Podcast
Questions and Answers
¿Qué tipo de técnica es la Cromatografía Líquida en Columna?
¿Qué tipo de técnica es la Cromatografía Líquida en Columna?
En la Cromatografía Líquida en Columna, ¿cuáles son las dos fases involucradas?
En la Cromatografía Líquida en Columna, ¿cuáles son las dos fases involucradas?
¿Cuáles son las clasificaciones de la Cromatografía Líquida en Columna, según la finalidad del análisis?
¿Cuáles son las clasificaciones de la Cromatografía Líquida en Columna, según la finalidad del análisis?
¿Qué es el eluyente en Cromatografía Líquida en Columna?
¿Qué es el eluyente en Cromatografía Líquida en Columna?
Signup and view all the answers
¿Qué tipo de clasificación de la CL en columna se basa en la naturaleza de las interacciones de los analitos con la fase estacionaria?
¿Qué tipo de clasificación de la CL en columna se basa en la naturaleza de las interacciones de los analitos con la fase estacionaria?
Signup and view all the answers
¿Qué tipos de interacciones con la fase estacionaria, se pueden producir en la cromatografía de adsorción?
¿Qué tipos de interacciones con la fase estacionaria, se pueden producir en la cromatografía de adsorción?
Signup and view all the answers
¿Qué adsorbentes de fase estacionaria sólida, se usan en cromatografía de adsorción?
¿Qué adsorbentes de fase estacionaria sólida, se usan en cromatografía de adsorción?
Signup and view all the answers
¿Cómo se produce la separación de analitos en la cromatografía de adsorción?
¿Cómo se produce la separación de analitos en la cromatografía de adsorción?
Signup and view all the answers
Los compuestos más polares se adsorben con mayor facilidad en la cromatografía de adsorción.
Los compuestos más polares se adsorben con mayor facilidad en la cromatografía de adsorción.
Signup and view all the answers
¿Qué factor determina la desorción de los analitos en la cromatografía de adsorción?
¿Qué factor determina la desorción de los analitos en la cromatografía de adsorción?
Signup and view all the answers
Un solvente muy polar desorbe rápidamente los analitos de la fase estacionaria en cromatografia de adsorción
Un solvente muy polar desorbe rápidamente los analitos de la fase estacionaria en cromatografia de adsorción
Signup and view all the answers
¿Qué técnica de cromatografía es una alternativa a la cromatografía de adsorción, pero con una fase estacionaria más estable?
¿Qué técnica de cromatografía es una alternativa a la cromatografía de adsorción, pero con una fase estacionaria más estable?
Signup and view all the answers
¿En qué tipo de cromatografía se utiliza un sólido inerte, como la sílice, para soportar la fase estacionaria?
¿En qué tipo de cromatografía se utiliza un sólido inerte, como la sílice, para soportar la fase estacionaria?
Signup and view all the answers
¿Qué tipo de cromatografía se utiliza para separar compuestos que tienen una solubilidad diferente en dos líquidos inmiscibles?
¿Qué tipo de cromatografía se utiliza para separar compuestos que tienen una solubilidad diferente en dos líquidos inmiscibles?
Signup and view all the answers
¿Qué se entiende por 'cromatografía de fase inversa'?
¿Qué se entiende por 'cromatografía de fase inversa'?
Signup and view all the answers
¿Qué tipo de clasificación de la CL en columna se basa en el poder desplazante de la fase móvil?
¿Qué tipo de clasificación de la CL en columna se basa en el poder desplazante de la fase móvil?
Signup and view all the answers
En la CL en fase normal, el componente menos polar es el primero en eluir.
En la CL en fase normal, el componente menos polar es el primero en eluir.
Signup and view all the answers
¿Qué tipo de cromatografía se utiliza para separar iones según su carga?
¿Qué tipo de cromatografía se utiliza para separar iones según su carga?
Signup and view all the answers
¿Qué son las resinas de intercambio iónico?
¿Qué son las resinas de intercambio iónico?
Signup and view all the answers
Las resinas de intercambio iónico tienen un rango de pH específico para su funcionamiento.
Las resinas de intercambio iónico tienen un rango de pH específico para su funcionamiento.
Signup and view all the answers
¿Qué tipo de cromatografía se utiliza para separar moléculas según su tamaño?
¿Qué tipo de cromatografía se utiliza para separar moléculas según su tamaño?
Signup and view all the answers
¿Qué tipo de fase estacionaria se emplea en la cromatografía de exclusión molecular?
¿Qué tipo de fase estacionaria se emplea en la cromatografía de exclusión molecular?
Signup and view all the answers
¿Cuál es la técnica utilizada para separar moléculas grandes, como proteínas, en un solvente acuoso?
¿Cuál es la técnica utilizada para separar moléculas grandes, como proteínas, en un solvente acuoso?
Signup and view all the answers
La cromatografía de exclusión molecular no presenta interacciones químicas ni físico-químicas.
La cromatografía de exclusión molecular no presenta interacciones químicas ni físico-químicas.
Signup and view all the answers
¿Qué tipo de cromatografía se basa en una unión bioespecífica entre un ligando de afinidad y un analito?
¿Qué tipo de cromatografía se basa en una unión bioespecífica entre un ligando de afinidad y un analito?
Signup and view all the answers
¿Cómo se realiza la unión bioespecífica en la cromatografía de afinidad?
¿Cómo se realiza la unión bioespecífica en la cromatografía de afinidad?
Signup and view all the answers
¿Qué tipo de compuestos son los que se separan por cromatografía de afinidad?
¿Qué tipo de compuestos son los que se separan por cromatografía de afinidad?
Signup and view all the answers
La cromatografía de afinidad es una técnica que se utiliza para separar mezclas complejas.
La cromatografía de afinidad es una técnica que se utiliza para separar mezclas complejas.
Signup and view all the answers
¿Cuál es el principal inconveniente de la cromatografía de afinidad?
¿Cuál es el principal inconveniente de la cromatografía de afinidad?
Signup and view all the answers
¿Qué diferencia existe entre la cromatografía líquida clásica y la HPLC?
¿Qué diferencia existe entre la cromatografía líquida clásica y la HPLC?
Signup and view all the answers
¿Cuáles son los principales componentes de un cromatógrafo de líquidos?
¿Cuáles son los principales componentes de un cromatógrafo de líquidos?
Signup and view all the answers
¿Qué tipo de bomba se utiliza generalmente en la HPLC?
¿Qué tipo de bomba se utiliza generalmente en la HPLC?
Signup and view all the answers
Los detectores de HPLC deben ser sensibles y estables.
Los detectores de HPLC deben ser sensibles y estables.
Signup and view all the answers
¿Qué tipo de detector de HPLC se utiliza para detectar compuestos con doble enlace conjugado?
¿Qué tipo de detector de HPLC se utiliza para detectar compuestos con doble enlace conjugado?
Signup and view all the answers
La miniturización en HPLC ofrece ventajas, como el menor consumo de disolventes y la posibilidad de utilizar cantidades menores de muestra.
La miniturización en HPLC ofrece ventajas, como el menor consumo de disolventes y la posibilidad de utilizar cantidades menores de muestra.
Signup and view all the answers
¿En qué tipo de análisis, la cromatografía líquida se utiliza para identificar la presencia de un analito?
¿En qué tipo de análisis, la cromatografía líquida se utiliza para identificar la presencia de un analito?
Signup and view all the answers
¿En qué tipo de análisis la cromatografía líquida se utiliza para determinar la concentración de un analito?
¿En qué tipo de análisis la cromatografía líquida se utiliza para determinar la concentración de un analito?
Signup and view all the answers
¿Qué métodos se emplean en el análisis cuantitativo por cromatografía líquida?
¿Qué métodos se emplean en el análisis cuantitativo por cromatografía líquida?
Signup and view all the answers
La cromatografía líquida es una herramienta potente, que se utiliza en diversos campos, como la farmaceutica, la química y la biología.
La cromatografía líquida es una herramienta potente, que se utiliza en diversos campos, como la farmaceutica, la química y la biología.
Signup and view all the answers
Study Notes
Análisis Químico II: Bloque III, Tema 14 - Cromatografía Líquida en Columna I
-
El tema 14 se centra en la cromatografía líquida en columna (CL), una técnica de separación de componentes de una mezcla.
-
La CL en columna se clasifica según su finalidad en preparativa (separación y purificación) y analítica (separación, identificación y cuantificación).
-
La técnica se basa en la distribución de los componentes de la mezcla entre dos fases: una fase estacionaria (sólida o líquida) dentro de una columna, y una fase móvil (líquida).
Modalidades de la Cromatografía Líquida en Columna
-
CL de Adsorción (líquido-sólido): La fase estacionaria sólida adsorbe la mezcla y la fase móvil desorbe selectivamente los compuestos, provocando la separación por diferencias en las velocidades de migración. Los ejemplos de fases estacionarias incluyen carbón activado, alúmina y sílice. La polaridad de la muestra y la fase móvil son factores importantes en este tipo de separación.
-
CL de Partición (líquido-líquido): Las fases estacionaria y móvil son líquidos inmiscibles. La separación se produce por diferencias de solubilidad entre los componentes de la mezcla y las fases. Las fases estacionarias líquidas se encuentran adsorbidas en un medio sólido inerte. Esta modalidad puede ser en fase normal o inversa, dependiendo de la polaridad relativa de la fase estacionaria y la fase móvil.
-
CL de Intercambio Iónico: Esta técnica separa iones y especies polares en función de su carga en una fase estacionaria que contiene grupos aniónicos (sulfónicos o carboxílicos o grupos catiónicos (amino cuaternarias, ternarias o secundarias). Permite la separación de proteínas y aminoácidos.
-
CL de Exclusión Molecular: La separación se basa en el tamaño de las moléculas. Las moléculas grandes no pueden entrar en los poros de la fase estacionaria y eluyen primero, mientras que las moléculas pequeñas lo hacen después. Se utiliza para separar moléculas de diferentes tamaños.
-
CL de Afinidad: Se utiliza un ligando de afinidad (anticuerpos, inhibidores enzimáticos) inmovilizado en la fase estacionaria sólida para la unión selectiva con los compuestos diana. La fase móvil se usa para desestabilizar las uniones y lograr la separación y elución de los solutos.
Cromatografía Líquida de Alta Eficiencia (HPLC)
- La HPLC es una variante de la cromatografía líquida en columna que utiliza alta presión para hacer pasar el disolvente a través de la columna. Este método mejora la separación y la eficiencia.
Instrumentación HPLC
- Componentes del cromatógrafo: Componente para la fase móvil, dispositivo para bombear la muestra, columna cromatográfica y un detector.
Sistema de Bombeo HPLC
- El sistema de bombeo proporciona un flujo estable de la fase móvil a alta presión para movilizar la mezcla por la columna.
Sistema de Inyección de Muestra HPLC
- Se utilizan jeringas, bucles (loop) o autosampler para introducir la muestra en el cromatógrafo.
Columnas HPLC
- Existen dos tipos principales de columnas: convencionales y microcolumnas, las más nuevas y pequeñas con diámetro interno y tamaños de partícula menores.
Material de relleno de columnas
-
El material de relleno de las columnas de HPLC depende del tipo de cromatografía a realizar (adsorción, partición, intercambio iónico, exclusión o afinidad).
-
Se usan comúnmente micropartículas de sílice modificadas. Las partículas modificadas con cadenas hidrocarbonadas C8 y C18 se utilizan para cromatografía de reparto
Tipos de Elución en HPLC
-
Elución isocrática: La separación se realiza utilizando un único disolvente con composición constante.
-
Elución por gradiente: Se emplean dos o más disolventes con diferentes polaridades para graduar la composición del disolvente y mejorar la separación.
Detectores HPLC
-
Detectores basados en la absorbancia ultravioleta: Miden la absorbancia del soluto a una longitud de onda específica.
-
Detectores de fluorescencia: Miden la fluorescencia emitida por el soluto cuando se expone a una luz de excitación.
-
Detectores electroquímicos: Miden la respuesta electroquímica del soluto al pasar por el detector.
-
Detectores de índice de refracción: Miden el cambio en el índice de refracción del disolvente, ya que el soluto pasa a través del detector.
-
Detectores de espectrometría de masas: Detectan los solutos según su masa. Miden los espectros de masas de los solutos que eluyen de la columna.
Aplicaciones Analíticas
- Las aplicaciones abarcan diversas áreas, incluyendo análisis de compuestos farmacéuticos, alimentos, ambientales y biológicos.
Análisis Cualitativo y Cuantitativo
-
Cualitativo: Se identifica un analito mediante su tiempo de retención en comparación con patrones o estándares.
-
Cuantitativo: Se determina la cantidad de un analito mediante la curva de calibración. La curva de calibración relaciona la señal del detector con la concentración del analito.
Studying That Suits You
Use AI to generate personalized quizzes and flashcards to suit your learning preferences.
Related Documents
Description
Este quiz aborda el tema 14 del bloque III de Análisis Químico II, centrado en la cromatografía líquida en columna. Se exploran las modalidades de esta técnica, incluyendo su clasificación y fundamentos. Aprenderás sobre las fases estacionarias y móviles y su importancia en la separación de mezclas.