Preparação de Amostras para Microscopia
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Questions and Answers

Qual é o tempo recomendado para a fixação de tecidos a temperatura ambiente?

  • 16 horas (correct)
  • 12 horas
  • 24 horas
  • 8 horas

    • O formol pode ser utilizado como fixador para tecidos animais.

    True

    Qual é o principal objetivo da desidratação na preparação de amostras para microscopia?

    Diminuir a percentagem de água na amostra.

    Qual microscópio foi inventado por Ernest Ruska nos anos 30?

    <p>Microscópio eletrónico</p> Signup and view all the answers

    A fixação a vapor é um método de _____ seca.

    <p>fixação</p> Signup and view all the answers

    O microscópio de magnificação de 10 a 80 vezes tem lentes acromáticas e permite a observação de material em 2 ou 3 dimensões.

    <p>True</p> Signup and view all the answers

    Associe os tipos de fixadores aos seus componentes:

    <p>Formaldeído = Aldeídos Acido pícrico = Agentes coagulantes Tetróxido de ósmio = Agentes oxidantes Metanol = Desnaturantes de proteínas</p> Signup and view all the answers

    Qual dos seguintes é um componente do fixador FAA utilizado em tecidos vegetais?

    <p>Etanol</p> Signup and view all the answers

    Quais são os princípios básicos da microscopia eletrónica?

    <p>Transmissão, digitalização e efeito de túnel</p> Signup and view all the answers

    O microscópio de _____ de contraste de interferência diferencial é uma das inovações do século XX.

    <p>fase</p> Signup and view all the answers

    Xilol deve ser utilizado após a desidratação em tecidos vegetais.

    <p>True</p> Signup and view all the answers

    Emparelhe os tipos de microscópios com suas características:

    <p>Microscópio eletrónico = Aumenta a magnificação até 1 milhão de vezes Microscópio de fase de contraste = Permite observar amostras transparentes Microscópio de epifluorescência = Utiliza espelhos dicromáticos para iluminação Lupa = Possui lentes que oferecem mágnificação de 10 a 80 vezes</p> Signup and view all the answers

    Qual é a temperatura recomendada para a fixação de amostras se realizadas por 24 horas?

    <p>4ºC</p> Signup and view all the answers

    Qual destas técnicas permite ver a estrutura intrínseca de biomoléculas?

    <p>Microscopia crio-eletrónica</p> Signup and view all the answers

    A lupa tem a capacidade de magnificação de apenas 5 vezes.

    <p>False</p> Signup and view all the answers

    A água é _____ à volta da amostra na microscopia crio-eletrónica.

    <p>vitrificada</p> Signup and view all the answers

    Qual dos seguintes leucócitos é considerado um agranulócito?

    <p>Linfócito</p> Signup and view all the answers

    Um microscópio ótico pode ter lentes apocromáticas que corrigem aberrações esféricas.

    <p>True</p> Signup and view all the answers

    Quais são as duas principais partes que compõem um microscópio ótico?

    <p>parte estrutural e parte ótica</p> Signup and view all the answers

    Os _____ são grãos ácidos corados com hemalumen.

    <p>basófilos</p> Signup and view all the answers

    Associe os tipos de imagem com suas características:

    <p>Imagem real = Imagem invertida Imagem virtual = Ponto de foco antes e depois</p> Signup and view all the answers

    Qual é um dos principais tipos de aberrações que podem ocorrer em um microscópio ótico?

    <p>Aberração cromática</p> Signup and view all the answers

    Os neutrófilos são considerados agranulócitos.

    <p>False</p> Signup and view all the answers

    Qual é a função do filtro azul em um microscópio ótico?

    <p>Filtrar comprimentos de onda maiores e servir como barreira para calor.</p> Signup and view all the answers

    Qual dos seguintes métodos de corte utiliza temperaturas baixas para estabilizar o tecido?

    <p>Criostato</p> Signup and view all the answers

    O corte no vibratomo aplica uma força elevada ao tecido para conseguir cortes mais precisos.

    <p>False</p> Signup and view all the answers

    Quais são as vantagens do corte no criostato em relação ao micrótomo?

    <p>Não é necessário desidratar os tecidos e evita artefatos derivados de cristais de gelo.</p> Signup and view all the answers

    Os cortes podem ser __________, oblíquos e longitudinais.

    <p>transversais</p> Signup and view all the answers

    Associe os métodos de corte às suas características principais:

    <p>Micrótomo = Corte em camadas finas usando parafina Criostato = Corte de tecidos congelados Vibratomo = Corte que minimiza danos Banho de água = Colocação dos cortes na lâmina</p> Signup and view all the answers

    Qual dos seguintes não é um benefício do corte no vibratomo?

    <p>Os cortes são mais fáceis de manusear</p> Signup and view all the answers

    O posicionamento do tecido na lâmina é facilitado no método de corte no criostato.

    <p>False</p> Signup and view all the answers

    Qual é uma desvantagem do uso de cortes no criostato?

    <p>Os cortes são mais delicados e difíceis de manusear.</p> Signup and view all the answers

    Qual dos seguintes parâmetros não está relacionado à microscopia ótica?

    <p>Cor da amostra</p> Signup and view all the answers

    A microscopia de campo claro é mais cara que a de contraste de fase.

    <p>False</p> Signup and view all the answers

    Quais são as duas vantagens da microscopia de campo claro?

    <p>A ótica não muda a cor das estruturas observadas e requer poucos ajustes antes da observação.</p> Signup and view all the answers

    A técnica de microscopia que aumenta a visibilidade de objetos mais claros em um fundo escuro é conhecida como __________.

    <p>campo escuro</p> Signup and view all the answers

    Combine as técnicas de microscopia com suas descrições:

    <p>Campo claro = Contraste determinado pela absorção de luz Campo escuro = Fundo escuro aumenta visibilidade de objetos claros Contraste de fase = Aumenta o contraste de amostras quase transparentes DIC = Contraste diferencial de interferência</p> Signup and view all the answers

    Qual técnica é particularmente adequada para visualização ao vivo devido à baixa energia utilizada?

    <p>Microscopia de transmissão de luz</p> Signup and view all the answers

    A microscopia ótica pode apenas observar amostras que possuem estruturas visíveis por si só.

    <p>False</p> Signup and view all the answers

    Quais amostras são especialmente mencionadas como difíceis de visualizar com microscopia de campo claro?

    <p>Bactérias e células vivas aderentes.</p> Signup and view all the answers

    Qual é a principal característica dos filtros de excitação?

    <p>São normalmente de passe curto</p> Signup and view all the answers

    Os filtros múltiplos permitem uma obtenção de imagem mais lenta em comparação aos filtros únicos.

    <p>False</p> Signup and view all the answers

    Quais tipos de objetivas são consideradas ideais para microscopia de fluorescência?

    <p>Objetivas de fluorite e apocromáticas</p> Signup and view all the answers

    Os espelhos dicroicos __________ alguns comprimentos de onda e permitem a passagem de outros.

    <p>refletem</p> Signup and view all the answers

    Associe os tipos de filtros às suas características:

    <p>Filtro único = Elevado sinal em relação ao ruído Filtro múltiplo = Recolha de imagem mais rápida Espelho dicroico = Reflete alguns comprimentos de onda Objetiva de fluorite = Transparente à luz UV</p> Signup and view all the answers

    Qual é a vantagem das câmaras monocromáticas na microscopia de fluorescência?

    <p>Têm mais tons entre preto e branco</p> Signup and view all the answers

    As objetivas de microscopia devem ser feitas de vidro altamente fluorescente para melhor resolução.

    <p>False</p> Signup and view all the answers

    Por que é importante ter em consideração os filtros dos microscópios antes de comprar anticorpos?

    <p>Um anticorpo fica mais barato do que filtros novos.</p> Signup and view all the answers

    Study Notes

    Métodos de Investigação em Microscopia

    •  O microscópio, inventado em 1624, é um instrumento que permite observar objetos muito pequenos, como células.
    •  A microscopia é o estudo e aplicação dos microscópios para observar objetos de dimensões invisíveis a olho nu.
    •  A pedra de leitura (1000 AC) foi o primeiro cristal de rocha utilizado como lente pelo homem.
    •  Zacharias Janssen e seu filho criaram os primeiros microscópios em 1595 aumentando imagens 3 vezes quando fechados e 10 vezes quando estendido.
    •  Os microscópios compostos funcionam com lentes convergentes, tal como os nossos olhos.
    •  Marcello Malpighi (1628-1694) foi um anatomista que descobriu capilares em 1660.
    •  Robert Hooke (1653-1703) publicou o livro Micrographia em 1665, descrevendo suas observações utilizando um microscópio composto.
    •  Anton Van Leeuwenhoek (1632-1723) projetou microscópios simples que permitiram a observação de microorganismos.
    •  O século XVII viu a palavra "microscópio" usada pela academia Lincei.
    •  O século XIX trouxe novas técnicas de fabricação de lentes, permitindo uma resolução de 0,2 µm nos microscópios óticos que se mantêm até hoje.
    •  Charles Sédillot (1878) cunhou o termo “micróbio”.
    •  Ernest Abbe e Carl Zeiss (1877) formularam leis para definir a distância de resolução de objetivas.
    •  Dr. Otto Schott (1886) desenvolveu lentes apocromáticas.
    •  Henri Hureau de Sénarmont criou um compensador de retardo de luz polarizada.
    •  William Hyde Wollaston criou um prisma que é fundamental na interferometria e microscopia de contraste de interferência diferencial.
    •  George Normarski desenvolveu o método microscópio de contraste de interferência diferencial.
    •  August Kohler formulou regras para a correção de luz do objeto, permitindo resolução e contrasto otimizados no microscópio.
    •  Ernest Ruska inventou o microscópio eletrônico em 1930 ampliando a capacidade de observação até ao nível atómico.
    •  A microscopia crio-eletrônica (2017) permite visualizar a estrutura de biomoléculas em solução com alta resolução, permitindo o estudo de seu movimento e modificações.
    •  A técnica de LUPA, também conhecida como estereomicroscopia, permite a observação em 2 ou 3 dimensões, oferecendo alto contraste.
    • A técnica de microscopia de fluorescência utiliza a emissão de luz por moléculas para visualizar estruturas dentro das células.
    •  Os fluorocromos são moléculas que emitem luz quando expostas a luz de comprimento de onda específico, permitindo marcar componentes celulares para visualização.
    • O fotobleaching e a autofluorescência são limitações potenciais da microscopia de fluorescência.
    • A fixação de tecidos para microscopia envolve diferentes métodos para preservar a estrutura das células.
    • A coloração é um processo crucial para aumentar o contraste das imagens de microscopia, podendo usar corantes fluorescentes ou não.
    • Processamentos, como recolha, fixação, lavagem, desidratação, impregnação e inclusão também são cruciais.
    •  O corte em criostato é usado para amostras congeladas, enquanto o corte em vibratomo é usado para amostras embebidas.
    •  As microscopias ótica e eletrônica possuem limitações e vantagens e diferentes tipos e funcionalidades.

    Processamento de Amostras para Microscopia Ótica

    •  A recolha envolve remover o tecido a ser analisado, registrando sua posição e orientação.
    •  Fixação preserva a estrutura celular, usando fixadores químicos.
    •  Lavagem remove o excesso de fixador.
    •  Desidratação substitui gradualmente a água por solventes orgânicos.
    •  Inclusão envolve embebimento da amostra em parafina, para cortar secções finas.
    •  O corte é feito com um micrótomo.

    Processamento de Amostra para Microscopia Eletrônica

    • Amostras são preparadas primeiramente para serem utilizadas na microscopia eletronica

    Microscopia Ótica

    • Técnicas para Microscopia Ótica incluem microscopia de campo claro, microscopia de contraste de fase, microscopia de contraste de interferência diferencial.
    • Várias considerações, como a magnificação, o tamanho do campo, a escolha de um filtro correcto para diferentes espectros, a cor e as aberrações ópticas da objetiva, são factores a ter em conta na escolha de uma objetiva.

    Microscopia de Fluorescência

    • Os fluorocromos são substâncias que exibem fluorescência característica com diferentes comprimentos de onda de emissão e excitação.
    • O conjunto de filtros fluorescentes tem três componentes principais: filtro de excitação, espelho dicróico e filtro de emissão.

    Tipos de Microscopia

    • Microscopia de campo claro e de campo escuro
    • Microscopia de contraste de fase
    • Microscopia de interferência

    Limitações da Microscopia de Fluorescência

    • Autofluorescência
    • Efeito bleed-though
    • Fotobleaching (fotodegradação) do corante
    • Fototoxicidade de células vivas

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    Description

    Teste seus conhecimentos sobre os métodos de preparação de amostras para microscopia, incluindo fixação, desidratação e técnicas específicas de microscopia. Perguntas abrangem desde a utilização de fixadores até os princípios da microscopia eletrônica. Ideal para estudantes de biologia e áreas relacionadas.

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