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Révisions : sri ja ya Révisions : UNIVERSITÉ UNIVERSITÉ DE PARIS PARIS-EST-CRÉTEIL LAS3 2022 - 2023 2023 - 2024 UE – Maladies génétiques et rares Fiche de cours N°5 Neurofibromatose de type 1 ACTUALISATION PLAN I. Maladies rares l o u II. Neurofibromatose de type 1 (NF1) u tta III. Mécanisme de tumorigenèse des Mo neurofibromes IV. Conclusion Légendes 7 9 Notion nouvelle cette année 6 17 0Notion déjà tombée au concours 6 51  I. Maladies rares / II. Neurofibromatose de type 1 (NF1) / III. Mécanisme de tumorigenèse des neurofibromes / IV. Conclusion s ri I. Maladies rares Introduction jaya Maladies rares : 7000 maladies rares o 80% sont d’origine génétique § Mutations ou problèmes chromosomiques o Maladies constitutionnelles Quelques chiffres o Concerne 3 millions de personnes en France § 4,5% de la population française o On compte au moins 200 traitements spécifiques o Touchent 1 personne sur 2000 Maladie orpheline : Maladie pour laquelle on ne dispose d’aucun traitement efficace o Ce ne sont pas que des maladies génétiques Enjeux éthiques et santé publique : Touchent 10 % des décès dans la petite enfance (entre 1 à 5 ans) Organisation de la prise en charge au sein d’un Centre de référence maladies rares (CRMR) o Coordonne à la fois l o u ta § La prise en charge § Le suivi § La recherche u t o § Le lien avec les associations et autres centres de compétence M Filière maladie rare (FMR) : Organisation des o L’ensemble des acteurs d'une prise en charge pour une maladie rare o Ou d’un ensemble de maladies rares présentant des aspects communs soins maladies § Sous la surveille de l’ARS (Agence régionale de santé) Les associations de patients travaillent étroitement avec les équipes médicales o Les équipes médicales sont quelquefois liées aux § Sociétés savantes § Chercheurs § Laboratoires pour les diagnostics et les recherches o Promouvoir les maladies rares dans le secteur privé afin de § Mettre au point des thérapeutiques o Informer les professionnels de santé de ville 9 Un professionnel de la santé n'a pas forcément l'habitude ou les connaissances nécessaires 1 77 sur la maladie 6 En ville, tout patient est pris en charge mais il faut que 10 o Le médecin de ville ait suffisamment de connaissances 65 o Et qu’on ait quelques informations sur la prise en charge de cette maladie Existence d’un lien entre les acteurs médicaux et les acteurs sociaux UNIVERSITÉ PARIS-EST-CRÉTEIL 2023 - 2024 2 /21  I. Maladies rares / II. Neurofibromatose de type 1 (NF1) / III. Mécanisme de tumorigenèse des neurofibromes / IV. Conclusion s ri jaya I. Maladies rares Introduction (suite) 23 filières La filière s’organise autour de centres de référence o Structures de recours reconnues pour leur expertise dans la prise en charge des personnes malades § Et leur engagement dans la recherche et dans l’enseignement formation l o u o Mono-site ou multi-site u ta o Équipe pluridisciplinaire experte t Centre de référence (CRMR) ou de 5 grandes missions o Expertise o Recours M o § N’importe quelle personne a le droit compétence (CCMR) de recourir à un centre de référence - Ils connaissent le mieux la pathologie o Enseignement o Recherche o Coordination § En lien avec les centres de compétence Exemple : Centre de référence de la neurofibromatose de type 1 à Henry Mondor o Le service de dermatologie dirige les 5 missions À Henri Mondor, il existe de nombreux centres de référence Les maladies abordées dans ce cours seront celles prises en charge par Henri Mondor o Notamment la neurofibromatose Exemple : Centre de référence des maladies respiratoires rares 7 9 6 17 0 651 UNIVERSITÉ PARIS-EST-CRÉTEIL 2023 - 2024 3 /21  I. Maladies rares / II. Neurofibromatose de type 1 (NF1) / III. Mécanisme de tumorigenèse des neurofibromes / IV. Conclusion s ri II. Neurofibromatose jaya de type 1 (NF1) Introduction (suite) C’est une maladie autosomique dominante o Autosomique : Touche un des chromosomes de la paire n°1 à la paire n°22 o Les gonosomes sont les chromosomes sexuels Généralités o Dominant § Pour 1 gène donné ayant 2 allèles, il suffit que l’un des 2 allèle porte la mutation pour entraîner la maladie o u § On peut avoir une copie normale mais elle ne sera pas dominante l ta C’est une maladie qui touche 1 personne sur 3 500 Tous les groupes ethniques u t M o o C’est une pénétrance complète vers l'âge de 8 ans § Pénétrance : Quand on porte une mutation dans un gène Va-t-on être atteint de la maladie ? o Si complète § Oui : 100% malade o Si incomplète § Oui : Si mutation venant du père ou de la mère § Non : On n’est pas malade Expressivité variable (aussi bien les formes intrafamiliales que interfamiliales) o Pour une mutation dans une même famille § Les signes cliniques vont être différents d’une personne à une autre o On ne pourra jamais prédire quelle sera l’expressivité / sévérité des symptômes, pour une même personne, avec la même mutation 7 9 6 17 0 651 UNIVERSITÉ PARIS-EST-CRÉTEIL 2023 - 2024 4 /21  I. Maladies rares / II. Neurofibromatose de type 1 (NF1) / III. Mécanisme de tumorigenèse des neurofibromes / IV. Conclusion s ri II. Neurofibromatose jaya de type 1 (NF1) Introduction (suite) 1er texte faisant référence à la neurofibromatose : Papyrus d’Ebers en -1550 o Papier russe § 1ere encyclopédie médicale l o u o 110 pages traitant de plusieurs maladies, symptômes § L’infectieux de l’oncologie, la neurologie ta Un peu d’histoire o Traite près de 880 pathologies t o Décrit 1 patient en particulier, porteur de plusieurs tumeurs, fermes, immobiles, u M o formant plusieurs nœuds et ressemblant à un serpent § À posteriori, on pourrait l'associer à un neurofibrome Au 16ème siècle, Ambroise Paré, écrit « monstre et prodige » o Décrit un patient avec un visage bien proportionné en tout point de vue mais avec § 5 excroissances en forme de corne, § Avec une longue masse charnue, qui descendait de la tête au dos § On peut aussi associer cela à la description de la maladie Le professeur et chirurgien William Smith, va décrire un patient avec des tumeurs o Appelées neuromatoses § Suggère que les tumeurs venaient d’un tissu conjonctif entourant les fibres nerveuses Cette hypothèse va être confirmée 33 ans après par VON RECKLINGHAUSEN o Cette anatomopathologie donnera son nom à la maladie § Maladie de neurofibromatose = Maladie de VON RECKLINGHAUSEN - Il confirme l'origine de ces tumeurs : Gaines nerveuses - Mélange de fibres nerveuses 1998 : analyse de 15 membres de même famille o Localisation génétique de l’anomalie § Chromosome 17 7 9 6 17 0 651 UNIVERSITÉ PARIS-EST-CRÉTEIL 2023 - 2024 5 /21  I. Maladies rares / II. Neurofibromatose de type 1 (NF1) / III. Mécanisme de tumorigenèse des neurofibromes / IV. Conclusion s ri II. Neurofibromatose jaya de type 1 (NF1) Rappels embryologiques Après la fécondation, o Réunion ovule et spermatozoïde, o Stade morula à 8 cellules o Divisions cellulaires § Obtention d’un embryon à 3 feuillets - Mésoderme, endoderme et ectoderme À la 3ème semaine o Formation d’une gouttière § Le tube neural donnant - Le cerveau Étapes - La moelle épinière o Vers la fin de la semaine, les cellules issues de la crête neurale § Vont migrer tout le long du tube neural § Et former plusieurs organes o Les organes touchés dans la neurofibromatose de type 1 sont issus de la crête neurale § Cellules de Schwann § Gros vaisseaux § Rate § Surrénales § Cartilage § Mélanocytes Neurulation : processus de transformation l o u de la plaque neurale en tube neural ème u Fin de la 3 semaine de développementt ta plaque neurale M o o Surélévation des bords latéraux de la § Sous l’effet inducteur du mésoderme sous-jacent o Formation de bourrelets neuraux + gouttière neurale o Rapprochement puis fusion des bourrelets § Formation du tube neural et de la crête neurale Neurulation et o Détachement des cellules de la crête neurale formation de la crête § Migration et colonisation des neurale organes cibles - Crêtes neurales = 4ème feuillet embryonnaire La neurofibromatose est une neurocristopathie o Elle est en rapport avec une anomalie génétique survenant dans les cellules de la crête neurale 7 9 6 17 0 651 UNIVERSITÉ PARIS-EST-CRÉTEIL 2023 - 2024 6 /21  I. Maladies rares / II. Neurofibromatose de type 1 (NF1) / III. Mécanisme de tumorigenèse des neurofibromes / IV. Conclusion s ri II. Neurofibromatose jaya de type 1 (NF1) Rappels embryologiques (suite) Dérivés de la crête neurale plusieurs tissus et organes l o u Les cellules de la crête neurale migrent dans tout l’organisme et participent à la formation de u t ta Hypothèses émises sur l’apparition de la crête neurale o Augmentation de la taille du cerveau o o Apparition de la mandibule M Cellules de la crête neurale et neurofibromatose de type 1 Origine cellulaire des différentes atteintes observées dans la neurofibromatose 1 Le tube neural au contact de l’ectoderme du tube neural forme la crête neurale À partir de cette crête neurale, les cellules migrent tout le long du tube neural pour colonisées et devenir des organes Les cellules de la crête neurale donnent o Cellules musculaires endothéliales § Lieu des dysplasies o Cellules ostéoblastique/ chondrocyte § Donnent des anomalies osseuses o Cellules mélanocytes 7 9 § Donnent les tâches 6 17 o Cellules de Schwann 0 § Donnent des neurofibromes cutanés / sous-cutanés / plexiformes 651 o Cellules neuronales o À l’origine de troubles, déficits, déficiences intellectuelles UNIVERSITÉ PARIS-EST-CRÉTEIL 2023 - 2024 7 /21  I. Maladies rares / II. Neurofibromatose de type 1 (NF1) / III. Mécanisme de tumorigenèse des neurofibromes / IV. Conclusion s ri II. Neurofibromatose jaya de type 1 (NF1) Signes cliniques Causes Mutation du gène NF1 (17q11.2) o Chromosome 17 Environ 50% des NF1 sont dues à des néomutations La neurofibromatose est transmise selon le mode Autosomique Dominant Taches café au lait o Dans quasi 100% des cas o Plus de 6 et de 15 mm o Présents à la naissance o Augmentent en taille et en nombre § 1ères années de vie ++ l o u Anomalies de la pigmentation Lentigines o Second symptôme u t ta inguinaux M o o Dans les plis axillaires ou § Arrive vers l'âge de 3 à 5 ans Dues aux mélanocytes issus de la crête neurale Neurofibromes : proliférations anormales des cellules de Schwann o Cutanés ou sous cutanés o Tumeurs bénignes o Rares avant la puberté Tumeurs des gaines § Augmentent en nombre nerveuses tout le long de la vie - L’adolescence et la grossesse sont plus à risque de les développer (effet des hormones) o Issue de la gaine de myéline Neurofibrome plexiforme : proliférations anormales des cellules de Schwann ou précurseur des cellules de Schwann o Comme un neurofibrome sous cutané § Mais il provient des gros Neurofibromes troncs nerveux plexiformes o Plus profond et plus interne o Présent à la naissance 7 9 o Risque de dégénérescence 6 17 § Transformation en sarcome 0 § MPNST (Malignant peripheral nerve sheath tumor): 5-13% 651 o Adolescents et jeunes adultes ++ UNIVERSITÉ PARIS-EST-CRÉTEIL 2023 - 2024 8 /21  I. Maladies rares / II. Neurofibromatose de type 1 (NF1) / III. Mécanisme de tumorigenèse des neurofibromes / IV. Conclusion s ri jaya II. Neurofibromatose de type 1 (NF1) Signes cliniques (suite) En histologie, un neurofibrome est caractérisé par à la prolifération de cellules de Schwann o Ces dernières sont reconnaissables grâce à leur aspect Neurofibromes o Et leur positivité au diffus marquage à la protéine S100+ l o u u Autres organes touchés : les yeuxt ta o Gliome du nerf optique : o M o Majorité des cas asymptomatique o 15% -20% symptomatique § Dans 90% un bon pronostic o Nodules de Lisch Autres tumeurs § Même physiopathologie qu’un neurofibrome cutané § Elle se passe au niveau de l’iris - Ou de la rétine § Aucun pronostic visuel § Naevus hamartomateux § Pigmenté de l’iris - Asymptomatique § Visibles à la lampe à fente § Plus de 74% des patients NF o Gliome du nerf optique § Diagnostic par IRM cérébrale § Complication rare § Cause : Rarement un gène § À risque de pronostic fonctionnel § Cécité 7 9 6 17 0 651 UNIVERSITÉ PARIS-EST-CRÉTEIL 2023 - 2024 9 /21  I. Maladies rares / II. Neurofibromatose de type 1 (NF1) / III. Mécanisme de tumorigenèse des neurofibromes / IV. Conclusion s ri II. Neurofibromatose jaya de type 1 (NF1) Signes cliniques (suite) Cancers En plus des tumeurs malignes des gaines nerveuses, les patients atteints de neurofibromatose type 1 ont un risque plus élevé de développer des cancers : o Notamment le cancer du sein : § - l o u Ex : La femme a 5 fois plus de risques de développer un cancer du sein Surveillance dès l’âge de 30ans u t ta M o Pas de pronostics de dangerosité o Mais peut être handicapant pour le patient Anomalies osseuses § Les patients dépistés précocement peuvent avoir un suivi adéquat Pseudarthrose Tibia/Fibula o Non fréquent mais pathognomonique o Congénitale et unilatérale Scoliose o Dystrophique ou non dystrophique Dysplasie de l’os sphénoïde Ostéopénie o 25-OH D3 diminuée o PTH élevée o Résorption osseuse élevée o Anomalie de fonction des ostéoblastes et des ostéoclastes 7 9 6 17 0 651 UNIVERSITÉ PARIS-EST-CRÉTEIL 2023 - 2024 10 /21  I. Maladies rares / II. Neurofibromatose de type 1 (NF1) / III. Mécanisme de tumorigenèse des neurofibromes / IV. Conclusion s ri II. Neurofibromatose jaya de type 1 (NF1) Signes cliniques (suite) Dysplasie vasculaire o Sténoses artère rénale, carotide, cérébrale antérieure, coarctation de l’aorte § Complication rarissime Hypertension artérielle (HTA) ++ o Évoque coarctation aorte/HTA o Rénovasculaire / Phéochromocytome Anomalies Cardiomyopathie hypertrophique (CMH) / Malformation cardiovasculaires cardiaque o Délétion du gène NF1++ HTAP / Sténose valvulaire pulmonaire Difficultés d’apprentissage +++ (50-75%) o Peut-être suivi et amélioré si dépisté tôt o Difficultés avec les codes de la société Comportement autistique (30%) Hyperactivité Troubles cognitifs o Déficit de l’attention l o u Déficience intellectuelle (6-7%) t o 2 fois la population générale u ta § M o Acceptation médicale pour interruption d’une grossesse Troubles de la mémorisation / de l’attention /Anxiété Troubles des fonctions exécutives/ motrices / langage Il est nécessaire de démontrer au minimum 2 critères ≥ 6 taches café au lait o Chez l’enfant : >5 mm o Chez l’adulte : >15 mm Lentigines axillaires et/ou inguinales Critères de ≥ 2 neurofibromes (cutanés ou sous cutanés) diagnostic clinique 1 NF plexiforme (NIH 1988) Gliome des voies optiques ≥ 2 nodules de Lisch Anomalie osseuse o Dysplasie de l’os sphénoïde/ pseudarthrose Tibiale Un variant pathogène hétérozygote du gène NF1 Apparenté de 1er degré atteint de NF1 7 9 6 17 0 651 UNIVERSITÉ PARIS-EST-CRÉTEIL 2023 - 2024 11 /21  I. Maladies rares / II. Neurofibromatose de type 1 (NF1) / III. Mécanisme de tumorigenèse des neurofibromes / IV. Conclusion s ri II. Neurofibromatose jaya de type 1 (NF1) Signes cliniques (suite) La neurofibromatose segmentaire ou mosaïque o Signe clinique localisé à un segment du corps o Secondaire à une mutation (1er hit) du gène NF1 § Pas une mutation constitutionnelle § Mutation post-zygomatique - Dans une morula, une des cellules va subir une mutation - Tous les organes qui vont découler Forme segmentaire de cette cellule vont être touchés de neurofibromatose - Au premier stade embryologique l o u t ta Maladie génétique autosomique dominante due à la mutation du gène SPRED1 u o o Code pour une protéine qui travaille avec la protéine NF1 M Anomalies de pigmentation de la peau TCL Lentigines Macrocéphalie o Volume crânien plus important que la normal Troubles du comportement Absence de neurofibromes Absence de problèmes vasculaires Lipomes Syndrome plus léger o Sans risques de transformations malignes On retrouve des symptômes liés à la NF1 Syndrome de Legius Patients qui n’auront jamais de neurofibrome o Aucun risque tumural 7 9 6 17 0 651 UNIVERSITÉ PARIS-EST-CRÉTEIL 2023 - 2024 12 /21  I. Maladies rares / II. Neurofibromatose de type 1 (NF1) / III. Mécanisme de tumorigenèse des neurofibromes / IV. Conclusion s ri II. Neurofibromatose jaya de type 1 (NF1) Neurofibromine (NF1) NF1 : Gène suppresseur de tumeur o u o Code pour une protéine cytoplasmique de 2818AA : neurofibromine l ta Généralités o Situé au niveau de l’ADN, sur le chromosome 17 o Comporte 300 exons § Faisant 335 Kb u t o Plusieurs isoformes M o § À partir du même gène NF1 il peut y avoir des ARNm différents - Donnant des protéines différentes En fonction des organes, les cellules n’ont pas besoin de la même protéine à chaque fois o Les différentes isoformes se retrouvent en plus ou moins grande quantité selon les organes § Exemple : L’isoforme de type 2 est plus présente dans le cerveau - Alors que le type 1 est plus présent dans les cellules de Schwann o Les isoformes sont transcrits puis traduits de façon différente o Domaine GRD de la neurofibromine : Commun à toutes les isoformes § GRD (GAP Related Domain) - Domaine catalytique - Inhibiteur de la voie de signalisation RAS Exemples : o Exons 21-27a § Codent pour un domaine catalytique GRD - Homologie de séquences avec les GTPases o Exon 23a § Exon alternatif - Diminue l’activité GTPase du domaine GRD 7 9 6 17 0 651 UNIVERSITÉ PARIS-EST-CRÉTEIL 2023 - 2024 13 /21  I. Maladies rares / II. Neurofibromatose de type 1 (NF1) / III. Mécanisme de tumorigenèse des neurofibromes / IV. Conclusion s ri II. Neurofibromatose jaya de type 1 (NF1) Neurofibromine (NF1) (suite) Séquence protéique très conservée au cours de l'évolution de l'espèce o Notamment les séquences en acide aminé Pour l’homme o 99,4% d'homologie avec le chien o 98,5% d’homologie avec les souris et les rats Homologies o 100% d’homologie avec les singes Forte sélection autour de la protéine o Quand cette protéine est absente ou différente, pour une cellule, il y aura un problème § Pour toutes les espèces possédant cette protéine l o u u t ta M o La neurofibromine est un INHIBITEUR de la voie RAS o Via son domaine GRD o Contrôle la prolifération cellulaire Rôle dans la voie § Par conséquent, un déficit en neurofibromine est à l’origine d’une prolifération RAS MAPK cellulaire accrue - Les cellules de Schwann sont particulièrement sensibles à ce déficit Rôle de protection o Quand la cellule doit se diviser et croître, elle va recevoir un message § Par exemple : EGFR, provenant du sang, va se lier à un récepteur - Envoie un signal dans la cellule - Pour activer une voie cellulaire : La RAS MAP kinase L’activation de cette voie cellulaire permet d’activer plusieurs protéines o Entraîne (via une cascade de signalisation) une protéine qui se rend sur le noyau § Elle va se fixer sur un gène avec un signal de traduction - Permettant à la cellule de croître La neurofibromine est là pour dire « stop » à cette croissance o Sans la neurofibromine, cette cascade de signalisation est sans inhibition § Elle reste en activation constante - Les cellules ne cessent de croitre - Principe des tumeurs et des cancers 7 9 § Prolifération anarchique d'une cellule de Schwann due à l’absence de la 6 17 neurofibromine 0 651 UNIVERSITÉ PARIS-EST-CRÉTEIL 2023 - 2024 14 /21  I. Maladies rares / II. Neurofibromatose de type 1 (NF1) / III. Mécanisme de tumorigenèse des neurofibromes / IV. Conclusion s ri II. Neurofibromatose jaya de type 1 (NF1) Neurofibromine (NF1) (suite) Autres fonctions cellulaires La neurofibromine a d’autres fonctions intracellulaires moins connues : o Interaction avec le cytosquelette § On pense qu’elle permet d'individualiser les cellules après la division cellulaire o Trafic intracellulaire l o u ta o Adhésion entre les cellules u t o Localisation au niveau de la membrane plasmique etc… Il s’agit de mutations hétérozygotes o Perte de fonction M o Haplo-insuffisance o NB : Les mutations constitutionnelles NF1 homozygotes sont létales au stade embryonnaire o Mutations homozygotes : Si les 2 copies sont mutées constitutionnellement (au niveau de la 1ère cellule) § Pas viable Mutations du gène Pas de mutations récurrentes NF1 Tout le gène peut être muté Pas de Hotspot mutationnel Plus de 3000 mutations répertoriées dans HGMD La neurofibromine joue un rôle de bouclier o S’il y en a plus : Emballement des voies de signalisation (et de la croissance cellulaire) § Affecte la protéine et peut la faire disparaitre - Protéine indispensable au développement embryonnaire 7 9 6 17 0 651 UNIVERSITÉ PARIS-EST-CRÉTEIL 2023 - 2024 15 /21  I. Maladies rares / II. Neurofibromatose de type 1 (NF1) / III. Mécanisme de tumorigenèse des neurofibromes / IV. Conclusion s ri II. Neurofibromatose jaya de type 1 (NF1) Neurofibromine (NF1) (suite) Corrélation génotype/phénotyp e Génotype : Au niveau de l’ADN Phénotype : Au niveau des signes cliniques pour une même mutation dans une même famille o Les signes cliniques seront différents pour la neurofibromatose de type 1 Pas de corrélation génotype/phénotype dans la neurofibromatose de type 1 o Sauf délétion du locus NF1 § Phénotype plus sévère Délétion du gène NF1 : o Dans la grande majorité des cas ce sont des recombinaisons non homologues § l o u Ont lieu durant le crossing-over u t ta Délétions NF1 (5- 10%) M o NHAR : Recombinaison La recombinaison homologue non allélique est une recombinaison homologue homologue non o Survenant entre deux fragments d’ADN hautement identiques ne correspondant pas au même allèle allélique Cette recombinaison survient au cours de la méiose (crossing over) o Elle est médiée par des éléments répétés appelés Low Copy Repeats (LCR) o Elle est à l’origine des délétions/duplications constitutionnelles de Novo Il peut y avoir un mésa-pareillement o Un chromosome dupliqué o Et un chromosome délété 7 9 § La délétion du gène NF1 vient de la recombinaison homologue mais non 17 allélique 1 06 65 UNIVERSITÉ PARIS-EST-CRÉTEIL 2023 - 2024 16 /21  I. Maladies rares / II. Neurofibromatose de type 1 (NF1) / III. Mécanisme de tumorigenèse des neurofibromes / IV. Conclusion s ri jaya II. Neurofibromatose de type 1 (NF1) Neurofibromine (NF1) (suite) Pour qui ? / Pourquoi ? o Conseil génétique : DPN / DPI o Neurofibromatose pauci-symptomatique / doute diagnostic § Quand on a des doutes sur la neurofibromatose (exemple : 1 seul critère) - Diagnostic moléculaire Diagnostic § Diagnostic prénatal ou préimplantatoire moléculaire Comment ? o Ancienne approche : complexe/ multi-steps § STR, Séquençage Sanger, cDNA, gDNA, MLPA o Remplacée par séquençage haut débit (NGS) § Suivi d’une confirmation par séquençage Sanger/ par MLPA pour les délétions § On séquence l’ARN pour chercher des mutations introniques profondes o Parfois nécessité d’analyse génétique de l’ARN Séquençage haut débit : NGS l o u u t ta M o NGS : Next Generation Sequencing Pour une NF1 : 92% ont des mutations ponctuelles o Le reste : délétions Confirmation des mutations/délétions Séquençage Sanger pour confirmer les mutations ponctuelles Technique MLPA (Multiplex Ligation-dependant Probe Amplification) pour confirmer les délétions 7 9 6 17 0 651 UNIVERSITÉ PARIS-EST-CRÉTEIL 2023 - 2024 17 /21  I. Maladies rares / II. Neurofibromatose de type 1 (NF1) / III. Mécanisme de tumorigenèse des neurofibromes / IV. Conclusion s ri III. Mécanisme de jaya tumorigenèse des Généralités neurofibromes Nerf normal Cellules de Schwann myélinisantes o Forment la couche de gaine de myéline qui entoure la fibre nerveuse o Impliquée dans la transmission saltatoire de l’influx nerveux Cellules de Schwann non myélinisantes l o u u t ta M o Neurofibrome S100 : marqueur des cellules de Schwann Le neurofibrome est formé par une prolifération de cellules de Schwann tumorales o On retrouve également des fibroblastes, des mastocytes et des vaisseaux sanguins è Ils ne sont pas responsables de la proliférations Contrairement au sang et à la peau d’un patient NF1, le neurofibrome de ce patient se caractérise par une délétion du 2ème allèle normal o Ce qui explique la perte Une mutation d’hétérozygotie constitutionnelle § LOH : Loss of heterozygoty dans le gène NF1 Hétérozygote dans le sang mais pas dans suffit-elle pour le neurofibrome déclencher la 7 tumorigenèse ? 9 o Plus de protéines puisque la 2ème mutation supprime les 6 17 protéines 0 2ème mutation = mutation somatique 51 § 6 UNIVERSITÉ PARIS-EST-CRÉTEIL 2023 - 2024 18 /21  I. Maladies rares / II. Neurofibromatose de type 1 (NF1) / III. Mécanisme de tumorigenèse des neurofibromes / IV. Conclusion s ri III. Mécanisme de jaya tumorigenèse des Généralités (suite) neurofibromes Théorie du second Hit Il existe initialement une mutation sur le 1er allèle o Cet évènement n’est en général pas suffisant pour enclencher la tumorogenèse mais y prédispose o C’est lorsqu’un 2ème évènement mutationnel survenant sur le 2ème allèle (allèle normal) survient que le processus tumoral s’enclenche Dans tous les cancers héréditaires l o u § Mutation somatique u ta o Au cours du temps, 2ème mutation après la mutation constitutionnelle t Sang hétérozygote : La mutation somatique n’est pas touchée par la mutation constitutionnelle M o Le 2ème hit peut arriver pendant la grossesse o On ne peut savoir quand il est arrivé À quel moment Un second hit précoce est nécessaire à la tumorigenèse survient la 2ème Dans beaucoup de cancers génétiques, on nait avec une mutation mutation pour initier o Puis une seconde détruit les protéines la tumorigenèse ? § On a une prolifération anarchique KO conditionnel NF1 chez l’embryon de souris o Toutes les souris ayant subi une inactivation du gène NF1 au stade embryonnaire chez développent des neurofibromes KO conditionnel NF1 de la souris adulte o Seules 2/19 souris ayant subi une inactivation NF1 au stade adulte ont développé des neurofibromes Les expériences de Knock out conditionnel du gène NF1 chez la souris NF1+/- montrent que 7 9 o Les neurofibromes sont constants et multiples lorsque le second hit survient pendant la 17 phase embryonnaire 1 06 § Rôle des précurseurs des cellules de Schwann ? o Les neurofibromes sont plus rares et moins constants lorsque le second hit survient à l’âge 65 adulte UNIVERSITÉ PARIS-EST-CRÉTEIL 2023 - 2024 19 /21  I. Maladies rares / II. Neurofibromatose de type 1 (NF1) / III. Mécanisme de tumorigenèse des neurofibromes / IV. Conclusion s ri III. Mécanisme de tumorigenèse des Généralités (suite) jaya neurofibromes 5% des patients NF1 développent un sarcome des gaines nerveuses o Mutation p53 /délétions 17p/ délétions CDKN2A/amplification EGFR o u La transformation maligne des neurofibromes plexiformes s’accompagne d’autres l ta évènements génétiques TMGN : Tumeur u t o Des mutations somatiques (= Acquises) supplémentaires touchant des gènes impliqués dans la régulation du cycle cellulaire et de l’apoptose Maligne des Gaines Nerveuses (Sarcome) M o § P53 ++ / CDKN2A... - P53 : protéine majeure dans la réparation de l’ADN - Devient une cellule cancéreuse si mutation (Cancer de mauvais pronostique) Ces mécanismes favorisent l’auto-régénération o Agissent de façon anarchique 7 9 6 17 0 651 UNIVERSITÉ PARIS-EST-CRÉTEIL 2023 - 2024 20 /21  I. Maladies rares / II. Neurofibromatose de type 1 (NF1) / III. Mécanisme de tumorigenèse des neurofibromes / IV. Conclusion s ri jaya Conclusion À retenir La neurofibromatose type 1 est une neurocristopathie o Toutes les pathologies dont les symptômes ont pour origine les crêtes neurales Origine génétique AD par mutation du gène NF1 Elle associe : o Anomalies du développement / anomalies malformatives o Prédisposition aux tumeurs bénignes et malignes § Neurofibromes ++ Apprendre par cœur § Tumeurs malignes des gaines nerveuses / Gliomes § Phéochromocytomes/ cancer du sein/ autres cancers Rôle du second hit o La mutation constitutionnelle § Prédisposition o La mutation somatique § Initiateur de la tumorigenèse o Mutation p53 / LOH CDKN2A § Transformation maligne l o u u t ta M o 7 9 6 17 0 651 UNIVERSITÉ PARIS-EST-CRÉTEIL 2023 - 2024 21 /21