Istologia: Campioni e Processazione

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Questions and Answers

Qual è la principale limitazione nell'uso di sonde per la marcatura?

La necessità di anticorpi specifici

Problemi legati alla specie non sono presenti (correct)

Le sonde non possono essere sintetizzate a basso costo

La disponibilità di sonde fluorescenti è scarsa

Qual è il potere di risoluzione dell'occhio umano?

1.0 mm

0.2 mm (correct)

0.1 mm

0.5 mm

Quali sono le dimensioni medie di una cellula?

10-30 µm (correct)

100-200 µm

50-100 µm

5-15 µm

Cosa viene utilizzato per osservare campioni non colorati?

Contrasto di fase o interferenziale Signup and view all the answers

Qual è la dimensione massima di ovocita menzionata?

100-150 µm Signup and view all the answers

Qual è la funzione del condensatore nel microscopio ottico?

Convergere i raggi luminosi sul preparato Signup and view all the answers

Quale delle seguenti affermazioni sulla colorazione delle cellule è corretta?

Il nucleo appare viola quando colorato con ematossilina. Signup and view all the answers

Quale tipo di sonda può essere utilizzata per la valutazione dell'integrità dell'mRNA?

Sonde di controllo e antisenso Signup and view all the answers

Qual è lo spessore delle sezioni prodotto da un microtomo standard?

5-10 µm Signup and view all the answers

Quale microscopio è stato menzionato nel contenuto per l'osservazione ottica?

Microscopio Leitz HM-LUX 3 Signup and view all the answers

Quale delle seguenti colorazioni è un metodo di istocimica per studiare la composizione cellulare?

Masson’s tricromica Signup and view all the answers

Quale metodo utilizza anticorpi specifici per l'analisi cellulare?

Immunoistochimica Signup and view all the answers

Che cosa analizza l'ibridazione in situ?

Il mRNA o frammenti di DNA Signup and view all the answers

Quale componente è considerato inorganico nel contesto cellulare?

Fosfato Signup and view all the answers

Qual è uno spessore delle sezioni ottenuto con un ultramicrotomo?

50-100 nm Signup and view all the answers

Qual è l'obiettivo principale della colorazione istocimica?

Colorare i componenti cellulari per studiarne la natura chimica Signup and view all the answers

Quale metodo sfrutta le diverse densità ottiche per creare immagini chiare e scure senza coloranti?

Contrasto di fase Signup and view all the answers

Quale tipo di microscopio è progettato per osservare cellule in coltura con ingrandimento minore?

Microscopio rovesciato Signup and view all the answers

Quale tecnica utilizza un raggio UV per colpire un campione, al fine di emettere luce fluorescente?

Epifluorescenza Signup and view all the answers

Qual è la principale differenza tra la microscopia a trasmissione (TEM) e la microscopia elettronica a scansione?

La TEM richiede sezioni ultrasottili del campione, mentre la scansione non le utilizza. Signup and view all the answers

Quale tipo di microscopio si considera l'equivalente elettronico del microscopio stereo?

Microscopio elettronico a scansione Signup and view all the answers

Qual è la capacità di risoluzione di un microscopio?

Riconoscere come distinti due punti estremamente vicini Signup and view all the answers

Quale metodo utilizza il principio dell’interferenza della luce per creare un’immagine tridimensionale?

Contrasto interferenziale Signup and view all the answers

Cosa fa un filtro di sbarramento in un microscopio a epifluorescenza?

Fa passare la luce colorata senza UV Signup and view all the answers

Qual è il principale obiettivo della fissazione in istologia?

Impedire autolisi e putrefazione Signup and view all the answers

Quale delle seguenti è una tecnica di fissazione fisica?

Essicazione ad aria Signup and view all the answers

Durante la preparazione di un campione per la microscopia, quale fase segue la fissazione?

Colorazione Signup and view all the answers

Quale metodo di microscopia è specificamente indicato per analizzare campioni fissati?

Microscopia a fluorescenza Signup and view all the answers

Quale delle seguenti opzioni descrive una caratteristica della fissazione chimica?

Utilizza vapori che si liberano dalla soluzione fissativa Signup and view all the answers

Quale tra queste affermazioni sui fissativi è corretta?

Gli acidi garantiscono una buona conservazione della morfologia cellulare senza sciogliere i grassi. Signup and view all the answers

Qual è la principale caratteristica delle resine epossidiche e metacrilati per inclusione?

Rendono i preparati più rigidi e permettono sezioni molto sottili per la microscopia elettronica. Signup and view all the answers

Per quale motivo il liquido di Carnoy è particolarmente utile nella fissazione?

Non modifica la struttura dei glucidi. Signup and view all the answers

Qual è il passo fondamentale per la disidratazione durante il processo di inclusione?

Infiltrare il campione con paraffina fusa o resine. Signup and view all the answers

Quale affermazione descrive meglio l'uso dell'OCT nella fissazione?

È un metodo di fissazione che riduce la conservazione della morfologia dei campioni. Signup and view all the answers

Study Notes

Istologia: Preparazione e Processazione Campioni

Lo studio istologico prevede la preparazione e processazione di campioni di tessuto o di cellule in coltura.
Le fasi dell'analisi morfologica:
- Tipo di preparato: campioni di tessuto o cellule in coltura.
- Allestimento dei preparati:
  - Prelievo: Deve essere effettuato nel più breve tempo possibile e, se necessario, conservare a freddo fino alla fissazione.
  - Fissazione: Impedisce l'autolisi e la putrefazione. Tipologie: fisica (calore, fiamma, essiccazione) o chimica (perfusione, immersione, vapori).
  - Sezionamento: suddivisione del campione in sezioni sottili (5-10 µm).
  - Colorazione: rendere i campioni visibili al microscopio ottico.
- Esame dei preparati:
  - Microscopia ottica: campo chiaro, fluorescenza,
  - Microscopia elettronica: trasmissione, scansione.
Tipi di campioni biologici:
- Pezzi di organo o organi interi.
- Pellets di cellule.
- Cellule coltivate su vetrino.
- Ovociti ed embrioni.
Allestimento dei preparati istologici:
- Fissazione.
- Disidratazione e diafanizzazione.
- Inclusione.
- Taglio.

Fissazione

La fissazione blocca i costituenti cellulari e tissutali in uno stato vicino a quello vitale.
Fissazione fisica:
- Calore: utilizzato per la citologia, o con fiamma (alcuni minuti).
- Essiccazione: utilizzato per citologia, aria a temperatura ambiente.
- Congelamento.
Fissazione chimica:
- Fissazione per perfusione: sistema vascolare.
- Fissazione per immersione: tempo, organo e dimensioni.
- Fissazione per vapori: vapori rilasciati da soluzioni fissative.

Fissativi Semplici

Aldeidi (formaldeide, glutaraldeide): migliorano la conservazione a lungo termine, legando le proteine.
Alcoli (etilico e metilico): conservano parzialmente le proteine, ma sciolgono i lipidi.
Acidi (acetico, picrico): conservano la morfologia delle cellule senza sciogliere i grassi.
Sali di metalli pesanti (bicromato di potassio, cloruro di mercurio): conservano glucidi e stabilizzano proteine e acidi grassi.

Inclusione

L'inclusione serve ad indurre il preparato in modo da poterlo sezionare in fettine di 5-10 µm.
Il metodo basato sulla paraffina è molto diffuso.
Le resine epossidiche e i metacrilati forniscono sezioni più resistenti per la microscopia elettronica.

Microscopia Ottica

Campo chiaro.
Fluorescenza.
Contrasto di fase.
Contrasto interferenziale.

Microscopia Elettronica

Trasmissione (TEM): raggi elettronici attraversano il campione.
Scansione (SEM): raggi elettronici "rimbalzano" sulla superficie del campione.

Colorazione

Ematossilina: lega gli acidi nucleici, colorando il nucleo di viola.
Eosina: lega le componenti basiche del citoplasma, colorandolo di rosa.

Altre Colorazioni: Istochimica Ed Immunoistochimica

Istochimica: metodologia che usa reazioni chimiche per studiare la natura chimica delle componenti cellulari.
Immunoistochimica: utilizza anticorpi contro specifiche molecole per visualizzarle in modo molto più potente rispetto alla colorazione istochimica.

Altre Colorazioni: Ibridazione In Situ

Ibridazione in situ: si utilizzano sonde di acidi nucleici, invece di anticorpi, per evidenziare mRNA o frammenti specifici di DNA.

Microscopi

Microscopio ottico.
Microscopio elettronico a trasmissione (TEM).
Microscopio elettronico a scansione (SEM).
Criostato.
Microtomo.
Microscopio rovesciato.
Stereo microscopio.

Artefatti nei Preparati Istologici

Contrazione dei vasi.
Pieghe.
Contaminazione.

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Description

Questo quiz esplora la preparazione e processazione di campioni istologici. Scoprirai le fasi cruciali come il prelievo, la fissazione, il sezionamento e la colorazione, oltre ai diversi tipi di microscopia utilizzati per l'analisi. Testa le tue conoscenze sui principali metodi di studio istologico.