Determinación de Creatinina y BUN 2024 PDF

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Universidad de San Carlos de Guatemala Centro Universitario de Occidente Laboratorio de Bioquímica División de Ciencias de la Salud Lic. Antony Cifuentes Carrera de Médico y Cirujano 2,024 Segundo Año 1. DETERMINACIÓN DE CREATININA La creatinina es una molécula de desecho que se genera a partir del metabolismo muscular. La creatinina proviene de la creatina, una molécula muy importante para la producción de energía muscular. Aproximadamente el 2% de la creatina del cuerpo se convierte en creatinina cada día. La creatinina se transporta desde los músculos por medio de la sangre hacia el riñón. Los riñones filtran la mayoría de la creatinina y la eliminan en la orina. Aunque es una sustancia de desecho, la creatinina es una prueba diagnóstica esencial, ya que se ha observado que su concentración en sangre indica con bastante fiabilidad el estado de la función renal. Si los riñones no funcionan bien, no eliminan bien la creatinina y por lo tanto ésta se acumula en la sangre. Por esto la creatinina puede avisar de una posible disfunción o insuficiencia renal, incluso antes de que se presenten síntomas. Por eso la creatinina suele figurar en los análisis de sangre que se realizan comúnmente. La determinación de creatinina es un indicador útil para evaluar la función glomerular renal, teniendo en cuenta el prerrequisito que la producción de creatinina y su excreción sean iguales. Esto se cumple en individuos sanos con dieta normal. Las variaciones intraindividuales en estas condiciones son mínimas mientras que las interindividuales son muy fluctuantes debido a: Diferencia en la masa muscular y por tanto de producción de creatinina en distintos individuos. Diferencia en la ingesta de carne. Un Kg de carne contiene de 2 a 5 g de creatina que se convierte en creatinina en el proceso de cocción. Del 15 al 30% de la creatinina excretada diariamente es de origen alimentario. La creatinina en suero no es un buen indicador de la tasa de filtración glomerular (FGR) ya que su valor se encuentra aumentado solamente cuando ésta ha disminuido a valores de 60- 40 mL/min/1.73 m2. La utilidad clínica de la determinación de creatinina es el diagnóstico y pronóstico de las nefropatías, obstrucciones urinarias por afección de próstata, vejiga y uréteres. También anurias transitorias por litiasis. Su medición está sujeta a diversas variables preanalíticas; así, por ejemplo, se ve aumentada en casos de lipemia, hemólisis y ejercicio físico excesivo, y disminuye por hiperbilirrubinemia y el embarazo. También algunas enfermedades pueden alterar su concentración sérica, entre ellas, la diabetes, cualquier enfermedad que comprometa la función renal, ya sea aguda o crónica, así las hemorragias, hipotensión, rabdomiolisis, acromegalia y gigantismo, en los que se aumenta su concentración. Mientras que la caquexia por reducción de la masa muscular la reduce. Su excreción en orina está disminuida por insuficiencia renal, miopatías, leucemias anemias. Universidad de San Carlos de Guatemala Centro Universitario de Occidente Laboratorio de Bioquímica División de Ciencias de la Salud Lic. Antony Cifuentes Carrera de Médico y Cirujano 2,024 Segundo Año Algunas drogas también aumentan su concentración sanguínea: gentamicina, meticilina, cimetadina, trimetoprima, espirinolactona, amilorida, ácido salicílico, ácido ascórbico, metildopa, levodopa, fructosa, drogas nefrotóxicas, etc. MATERIALES Suero para las determinaciones químicas Reactivo para la determinación de Creatinina Solucione estándar de Creatinina Cubetas Micropipetas Puntas para micropipetas Fotómetro Reloj PROCEDIMIENTOS 1. Creatinina a) Tomar dos tubos limpios b) Identificar los dos tubos de la siguiente forma: uno como St (de estándar) y uno como M (de muestra) c) Colocar en los dos tubos 1000 µl de reactivo de Jaffe. d) Programar el espectrofotómetro a 505 nm y ponerlo en cero con blanco de agua destilada e) Agregar al tubo St 50 µl (microlitros) de solución estándar de creatinina, activar inmediatamente el cronómetro y transferir a la cubeta de lectura f) Introducir la cubeta al espectrofotómetro y a los 20 segundos leer la primera absorbancia del estándar y anotarla como Ast1 g) Leer la segunda absorbancia del estándar 60 segundos después de la primera y anotarla como ASt2 h) Sacar la cubeta del fotómetro, descartar su contenido y golpearla sobre papel absorbente para eliminar el exceso de líquido remanente i) Repetir los pasos e, f, g y h, utilizando el suero del paciente en vez del estándar, anotando las absorbancias correspondientes como AM1 (a los 20 segundos) y AM2 (60 segundos después de la primera lectura) j) Calcular las diferencias de absorbancia del estándar (ΔSt) y de la muestra (ΔM): ΔASt = ASt1 – Ast2 ΔAM = AM1 –AM2 k) Determinar la concentración de creatinina utilizando ΔASt y ΔAM en la ecuación de Beer-Lambert Concentración de Creatinina en la muestra = (ΔAM /ΔASt) × Concentración del estándar (2 mg/dl) Universidad de San Carlos de Guatemala Centro Universitario de Occidente Laboratorio de Bioquímica División de Ciencias de la Salud Lic. Antony Cifuentes Carrera de Médico y Cirujano 2,024 Segundo Año l) Los valores de referencia de creatinina son: ADULTOS Mujeres 0.6 – 1.1 mg/dl Hombres 0.7 – 1.3 mg/dl NIÑOS Neonatos 0.5 – 1.2 mg/dl Bebés 0.4 – 0.7 mg/dl Niños 0.5 – 1.2 mg/dl 2. DETERMINACION DE NITROGENO DE UREA La urea es un residuo de la descomposición de las proteínas y por lo tanto está directamente relacionada con la cantidad de proteínas que comemos. Normalmente, los riñones filtran la urea de la sangre, pero cuando los riñones no funcionan bien, la cantidad de urea filtrada es menor y aumenta en la sangre. El aumento de urea puede producir malestar digestivo (náuseas y vómitos) y cuando los niveles son muy altos, alteraciones en el nivel de conciencia (uremia). La urea se forma en el hígado, es filtrada y absorbida por los riñones. Constituye la fracción de nitrógeno no proteico más importante en la mayoría de los líquidos biológicos. En el hombre, es el principal producto final del metabolismo proteico. Representa el 85% del nitrógeno urinario, por lo que no resulta sorprendente el papel fundamental que juega el riñón en la regulación sistémica de los niveles de urea. Un aumento de la concentración sérica de urea se interpreta como una posible disfunción renal. La reabsorción renal de urea es mayor cuando el flujo es lento y menor cuando aumenta la diuresis. Los niveles séricos de urea están relacionados con la dieta y el metabolismo proteico. Su utilidad clínica se basa en su importancia en la evaluación de la función renal. Entre las variables preanalíticas que incrementan su valor sérico están el sexo –es mayor en hombres que en mujeres-, la edad, alcalosis, amonio, bilirrubina, creatina, creatinina, hemoglobina, ácido úrico, plomo y la hemólisis. Mientras que entre los que lo disminuyen están el embarazo, la ingesta inadecuada de proteínas, la ingesta de agua y el tabaco. Enfermedades como nefroesclerosis, tuberculosis renal, necrosis cortical, gota crónica, malignidad, hiperparatiroidismo y el síndrome de Reye aumentan sus niveles séricos; mientras que la acromegalia, fibrosis quística, cirrosis hepática, falla hepática, hepatitis tóxica, preeclampsia, eclampsia, síndrome nefrótico y enfermedad celíaca los disminuyen. Entre las drogas que aumentan su concentración sérica están alopurinol, aminoácidos, aspirina, cisplatino, ciclosporina, furosemida, gentamicina, neomicina, tetraciclina, hidroclorotiazida, interleucina 2, pentamidina, tertratolol, ketoprofeno, anfotericina B, captopril, carbamacepina, cimetidina, etc.; y entre las que la disminuyen están la hormona del crecimiento, prednisona, ácido ascórbico, heparina, amikacina, iodo acetato, parametasona, fenotiazinas, etc. Actualmente es más común expresar las concentraciones de urea en términos de nitrógeno de urea (BUN). Universidad de San Carlos de Guatemala Centro Universitario de Occidente Laboratorio de Bioquímica División de Ciencias de la Salud Lic. Antony Cifuentes Carrera de Médico y Cirujano 2,024 Segundo Año MATERIALES Suero para las determinaciones químicas Reactivo enzimático colorimétrico para la determinación de urea y ácido úrico Soluciones estándar de: o Ácido Úrico o Urea Cubetas Micropipetas Puntas para micropipetas Fotómetro Reloj 2. PROCEDIMIENTO NITROGENO DE UREA a) Tomar dos tubos limpios b) Identificar los dos tubos de la siguiente forma: uno como St (de estándar) y uno como M (de muestra) c) Colocar en los dos tubos 1000 µl de reactivo para la determinación de Nitrógeno de Urea d) Programar el espectrofotómetro a 340 nm y ponerlo en cero con blanco de agua estilada e) Agregar al tubo St 10 µl (microlitros) de solución estándar de BUN, activar inmediatamente el cronómetro y transferir a la cubeta de lectura f) Introducir la cubeta al espectrofotómetro y a los 30 segundos leer la primera absorbancia del estándar y anotarla como Ast1 g) Leer la segunda absorbancia del estándar 60 segundos después de la primera y anotarla como ASt2 h) Sacar la cubeta del fotómetro, descartar su contenido y golpearla sobre papel absorbente para eliminar el exceso de líquido remanente i) Repetir los pasos E, F Y G utilizando el suero del paciente en vez del estándar, anotando las absorbancias correspondientes como AM1 (a los 30 segundos) y AM2 (60 segundos después de la primera lectura) j) Calcular las diferencias de absorbancia del estándar (ΔSt) y de la muestra (ΔM) con la fórmula de Beer-Lamberth. Concentración de Urea en la muestra = (ΔAM /ΔASt) × Concentración del estándar (50 mg/dl) BUN= Resultado de Urea X 0.467 Los valores de referencia son: 7 - 18 mg/dl en Mujeres 8 – 20 mg/dl en Hombres