. Bakteri virulansı zayıftır,  O nedenle sulardaki sayılarının azaltılması bile hastalık yapmalarını önleyebilir. Hastanelerde ki sular aralıklarla Legionella açısından incelenmelidir. Yüksek doz klorlama ve yüksek ısı ile tüm hastane suları dezenfekte edilirken;  hasta ve personelin o dönemde su kullanmamaları ikazı yapılmalıdır.