Microscopia Óptica: Processamento de Amostras
48 Questions
0 Views

Choose a study mode

Play Quiz
Study Flashcards
Spaced Repetition
Chat to Lesson

Podcast

Play an AI-generated podcast conversation about this lesson

Questions and Answers

Qual é a primeira etapa do processamento de amostras para microscopia ótica?

  • Recolha (correct)
  • Fixação
  • Desidratação
  • Impregnação

Qual fixador é comumente utilizado para tecidos animais?

  • Ácido acético
  • Formol ou formaldeídos (correct)
  • Etanol absoluto
  • Cloreto de mercúrio

Qual é um dos métodos de fixação seca mencionados?

  • Ácido crómico
  • Permanganato de potássio
  • Cera de carbono 6000 (correct)
  • Formaldeído

Qual é o processo que visa diminuir a percentagem de água na amostra?

<p>Desidratação (B)</p> Signup and view all the answers

Qual das opções é uma combinação de reagentes para fixação?

<p>Tetróxido de ósmio e glutaraldeído (A)</p> Signup and view all the answers

Quantas passagens em etanol absoluto são realizadas durante a desidratação?

<p>Duas (A)</p> Signup and view all the answers

Qual método é utilizado para a fixação por ondas eletromagnéticas?

<p>Fixação por micro-ondas (D)</p> Signup and view all the answers

Qual opção não é um agente fixador mencionado?

<p>Ácido clorídrico (C)</p> Signup and view all the answers

Qual é a origem etimológica da palavra microscópio?

<p>Do grego 'mikros' (pequeno) e 'skopein' (ver/examinar) (B)</p> Signup and view all the answers

Qual das seguintes invenções precedeu a criação do microscópio?

<p>Óculos em 1280 (A)</p> Signup and view all the answers

Qual foi uma das contribuições de Marcello Malpighi para a microscopia?

<p>Observação de capilares e estudos sobre o desenvolvimento de sementes (A)</p> Signup and view all the answers

Qual é a característica que diferencia o microscópio do telescópio?

<p>O microscópio possui mais de uma lente convergente (B)</p> Signup and view all the answers

Quem é reconhecido como o pai da embriologia e histologia primordial?

<p>Marcello Malpighi (A)</p> Signup and view all the answers

O que foi publicado por Robert Hooke em 1665?

<p>O livro 'Micrografia' (B)</p> Signup and view all the answers

Quando os primeiros microscópios foram fabricados por Zacharias Janssen?

<p>No século XVI (A)</p> Signup and view all the answers

Qual era o aumento máximo dos primeiros microscópios feitos por Zacharias Janssen?

<p>3 vezes quando fechados e 10 vezes estendido (B)</p> Signup and view all the answers

Qual é o primeiro passo na preparação de amostras que envolvem parafina?

<p>Dissolução da parafina (B)</p> Signup and view all the answers

Qual é a corante ácido que cora as proteínas nas amostras?

<p>Eosina (C)</p> Signup and view all the answers

O que se utiliza para melhorar a compatibilidade das amostras com as resinas de montagem?

<p>Diafanização com xilol (A)</p> Signup and view all the answers

Qual é a série decrescente de concentração em álcool usada na reidratação?

<p>Etanol absoluto, 95%, 75%, 50%, água (A)</p> Signup and view all the answers

Qual procedimento é realizado após a desidratação das amostras?

<p>Diafanização (C)</p> Signup and view all the answers

Para que serve o microarray na biologia celular?

<p>Analisar amostras de tecidos em uma matriz (C)</p> Signup and view all the answers

O que o hemalumen cora nas células?

<p>Ácidos nucleicos (A)</p> Signup and view all the answers

Qual é a origem da palavra 'microorganismos'?

<p>Mikros, que significa pequeno, e organismo, que se refere a seres vivos. (A)</p> Signup and view all the answers

Quais resinas podem ser utilizadas na fase de montagem das amostras?

<p>Resinas naturais e sintéticas (A)</p> Signup and view all the answers

O que define a distância mínima resolvente em um microscópio ótico?

<p>A distância mínima entre 2 pontos que podem ser distinguidos como entidades separadas. (D)</p> Signup and view all the answers

Qual a característica das lentes apocromáticas?

<p>Elas otimizam a luz para três cores: azul, verde e vermelha. (A)</p> Signup and view all the answers

Qual a função do compensador de retardação de Sénarmont?

<p>Transmitem luz polarizada e circularizam a luz. (C)</p> Signup and view all the answers

Qual a importância do prisma de Wollaston na microscopía?

<p>Ele é fundamental na interferometria e microscopia de contraste de interferência diferencial. (C)</p> Signup and view all the answers

Quem formulou as lentes de óculos que corrigem cores?

<p>Otto Schott. (A)</p> Signup and view all the answers

O que caracteriza a microscopia de contraste de interferência de Normaski?

<p>É usada para estudar amostras biológicas e tecidos não suportados. (C)</p> Signup and view all the answers

Qual contribuição August Kohler fez para a microscopía?

<p>Definiu as regras de correção de luz do objeto. (D)</p> Signup and view all the answers

Qual é o principal benefício de utilizar o vibratomo para cortes de tecido?

<p>Reduz a força aplicada ao tecido, minimizando danos. (D)</p> Signup and view all the answers

Qual técnica requer a incorporação do tecido em agarose a baixas temperaturas?

<p>Vibratomo (D)</p> Signup and view all the answers

Qual das seguintes desvantagens é verdadeira em relação ao uso do criostato?

<p>Os cortes são mais delicados e difíceis de manusear. (D)</p> Signup and view all the answers

O que se deve fazer antes de colar os cortes no banho de água?

<p>Aparar o bloco até chegar ao espécime. (B)</p> Signup and view all the answers

Quais cortes podem ser realizados com base na orientação do órgão?

<p>Cortes transversais, oblíquos e longitudinais. (A)</p> Signup and view all the answers

Qual é um dos principais problemas ao se utilizar o vibratomo no manuseio dos cortes?

<p>A penetrabilidade de anticorpos e reagentes pode ser mais lenta. (D)</p> Signup and view all the answers

Qual dos seguintes métodos é essencial para evitar artefatos derivados de cristais de gelo?

<p>Congelar o tecido ao invés de utilizar parafina. (A)</p> Signup and view all the answers

Qual procedimento deve ser realizado após colocar os cortes na lâmina?

<p>Passar a lâmina em um banho de água quente para derreter a parafina. (C)</p> Signup and view all the answers

Qual técnica de microscopia utiliza luz transmitida para distinguir características morfológicas?

<p>Microscopia de campo claro (D)</p> Signup and view all the answers

Qual é uma vantagem da microscopia de campo claro em relação a outras técnicas?

<p>Não modifica a cor das estruturas observadas (B)</p> Signup and view all the answers

O que determina o contraste na microscopia de campo claro?

<p>Diferenças na absorção de luz ou índice de refração (D)</p> Signup and view all the answers

Qual técnica de microscopia é mais adequada para visualização de bactérias?

<p>Contraste de fase (B)</p> Signup and view all the answers

Qual dos seguintes parâmetros não é considerado ao escolher uma técnica de microscopia?

<p>Tempestade atmosférica (C)</p> Signup and view all the answers

Em qual situação a microscopia de campo escuro é preferida?

<p>Quando se deseja visualizar objetos mais brilhantes em um fundo escuro (A)</p> Signup and view all the answers

Qual técnica de microscopia permite a visualização ao vivo de amostras devido à baixa energia utilizada?

<p>Microscopia de transmissão de luz (D)</p> Signup and view all the answers

Qual dos seguintes métodos é utilizado para aumentar o contraste de amostras quase transparentes?

<p>Microscopia de contraste de fase (D)</p> Signup and view all the answers

Flashcards

Microscópio

O microscópio é um instrumento que permite visualizar detalhes minúsculos, invisíveis a olho nu, ampliando a imagem.

Microscopia

Microscopia é o estudo e aplicação do microscópio para analisar objetos minúsculos, como células.

Origem da palavra "microscópio"

A palavra "microscópio" deriva do grego "mikros" (pequeno) e "skopein" (ver/examinar).

Microscópio e a geração espontânea

A descoberta do microscópio foi essencial para refutar a teoria da geração espontânea, que acreditava que a vida podia surgir de matéria não viva.

Signup and view all the flashcards

A primeira lente

A primeira lente criada pelo homem foi a pedra de leitura, um cristal de rocha datado de 721 a.C.

Signup and view all the flashcards

Primeiros microscópios compostos

Zacharias Janssen e seu filho, fabricantes de óculos, criaram os primeiros microscópios compostos por volta de 1500. Esses microscópios aumentavam a imagem 3 vezes ou mais.

Signup and view all the flashcards

Como as lentes do microscópio funcionam

As lentes dos microscópios convergem a luz, da mesma forma que as lentes dos nossos olhos, para amplificar a imagem.

Signup and view all the flashcards

Microscópio vs. Telescópio

A diferença entre o microscópio e o telescópio é que o microscópio tem uma lente adicional próxima ao objeto, permitindo o foco em objetos muito pequenos.

Signup and view all the flashcards

Recolha

O processo de coleta do material biológico para análise microscópica. Inclui a coleta de tecido da área afetada e da zona periférica. No caso de órgãos pareados, deve-se sinalizar o lado esquerdo ou direito e a orientação no corpo.

Signup and view all the flashcards

Fixação

O processo de preservação da estrutura celular da amostra biológica através do uso de soluções químicas. O fixador impede a degradação dos tecidos.

Signup and view all the flashcards

Desidratação

O uso de soluções químicas para remover a água do tecido e permitir a penetração da parafina, preparando a amostra para corte.

Signup and view all the flashcards

Impregnação e inclusão

O processo de substituir o solvente usado na desidratação por parafina, que irá envolver a amostra e permitir que seja cortada em fatias finas.

Signup and view all the flashcards

Fixadores

Soluções químicas que preservam a estrutura celular e permitem a visualização detalhada das células e tecidos sob o microscópio.

Signup and view all the flashcards

Formaldeído

Um tipo de fixador comum que preserva a estrutura celular. É utilizado para a preparação de amostras de tecidos animais.

Signup and view all the flashcards

Etanol na desidratação

O uso de álcoois para remover gradualmente a água da amostra biológica, preparando-a para a impregnação com parafina.

Signup and view all the flashcards

Xilol na impregnação

O uso de xilol para remover o etanol da amostra biológica, preparando-a para a impregnação com parafina.

Signup and view all the flashcards

Resolução em microscopia

A distância mínima entre dois pontos que podem ser distinguidos como entidades separadas em um espécime.

Signup and view all the flashcards

Lei de Abbe

A lei que define a distância mínima resolvente de uma objetiva, relacionando-a com o comprimento de onda da luz e a abertura numérica.

Signup and view all the flashcards

Lentes acromáticas

Lentes que corrigem duas cores (azul e vermelho) para imagens mais nítidas.

Signup and view all the flashcards

Lentes apocromáticas

Lentes que corrigem três cores (azul, verde e vermelho) para imagens ainda mais nítidas.

Signup and view all the flashcards

Compensador de Sénarmont

Um dispositivo que permite observar a luz polarizada, útil para visualizar detalhes em materiais como pedras em um rio.

Signup and view all the flashcards

Prisma de Wollaston

Um prisma que divide a luz em dois feixes polarizados, importante para a microscopia de contraste de interferência diferencial.

Signup and view all the flashcards

Microscopia de Contraste de Interferência Diferencial (DIC)

Um método de microscopia que usa interferência da luz para aumentar o contraste das amostras, especialmente de materiais biológicos e tecidos.

Signup and view all the flashcards

Correção de luz do objeto (Kohler)

Regras para iluminar corretamente amostras em microscopia, para obter imagens idealmente contrastadas e claras.

Signup and view all the flashcards

Corte no criostato

Um método de preparação de amostras para microscopia que envolve congelar o tecido a baixas temperaturas e fazer cortes no criostato.

Signup and view all the flashcards

Corte no vibratomo

É similar ao micrótomo, mas usa uma lâmina vibratória para minimizar danos a estruturas delicadas.

Signup and view all the flashcards

Benefício do vibratomo: Agarose

Um dos benefícios do vibratomo é a possibilidade de usar agarose para dar estabilidade ao tecido durante o corte.

Signup and view all the flashcards

Benefício do vibratomo: Preservação Celular

Outra vantagem do vibratomo é que ele permite usar cortes sem desidratação prévia, o que preserva os constituintes celulares.

Signup and view all the flashcards

Desvantagem do vibratomo: Delicado

Uma desvantagem do vibratomo é que os cortes são mais delicados e difíceis de manusear.

Signup and view all the flashcards

Desvantagem do vibratomo: Posicionamento

Outra desvantagem do vibratomo é a dificuldade de posicionamento na lâmina.

Signup and view all the flashcards

Plano de corte

Os cortes podem ser transversais, oblíquos ou longitudinais, o que exige orientação do órgão para análise.

Signup and view all the flashcards

Orientação do corte

A orientação do corte permite determinar a direção do plano em relação ao órgão em estudo.

Signup and view all the flashcards

Remoção da parafina

O processo de remover a parafina do tecido antes da coloração. A parafina é dissolvida em xilol.

Signup and view all the flashcards

Coloração

A coloração mais comum, H&E, que cora os núcleos das células com azul (hemalumen) e o citoplasma com rosa (eosina).

Signup and view all the flashcards

Hemalumen

Um corante básico que colora os núcleos celulares (contêm ácidos nucleicos) em azul. Eles também podem ser chamados de acidófilos.

Signup and view all the flashcards

Eosina

Um corante ácido que colora as proteínas no citoplasma das células em rosa. Também pode ser chamado de basofílico.

Signup and view all the flashcards

Diafanização

A etapa onde a amostra é colocada em xilol para torná-la compatível com as resinas de montagem.

Signup and view all the flashcards

Montagem

A etapa final onde a amostra é coberta com resina e uma lamela para proteção e visualização no microscópio.

Signup and view all the flashcards

Microscopia de transmissão de luz

Microscopia de transmissão de luz é uma técnica onde a luz atravessa a amostra, revelando detalhes morfológicos, propriedades óticas e, com coloração fluorescente, a estrutura interna das células. Ideal para amostras transparentes ou células vivas, permitindo a observação da atividade celular em tempo real.

Signup and view all the flashcards

Microscopia de campo claro

O contraste é gerado pelas diferenças na absorção de luz pela amostra e no índice de refração. A imagem é formada pela luz que atravessa a amostra, revelando diferenças de cor e estruturas.

Signup and view all the flashcards

Aplicações da microscopia de campo claro

A microscopia de campo claro é utilizada principalmente para visualizar amostras coradas com corantes que absorvem a luz, como hematoxilina e eosina.

Signup and view all the flashcards

Microscopia de campo escuro

O contraste é aumentado bloqueando a luz que passa diretamente pelo objeto, deixando apenas a luz difratada (espalhada) pela amostra visível. O resultado é uma imagem brilhante do objeto contra um fundo escuro.

Signup and view all the flashcards

Microscopia de contraste de fase

A microscopia de contraste de fase converte diferenças de índice de refração em diferenças de amplitude (intensidade) de luz, revelando detalhes morfológicos que seriam invisíveis em campo claro.

Signup and view all the flashcards

Microscopia DIC (Contraste Diferencial de Interferência)

O contraste é estabelecido por meio da interferência de duas ondas de luz polarizadas que atravessam a amostra. As diferenças no índice de refração da amostra geram padrões de interferência, revelando detalhes estruturais.

Signup and view all the flashcards

Magnificação

A magnificação é o aumento da imagem do objeto, permitindo visualizar detalhes minúsculos. Quanto maior, mais detalhes você pode ver, mas o campo de visão diminui.

Signup and view all the flashcards

Abertura Numérica (NA)

A abertura numérica (NA) indica a quantidade de luz que a lente consegue captar. Quanto maior a NA, maior a resolução (a capacidade de discriminar dois pontos próximos) e melhor o contraste.

Signup and view all the flashcards

Study Notes

Métodos de Investigação em Microscopia

  • Este documento discute os métodos de investigação em microscopia.
  • Abrange a história, técnicas e princípios dos microscópios.
  • Inclui diferentes tipos de microscopia, como a ótica e eletrônica.
  • Explora o processamento de amostras para observação microscópica.

Enquadramento Histórico

  • O microscópio, inventado em 1624, foi crucial para a compreensão da estrutura celular.
  • Instrumentos para tornar pequenos detalhes visíveis.
  • Cristais de rocha (1000 AC) foram usados como primeiras lentes.
  • Microscópios primordiais (1500): Zacharias Janssen e seu filho criaram os primeiros microscópios, capazes de aumentar imagens 3 a 10 vezes.
  • Século XVII: Palavra microscópio tornou-se oficial na academia Lincei.
  • Marcello Malpighi: Observou capilares e fez primeiras observações sobre desenvolvimento de sementes (1660).
  • Robert Hooke: Publicou "Micrografia" (1665) descrevendo células.
  • Antoni van Leeuwenhoek: Microscópio simples, capaz de aumentar 275 vezes (1683).

Técnicas de Investigação em Microscopia

  • Microscopia: Estudo e aplicação de microscópios para observar objetos pequenos.
  • Microscópios compostos: Funcionam como as lentes dos nossos olhos.
  • Microscopia vs. Telescópio: Diferenças nos instrumentos, objetivas e aplicações.

Século XIX - Século XX

  • Novas técnicas de manufatura foram desenvolvidas para aperfeição de lentes.
  • Século XIX: Melhorias na resolução chegaram a 0,2 µm.
  • Charles Sédillot (1878): Designou a palavra micróbio (organismo pequeno).
  • Ernest Abbe e Carl Zeiss (1877): Descreveram leis da física para a resolução de objetivas.
  • Dr. Otto Schott (1886): Criou as primeiras objetivas apocromáticas.
  • Henri Hureau de Sénarmont: Criou compensador de retardação de luz polarizada.
  • Século XX: Avanços significativos em microscopia, incluindo a microscopia de contraste de interferência, microscopia de polarização e de epifluorescência.

Processamento de amostras para microscopia ótica

  • Recolha, Fixação, Lavagem, Desidratação, Impregnação e Inclusão.
  • Técnicas importantes para preparar amostras para análise microscópica.
  • Corte no Criostato, Corte no Vibratomo.

Remoção da resina/parafina, Reidratação, Coloração, Desidratação, Diafanização, Montagem

  • Procedimentos adicionais para preparação de amostras.
  • Usam-se alcoóis e xilol.
  • Corantes H&E (hematoxilina-eosina) são comumente utilizados.
  • Técnicas permitem que a amostra esteja preparada para análise microscópica.

Microscopia Ótica: Campo Claro, Campo Escuro, Contraste de Fase, DIC

  • Diferentes técnicas de microscopia ótica que utilizam luz com diferentes objetivos.
  • As imagens podem ser diferentes dependendo da técnica utilizada e dos requisitos do microscópio.

Microscopia Eletrônica

  • Microscopia crio-eletrônica (2017): Técnica para determinar a estrutura de biomoléculas.
  • Microscópio eletrónico: Ernest Ruska (anos 30).
  • Ampliações elevadas, até nível atômico.

Microscopia de Fluorescência

  • Fluorocromos: Moléculas que emitem luz quando excitadas por luz.
  • As características determinam o ambiente químico (pH, etc.) e as características requeridas.
  • Componentes de microscópios de fluorescência: fonte de luz, cubo de filtros, lentes, câmeras.

Limitações da Microscopia de Fluorescência

  • Autofluorescência das células.
  • Efeito bleed-through dos filtros.
  • Fotobleaching (desbotamento).
  • Este documento fornece um resumo detalhado sobre métodos de investigação em microscopia.

Studying That Suits You

Use AI to generate personalized quizzes and flashcards to suit your learning preferences.

Quiz Team

Related Documents

Métodos de Investigação em Microscopia PDF - 2024

Description

Teste seus conhecimentos sobre as etapas do processamento de amostras para microscopia ótica. Questões sobre fixadores comuns, métodos de desidratação e a história do microscópio estão incluídas. Descubra o que você sabe sobre este fascinante campo da ciência!

More Like This

Optical Microscopy Techniques
40 questions

Optical Microscopy Techniques

PrincipledPansy avatar
PrincipledPansy
Types of Optical Microscopes
10 questions

Types of Optical Microscopes

NiftyLesNabis avatar
NiftyLesNabis
Preparación de Muestras para Microscopía Óptica
7 questions

Preparación de Muestras para Microscopía Óptica

RewardingCoral avatar
RewardingCoral
Materials Characterization: Optical Microscopy
37 questions

Materials Characterization: Optical Microscopy

EverlastingEnlightenment412 avatar
EverlastingEnlightenment412
Use Quizgecko on...
Browser
Open
Browser
Browser