Microscopia Óptica: Processamento de Amostras

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Questions and Answers

Qual é a primeira etapa do processamento de amostras para microscopia ótica?

Recolha (correct)

Fixação

Desidratação

Impregnação

Qual fixador é comumente utilizado para tecidos animais?

Ácido acético

Formol ou formaldeídos (correct)

Etanol absoluto

Cloreto de mercúrio

Qual é um dos métodos de fixação seca mencionados?

Ácido crómico

Permanganato de potássio

Cera de carbono 6000 (correct)

Formaldeído

Qual é o processo que visa diminuir a percentagem de água na amostra?

Desidratação Signup and view all the answers

Qual das opções é uma combinação de reagentes para fixação?

Tetróxido de ósmio e glutaraldeído Signup and view all the answers

Quantas passagens em etanol absoluto são realizadas durante a desidratação?

Duas Signup and view all the answers

Qual método é utilizado para a fixação por ondas eletromagnéticas?

Fixação por micro-ondas Signup and view all the answers

Qual opção não é um agente fixador mencionado?

Ácido clorídrico Signup and view all the answers

Qual é a origem etimológica da palavra microscópio?

Do grego 'mikros' (pequeno) e 'skopein' (ver/examinar) Signup and view all the answers

Qual das seguintes invenções precedeu a criação do microscópio?

Óculos em 1280 Signup and view all the answers

Qual foi uma das contribuições de Marcello Malpighi para a microscopia?

Observação de capilares e estudos sobre o desenvolvimento de sementes Signup and view all the answers

Qual é a característica que diferencia o microscópio do telescópio?

O microscópio possui mais de uma lente convergente Signup and view all the answers

Quem é reconhecido como o pai da embriologia e histologia primordial?

Marcello Malpighi Signup and view all the answers

O que foi publicado por Robert Hooke em 1665?

O livro 'Micrografia' Signup and view all the answers

Quando os primeiros microscópios foram fabricados por Zacharias Janssen?

No século XVI Signup and view all the answers

Qual era o aumento máximo dos primeiros microscópios feitos por Zacharias Janssen?

3 vezes quando fechados e 10 vezes estendido Signup and view all the answers

Qual é o primeiro passo na preparação de amostras que envolvem parafina?

Dissolução da parafina Signup and view all the answers

Qual é a corante ácido que cora as proteínas nas amostras?

Eosina Signup and view all the answers

O que se utiliza para melhorar a compatibilidade das amostras com as resinas de montagem?

Diafanização com xilol Signup and view all the answers

Qual é a série decrescente de concentração em álcool usada na reidratação?

Etanol absoluto, 95%, 75%, 50%, água Signup and view all the answers

Qual procedimento é realizado após a desidratação das amostras?

Diafanização Signup and view all the answers

Para que serve o microarray na biologia celular?

Analisar amostras de tecidos em uma matriz Signup and view all the answers

O que o hemalumen cora nas células?

Ácidos nucleicos Signup and view all the answers

Qual é a origem da palavra 'microorganismos'?

Mikros, que significa pequeno, e organismo, que se refere a seres vivos. Signup and view all the answers

Quais resinas podem ser utilizadas na fase de montagem das amostras?

Resinas naturais e sintéticas Signup and view all the answers

O que define a distância mínima resolvente em um microscópio ótico?

A distância mínima entre 2 pontos que podem ser distinguidos como entidades separadas. Signup and view all the answers

Qual a característica das lentes apocromáticas?

Elas otimizam a luz para três cores: azul, verde e vermelha. Signup and view all the answers

Qual a função do compensador de retardação de Sénarmont?

Transmitem luz polarizada e circularizam a luz. Signup and view all the answers

Qual a importância do prisma de Wollaston na microscopía?

Ele é fundamental na interferometria e microscopia de contraste de interferência diferencial. Signup and view all the answers

Quem formulou as lentes de óculos que corrigem cores?

Otto Schott. Signup and view all the answers

O que caracteriza a microscopia de contraste de interferência de Normaski?

É usada para estudar amostras biológicas e tecidos não suportados. Signup and view all the answers

Qual contribuição August Kohler fez para a microscopía?

Definiu as regras de correção de luz do objeto. Signup and view all the answers

Qual é o principal benefício de utilizar o vibratomo para cortes de tecido?

Reduz a força aplicada ao tecido, minimizando danos. Signup and view all the answers

Qual técnica requer a incorporação do tecido em agarose a baixas temperaturas?

Vibratomo Signup and view all the answers

Qual das seguintes desvantagens é verdadeira em relação ao uso do criostato?

Os cortes são mais delicados e difíceis de manusear. Signup and view all the answers

O que se deve fazer antes de colar os cortes no banho de água?

Aparar o bloco até chegar ao espécime. Signup and view all the answers

Quais cortes podem ser realizados com base na orientação do órgão?

Cortes transversais, oblíquos e longitudinais. Signup and view all the answers

Qual é um dos principais problemas ao se utilizar o vibratomo no manuseio dos cortes?

A penetrabilidade de anticorpos e reagentes pode ser mais lenta. Signup and view all the answers

Qual dos seguintes métodos é essencial para evitar artefatos derivados de cristais de gelo?

Congelar o tecido ao invés de utilizar parafina. Signup and view all the answers

Qual procedimento deve ser realizado após colocar os cortes na lâmina?

Passar a lâmina em um banho de água quente para derreter a parafina. Signup and view all the answers

Qual técnica de microscopia utiliza luz transmitida para distinguir características morfológicas?

Microscopia de campo claro Signup and view all the answers

Qual é uma vantagem da microscopia de campo claro em relação a outras técnicas?

Não modifica a cor das estruturas observadas Signup and view all the answers

O que determina o contraste na microscopia de campo claro?

Diferenças na absorção de luz ou índice de refração Signup and view all the answers

Qual técnica de microscopia é mais adequada para visualização de bactérias?

Contraste de fase Signup and view all the answers

Qual dos seguintes parâmetros não é considerado ao escolher uma técnica de microscopia?

Tempestade atmosférica Signup and view all the answers

Em qual situação a microscopia de campo escuro é preferida?

Quando se deseja visualizar objetos mais brilhantes em um fundo escuro Signup and view all the answers

Qual técnica de microscopia permite a visualização ao vivo de amostras devido à baixa energia utilizada?

Microscopia de transmissão de luz Signup and view all the answers

Qual dos seguintes métodos é utilizado para aumentar o contraste de amostras quase transparentes?

Microscopia de contraste de fase Signup and view all the answers

Study Notes

Métodos de Investigação em Microscopia

Este documento discute os métodos de investigação em microscopia.
Abrange a história, técnicas e princípios dos microscópios.
Inclui diferentes tipos de microscopia, como a ótica e eletrônica.
Explora o processamento de amostras para observação microscópica.

Enquadramento Histórico

O microscópio, inventado em 1624, foi crucial para a compreensão da estrutura celular.
Instrumentos para tornar pequenos detalhes visíveis.
Cristais de rocha (1000 AC) foram usados como primeiras lentes.
Microscópios primordiais (1500): Zacharias Janssen e seu filho criaram os primeiros microscópios, capazes de aumentar imagens 3 a 10 vezes.
Século XVII: Palavra microscópio tornou-se oficial na academia Lincei.
Marcello Malpighi: Observou capilares e fez primeiras observações sobre desenvolvimento de sementes (1660).
Robert Hooke: Publicou "Micrografia" (1665) descrevendo células.
Antoni van Leeuwenhoek: Microscópio simples, capaz de aumentar 275 vezes (1683).

Técnicas de Investigação em Microscopia

Microscopia: Estudo e aplicação de microscópios para observar objetos pequenos.
Microscópios compostos: Funcionam como as lentes dos nossos olhos.
Microscopia vs. Telescópio: Diferenças nos instrumentos, objetivas e aplicações.

Século XIX - Século XX

Novas técnicas de manufatura foram desenvolvidas para aperfeição de lentes.
Século XIX: Melhorias na resolução chegaram a 0,2 µm.
Charles Sédillot (1878): Designou a palavra micróbio (organismo pequeno).
Ernest Abbe e Carl Zeiss (1877): Descreveram leis da física para a resolução de objetivas.
Dr. Otto Schott (1886): Criou as primeiras objetivas apocromáticas.
Henri Hureau de Sénarmont: Criou compensador de retardação de luz polarizada.
Século XX: Avanços significativos em microscopia, incluindo a microscopia de contraste de interferência, microscopia de polarização e de epifluorescência.

Processamento de amostras para microscopia ótica

Recolha, Fixação, Lavagem, Desidratação, Impregnação e Inclusão.
Técnicas importantes para preparar amostras para análise microscópica.
Corte no Criostato, Corte no Vibratomo.

Remoção da resina/parafina, Reidratação, Coloração, Desidratação, Diafanização, Montagem

Procedimentos adicionais para preparação de amostras.
Usam-se alcoóis e xilol.
Corantes H&E (hematoxilina-eosina) são comumente utilizados.
Técnicas permitem que a amostra esteja preparada para análise microscópica.

Microscopia Ótica: Campo Claro, Campo Escuro, Contraste de Fase, DIC

Diferentes técnicas de microscopia ótica que utilizam luz com diferentes objetivos.
As imagens podem ser diferentes dependendo da técnica utilizada e dos requisitos do microscópio.

Microscopia Eletrônica

Microscopia crio-eletrônica (2017): Técnica para determinar a estrutura de biomoléculas.
Microscópio eletrónico: Ernest Ruska (anos 30).
Ampliações elevadas, até nível atômico.

Microscopia de Fluorescência

Fluorocromos: Moléculas que emitem luz quando excitadas por luz.
As características determinam o ambiente químico (pH, etc.) e as características requeridas.
Componentes de microscópios de fluorescência: fonte de luz, cubo de filtros, lentes, câmeras.

Limitações da Microscopia de Fluorescência

Autofluorescência das células.
Efeito bleed-through dos filtros.
Fotobleaching (desbotamento).
Este documento fornece um resumo detalhado sobre métodos de investigação em microscopia.

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Description

Teste seus conhecimentos sobre as etapas do processamento de amostras para microscopia ótica. Questões sobre fixadores comuns, métodos de desidratação e a história do microscópio estão incluídas. Descubra o que você sabe sobre este fascinante campo da ciência!