Prácticas de Laboratorio Bioquímica 1º Biomedicina 2022 - PDF

Práctica integrada 1º Biomedicina Bioquímica I Departamento CC. Biomédicas Básicas PRÁCTICAS DE LABORATORIO 1º BIOMEDICINA BIOQUÍMICA I INTEGRANTES DEL EQUIPO:...

Práctica integrada 1º Biomedicina Bioquímica I Departamento CC. Biomédicas Básicas PRÁCTICAS DE LABORATORIO 1º BIOMEDICINA BIOQUÍMICA I INTEGRANTES DEL EQUIPO: PUESTO DE TRABAJO:  Nombre y Apellidos: -------------------------------------------------------------------------------------------  Nombre y Apellidos: ------------------------------------------------------------------------------------------- Práctica integrada 1º Biomedicina Bioquímica I Departamento CC. Biomédicas Básicas Práctica integrada 1º Biomedicina Bioquímica I Departamento CC. Biomédicas Básicas PRÁCTICA 0: INTRODUCCIÓN AL LABORATORIO 1. PREVENCIÓN DE RIESGOS LABORALES 1.1. NORMAS GENERALES El laboratorio es un espacio de trabajo diferente del aula, en el que se utiliza y almacena material potencialmente peligroso. Por tanto, cuando se vaya a trabajar en el hay que ajustarse a una serie de normas para prevenir posibles accidentes. Cuando se trabaja en un laboratorio se debe hacer un correcto uso del material y por norma, se debe seguir el principio de precaución: preguntar antes de actuar sin saber. En general, en cualquier laboratorio, y en concreto en los laboratorios C203-205-207:  Prohibido fumar, comer o beber.  Lavarse las manos en las “PILAS LIMPIAS” antes de salir del laboratorio.  Dejar el material personal en las taquillas disponibles en los pasillos. El estudiante debe traer consigo un candado que le permita guardar de forma segura todas sus pertenencias. Al final de la práctica cada estudiante debe vaciar la taquilla. Aquellas taquillas que queden cerradas al final del día serán abiertas y vaciadas. El estudiante debe acceder al laboratorio con el guión de práctcas, el bolígrafo, los lápices y la calculadora.  Obligatorio el uso de bata de manga larga, como sistema de protección individual, y se debe llevar abrochada.  Debemos llevar calzado cerrado INCLUSO EN VERANO.  Se recomienda usar gafas en lugar de lentes de contacto, en ocasiones será necesario llevar guantes y gafas de seguridad, como sistema de protección individual.  Si te cae algún producto químico en la cara, ojos, manos…lava abundantemente con agua, avisa al profesor responsable y acude al médico de tu centro de salud. 1.2. NORMAS ESPECÍFICAS 1.2.1. NORMAS DE BUEN PROCEDIMIENTO AL COMIENZO DE LA PRÁCTICA  Las prácticas empiezan todos los días a la hora estipulada. Se requiere puntualidad.  Traer a la práctica todo el material específicamente requerido, siendo siempre imprescindible el guion impreso y la bata.  Cada puesto/taquilla será asignada a 2 alumnos (siempre los mismos) que serán los responsables del material asignado a su taquilla y de la limpieza del mismo durante todas las prácticas.  Antes de comenzar, comprobar que la taquilla contiene todo el material que se indica en la lista y que está en buen estado. Se debe comunicar al profesor cualquier desperfecto o si es preciso reponer algún material. Práctica integrada 1º Biomedicina Bioquímica I Departamento CC. Biomédicas Básicas 1.2.2. NORMAS DE BUEN PROCEDIMIENTO DURANTE EL DESARROLLO DEL TRABAJO  NUNCA oler directamente el contenido de un frasco.  NUNCA pipetear con la boca ninguna solución.  Si se prepara una solución de dos líquidos, deben añadirse lentamente, por riesgo de que puedan verterse o incluso reaccionar entre sí.  Los recipientes de los reactivos deben cerrarse inmediatamente y por completo después de su uso, durante su utilización los tapones deben depositarse siempre boca arriba sobre la mesa.  Los reactivos deben devolverse a su lugar inmediatamente después de su uso.  Las balanzas deben dejarse a cero y perfectamente limpias después de su uso.  El estudiante es responsable de dejar el material de vidrio utilizado limpio. En caso de no hacerlo podrá sufrir una penalización en la evaluación de la práctica. Por tanto, el material de vidrio debe ser: - Lavado por el alumno después de usarlo con agua y jabón. - Aclararlo con agua del grifo abundante, y por último con agua destilada. - Luego dejarlo escurrir en posición invertida y estable. - Para eliminar los rótulos de recipientes y tubos se empleará etanol al 70%.  El estudiante es responsable de dejar el material de la mesa de trabajo y la taquilla organizados y limpios. En caso de no hacerlo podrá sufrir una penalización en la evaluación de la práctica. 1.2.3. NORMAS DE GESTION DE RESIDUOS  NINGÚN RESIDUO LÍQUIDO SE TIRARÁ POR EL DESAGÜE.  Todos los residuos contaminantes o corrosivos deberán verterse en sus recipientes correspondientes que estarán indicados en el laboratorio.  Todos los desperdicios sólidos y papeles NO CONTAMINADOS deberán colocarse en las papeleras situadas en el lateral externo de las poyatas.  Todos los desperdicios sólidos y papeles CONTAMINADOS deberán colocarse en los bidones de residuos pertinentes.  El material de vidrio roto deberá depositarse en el recipiente especial para ese efecto. 2. RIESGOS Y SEGURIDAD EN EL LABORATORIO El trabajo en el laboratorio está asociado a una serie de riesgos de origen y consecuencias muy variadas. Según su origen los riesgos entran en tres categorías: RIESGOS BIOLÓGICOS (relacionados con los organismos vivos con los que se trabaja), RIESGOS QUÍMICOS (relacionados con los productos que se manejan) y RIESGOS FÍSICOS (relacionados con las instalaciones y materiales que se emplean). Práctica integrada 1º Biomedicina Bioquímica I Departamento CC. Biomédicas Básicas 2.1. RIESGOS BIOLÓGICOS Se derivan de la exposición a microorganismos, o a productos producidos por los mismos que supone una amenaza a la salud. Esto puede incluir patógenos (virus/bacterias/hongos), y muestras de enfermos, o de animales potencialmente patógenas (zoonosis). Existen cuatro niveles de bioseguridad para el manejo de agentes biológicos:  Nivel de Bioseguridad 1 (BS1) En este nivel se trabaja con agentes que presentan un peligro mínimo para el personal del laboratorio y para el ambiente. El acceso al laboratorio no es restringido.  Nivel de Bioseguridad 2 (BS2) Es similar al nivel 1 y en él se manejan agentes de peligro moderado, el personal de laboratorio tiene entrenamiento específico en el manejo de agentes patógenos. El acceso al laboratorio es restringido y ciertos procedimientos se llevan a cabo en cabinas de seguridad biológica.  Nivel de Bioseguridad 3 (BS3) Se realiza trabajo con agentes que pueden causar un daño serio y potencialmente mortal. El acceso al laboratorio está restringido. Todos los materiales son manipulados utilizando vestimenta y equipo de protección. La ventilación del laboratorio se tiene que hacer con un flujo de aire direccional controlado.  Nivel de Bioseguridad 4 (BS4) Este nivel es el que se utiliza para trabajar con agentes biológicos que representan un alto riesgo patogénico e infectivo. El personal de estos laboratorios cuenta con entrenamiento específico y utilizan trajes de protección especiales. Los laboratorios se mantienen con una presión de aire negativa, lo cual ayuda a impedir que los agentes nocivos escapen al ambiente. Riesgo Biológico 2.2. RIESGOS QUÍMICOS Los riesgos químicos suelen clasificarse: -según estado: líquido, sólido o gaseoso -según vía de riesgo: piel, ingestión, inhalación, medioambiente. -Según su acción: Agentes tóxicos/irritantes: bromuro de etidio, formaldehído, etc. Agentes contaminantes: halogenados, etc. Práctica integrada 1º Biomedicina Bioquímica I Departamento CC. Biomédicas Básicas Agentes corrosivos: ácidos y bases Agentes explosivos/inflamables: benceno, etanol, nitroglicerina, etc. Agentes radiactivos: isótopos 2.3. RIESGOS FÍSICOS Algunos ejemplos de riesgos físicos a los que los estudiantes van a poder estar expuestos son: lesión con cristales rotos, fuego, agujas, objetos punzantes gases, electricidad… 3. ETIQUETAS DE SEGURIDAD DE LOS REACTIVOS Por norma, antes de empezar a utilizar una sustancia, se debe revisar su etiqueta de seguridad para saber que riesgos conlleva su manejo y conocer que medidas preventivas deben aplicarse para evitar accidentes. Las sustancias que conlleven algún tipo de riesgo llevaran símbolos que nos permitan identificar el riesgo asociado a su manejo. HAY QUE SABER RECONOCER DICHOS PICTOGRAMAS. A continuación se muestra a modo de ejemplo una etiqueta de un producto químico: Práctica integrada 1º Biomedicina Bioquímica I Departamento CC. Biomédicas Básicas 4. GESTIÓN DE LOS RESIDUOS En el laboratorio se pueden distinguir los siguientes grupos de residuos: - no peligrosos - tóxicos - patogénicos - radiactivos - cortantes, punzantes Cada uno de ellos debe desecharse en su contenedor adecuado. TODO ENVASE DE RESIDUOS PELIGROSOS DEBE ESTAR ETIQUETADO CORRECTAMENTE Práctica integrada 1º Biomedicina Bioquímica I Departamento CC. Biomédicas Básicas 5. EQUIPAMIENTO DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO Los laboratorios del Departamento de Ciencias Biomédicas disponen de un equipamiento diverso de seguridad que el estudiante debe conocer y localizar al entrar por primera vez al laboratorio. De izquierda a derecha se muestra: Extintor, Campanas de gases con flujo laminar; Duchas y lavaojos, Contador de radiactividad Greiger; Contenedores de polipropileno para material punzante o de riesgo biológico; Mascarillas o guantes… 6. DESCRIPCIÓN DEL MATERIAL 6.1. RECIPIENTES Y MEDICIÓN DE VOLÚMENES GRANDES Existen diferentes tipos de recipientes que se emplearán específicamente para el uso que les corresponda. Recipientes poco precisos: Para realizar experimentos en los que se analicen volúmenes pequeños (1-10 ml) emplearemos tubos de ensayo, SIEMPRE CON LA GRADILLA. Los vasos de precipitados y los matraces Erlenmeyer se usarán para disolver o contener sustancias. Para prepara disoluciones, añadir una cantidad de disolvente (agua) menor que el volumen final. El volumen final se mide en un recipiente más preciso. Práctica integrada 1º Biomedicina Bioquímica I Departamento CC. Biomédicas Básicas Medición de volúmenes grandes con precisión Las mediciones y transferencias de volúmenes exactos y precisos son requisitos básicos de la bioquímica experimental. Para un mismo volumen, la medida es más precisa si el recipiente es más estrecho donde se mira la escala, (La cantidad de líquido susceptible de error es más pequeña). Para medir volúmenes grandes (más de 10 ml) con exactitud emplearemos preferiblemente matraces aforados, y en segundo lugar probetas. Los matraces aforados solo permiten medir un volumen fijo, mientras que las probetas tienen una escala que permite medir distintos volúmenes. Siempre usaremos la probeta cuya capacidad máxima se ajuste mejor a la medida que queremos realizar. Error de paralaje Es el error de medida por exceso o por defecto que se comete al no alinear correctamente la línea de visión con la escala y con el líquido que se está midiendo. Para evitarlo, se debe colocar la probeta perpendicular a los ojos, lo que permite hacer una observación exacta del MENISCO del líquido. Medición de volúmenes pequeños (0,5 ml -25 ml) Para volúmenes pequeños emplearemos diferentes tipos de pipetas. Las pipetas de cristal sirven para medir volúmenes de entre 0,5 ml y 25 ml. NUNCA se pipeteará nada con la boca. Para pipetear se utilizará el aspirapipetas ajustándolo con cuidado en el extremo coloreado de la pipeta. Hay aspirapipetas para diferentes volúmenes (2ml, 5ml, 10ml), que han de ajustarse a las pipetas correspondientes. La rueda sirve para aspirar. Para dejar salir el líquido pulsar el botón lateral. Práctica integrada 1º Biomedicina Bioquímica I Departamento CC. Biomédicas Básicas 2, 5, 10, 25, 50 ml Buretas: se usan en valoraciones ácido base para medir el volumen de líquido empleado. Para utilizar las buretas hay que cerrar la llave de paso (posición horizontal), rellenar utilizando un embudo con el líquido que se quiere medir, anotar el volumen inicial, y medir y anotar el volumen final. El volumen empleado se obtiene restando éstas cantidades. Medida de volúmenes muy pequeños (2ml, 1ml o menor) Pipetas Pasteur: Para volúmenes muy pequeños no precisos, suelen ser desechables, de diversos tamaños. Micropipetas automáticas: Para volúmenes muy pequeños y exactos. Permiten ajustar el volumen exacto a recoger. Se emplearán SIEMPRE con una punta desechable. Hay diferentes capacidades de micropipetas y de las puntas correspondientes, marcadas mediante un código de colores estándar. Azules para 200μl- 1ml, amarillas para 20μl-200μl, y blancas para volúmenes más pequeños de 20 μl. Práctica integrada 1º Biomedicina Bioquímica I Departamento CC. Biomédicas Básicas Pulsador Rueda de graduación de volumen Recipientes para volúmenes muy pequeños (