Examen Final Lab Bioquímica Repaso PDF

PRACTICA 2: Reconocimiento de aminoácidos y proteínas Reacción de la Ninhidrina: Aminoácidos reaccionan con ninhidina - En calor: Co2, amoníaco y un aldehído - Producto color azul (no es especifico de los aminoácidos, por que otras moléculas lo forman en presencia de ninh...

PRACTICA 2: Reconocimiento de aminoácidos y proteínas Reacción de la Ninhidrina: Aminoácidos reaccionan con ninhidina - En calor: Co2, amoníaco y un aldehído - Producto color azul (no es especifico de los aminoácidos, por que otras moléculas lo forman en presencia de ninhidrina como: polipéptidos y proteínas) o purpura Reactivos Color positivo Metodología Biomolécula que identifica Ninhidrina Azul + Purpura Para realizar la prueba Aminoácidos + tome 2 ml de la Proteínas solución a analizar en un tubo de ensayo y agregue 5 gotas de la solución de ninhidrina Caliente en un baño de María por 1 a 2 minutos Si la prueba es positiva se desarrollará un color azul. Biuret Violeta Para realizar la prueba Sustancias que tome 2 ml de la contengan grupos CS. solución a analizar en NH, también responden un tubo de ensayo y a la prueba – GRUPOS agregue 2 ml del NO PROTEICOS. Pero reactivo de Biuret, también, Las proteínas mezcle bien disuelven el hidróxido cúprico del reactivo y forman compuestos coloreados El millón Precipitado blanco, que Para realizar la prueba la reacción de Millón luego se torna rojo al tome 2 ml de la tiene lugar únicamente calentar solución a analizar en con las proteínas que un tubo de ensayo y tienen tirosina agregue 3 a 4 gotas del (proteínas en presencia reactivo de Millón. de grupos hidroxifenilos)  Mezcle y caliente en un baño de María por 1 a 2 minutos. Xantoproteica el ácido nítrico forma Para realizar la prueba Moléculas proteicas compuestos nitrados tome 2 ml de la como tirosina y amarillos solución a analizar en triptófano (tienen un tubo de ensayo y grupos fenilos) agregue 1 ml de ácido nítrico concentrado. Caliente en un baño de María y observe la formación de un precipitado amarillento que se vuelve gradualmente amarillo y se disuelve impartiendo el color a la solución. Deje enfriar y añada cuidadosamente un exceso de hidróxido de amonio o de sodio y observe que el color amarillo se intensifica y pasa a anaranjado, dando como positiva la prueba. PRACTICA 4: Actividad de la Amilasa salival: Dato: la actividad de la amilasa salival, una enzima que se encuentra en las glándulas salivales encargada de romper los enlaces del almidón, dando como resultado la amilosa, amilopectina y finalmente glucosa EFECTO DE LA TEMPERATURA EN LA ACCION DE LA AMILASA SALIVAL FRENTE AL ALMIDON - Prueba de Yodo: Identifica almidón En presencia de almidón va a dar color azul oscuro y negro. Positiva a la prueba  En amilasa + almidón = la hidrolisis que hace la amilasa frente al almidón. Elimina casi completamente al almidón por lo que, en la prueba de yodo, da un color cristalino (no hubo efecto) - Prueba de Benedict: se calienta… identifica glucosa tras la hidrolisis de la amilasa en almidón En presencia de almidón: se que azul brillante. Cuando se caliente se queda verde. Negativo a la prueba En amilasa + almidón: cuando se calienta cambia de color, indicando que el almidón a sufrido una hidrolisis. Verde, marrón, naranja. Positiva a la prueba Dato: ante un aumento de temperatura hay un aumento de la actividad enzimática EFECTO DEL PH SOBRE LA ACCION DE LA AMILASA SALIVAL Dato: en un Ph optimo la enzima puede hacer su función de manera efectiva. En el caso de la amilasa el PH es de 4,5 a 5,5 Almidón + saliva en diferentes PH con la prueba de Yodo y benedict EFECTO DE LA PRESENCIA DE INDUCTORES E INHIBIDORES ENZIMATICOS SOBR LA ACCION DE LA AMILASA SALIVAL PRACTICA 5: Caracterización de Carbohidratos Dato: Estas biomoléculas ejercen funciones fundamentales en los seres vivos, como: soporte (celulosa), reserva de alimento (almidón), reserva energética (glucógeno), energía inmediata (glucosa). Reactivos Color positivo Metodología Biomolécula que identifica Molish Se forma un anillo rojo 1. En un tubo de ensayo Presencia de violeta añadir 2 ml de la carbohidratos, por muestra a analizar. hidrolisis. Mediante el ácido sulfúrico que 2. Agregue dos gotas de hidroliza los enlaces reactivo de Molisch y glucosídicos mezcle bien. 3. Luego incline el tubo y deposite 1 ml de H2SO4 concentrado deslizándolo lentamente por la pared del tubo. 4. No mezcle. Sólo coloque el tubo en posición vertical y observe la formación del anillo rojo violeta que aparece en la zona de contacto de los dos líquidos. Benedict Va desde verde, 1. En un tubo de ensayo Azucares reductores. amarillo, anaranjado o añadir 2 ml de la Monosacáridos rojizo muestra a analizar. Los disacáridos maltosa y lactosa 2. Agregue 2 ml del tienen grupos reactivo de Benedict. reductores libres, pero la sacarosa no los 3. Proceda a colocar el posee tubo de ensayo en un baño de María a 100°C Esta prueba se basa en durante dos minutos. la capacidad del azúcar de reducir el Cu2+ en un medio alcalino Seliwanoff Color rojo 1. En un tubo de ensayo Carbohidratos: cetosas añadir 2 ml de la y aldosa. Mediante su muestra a analizar. grupo funcional reacionan con 2. Agregue 2 ml del resorcina que esta en el reactivo de Seliwanoff. reactvo de seliwanoff 3. Proceda a colocar el tubo de ensayo en un baño de María a 100°C durante dos minutos Bial Color azul- verdoso 1. En un tubo de ensayo Reaccion entre los añadir 2 ml de la carbohidratos y el muestra a analizar. orcinol del reactivo de Bial en medio 2. Agregue 1 ml del clorhídrico reactivo de Bial + 2.5 ml de ácido clorhídrico concentrado. 3. Proceda a colocar el tubo de ensayo en un baño de María a 100°C durante 5-10 minutos Yodo Color azul 1. En un plato de Petri Presencia de coloque un poco de polisacaridos sustancia a analizar. 2. Agregar una gota de una solución de yodo PRACTICA 6: Obtención de secuencia de ADN, ARN y proteínas Análisis de ácidos nucleicos y proteinas con el fin de determinar de homologías, alineamiento de secuencias homólogas, predicción de estructuras, filogenias, evolución molecular, diseño de fármacos, etc PAGINAS WEB: Entrez Gene-genes: - Base de datos del NCBI basada en genes. Es decir, que centraliza toda la información sobre un gen que de otro modo sólo podríamos encontrar consultando muchas bases de datos diferentes GenBank – secuencias: - Base de datos de las secuencias de DNA y RNA, una recopilación de todas las secuencias disponibles públicamente UniProt – proteínas: - (Universal Protein Resource) es la principal base de datos de proteínas. Es el almacén central de secuencias de proteínas y sus funciones, ya que fue creado uniendo la información contenida en otras bases de secuencias proteicas BLAST - Buscar por similitud de secuencias: - La semejanza de dos secuencias puede estar indicando que estas secuencias tienen funciones similares o que tienen un mismo origen. Por tanto, el hecho de encontrar secuencias similares a una nueva es una manera de obtener información sobre la nueva secuencia ClustalW - Alineamiento múltiple de secuencias: - programa de alineamiento múltiple de secuencias de ADN o proteína. Este programa calcula la semejanza entre las secuencias de un conjunto que nosotros le proporcionamos y las alinea de manera que se puedan ver claramente las identidades, similitudes y diferencias entre las secuencias