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Questions and Answers
¿Cuál de los siguientes equipos es necesario para realizar cultivos celulares?
¿Cuál de los siguientes equipos es necesario para realizar cultivos celulares?
- Microscopio estereoscópico
- Espectrofotómetro
- Centrífuga de alta velocidad
- Campanas de flujo laminar (correct)
¿Qué tipo de cultivo celular se origina a partir de un fragmento de un órgano?
¿Qué tipo de cultivo celular se origina a partir de un fragmento de un órgano?
- Cultivo in vitro de plantas
- Cultivo de órganos (correct)
- Cultivo de tejidos
- Cultivo de células
¿Cuál es la función principal de los incubadores de CO2 en un laboratorio de cultivos celulares?
¿Cuál es la función principal de los incubadores de CO2 en un laboratorio de cultivos celulares?
- Controlar la temperatura
- Mantener el nivel adecuado de CO2 (correct)
- Almacenar muestras biológicas
- Purificar el aire
Durante la esterilización en un laboratorio de cultivos celulares, ¿qué se utiliza para eliminar microorganismos?
Durante la esterilización en un laboratorio de cultivos celulares, ¿qué se utiliza para eliminar microorganismos?
¿Qué factor no es crítico en el mantenimiento de cultivos celulares?
¿Qué factor no es crítico en el mantenimiento de cultivos celulares?
Los cultivos de tejidos son utilizados principalmente para estudiar:
Los cultivos de tejidos son utilizados principalmente para estudiar:
¿Cuál de los siguientes no es un tipo de cultivo celular?
¿Cuál de los siguientes no es un tipo de cultivo celular?
Para la conservación a largo plazo de células, ¿qué equipo es indicado?
Para la conservación a largo plazo de células, ¿qué equipo es indicado?
En un cultivo celular primario, ¿de dónde se obtienen las células?
En un cultivo celular primario, ¿de dónde se obtienen las células?
Durante qué fase de la curva de crecimiento las células no muestran aumento en número?
Durante qué fase de la curva de crecimiento las células no muestran aumento en número?
Cuál de las siguientes afirmaciones sobre el cultivo celular secundario es correcta?
Cuál de las siguientes afirmaciones sobre el cultivo celular secundario es correcta?
Cuál es la duración típica de la fase exponencial en la curva de crecimiento celular?
Cuál es la duración típica de la fase exponencial en la curva de crecimiento celular?
Qué ocurre en la fase estacionaria de la curva de crecimiento?
Qué ocurre en la fase estacionaria de la curva de crecimiento?
Cuál es una de las aplicaciones de los cultivos celulares?
Cuál es una de las aplicaciones de los cultivos celulares?
Qué tipo de células se obtienen típicamente en un cultivo celular primario?
Qué tipo de células se obtienen típicamente en un cultivo celular primario?
Qué fase se caracteriza por el crecimiento exponencial del número de células?
Qué fase se caracteriza por el crecimiento exponencial del número de células?
¿Qué es la senescencia en las células?
¿Qué es la senescencia en las células?
¿Cuál es el efecto del acortamiento de los telómeros en las células?
¿Cuál es el efecto del acortamiento de los telómeros en las células?
¿Cuáles son las características de las líneas celulares continuas?
¿Cuáles son las características de las líneas celulares continuas?
¿Qué aspecto es esencial controlar para el cultivo celular adecuado?
¿Qué aspecto es esencial controlar para el cultivo celular adecuado?
¿Qué procedimiento NO forma parte de la cronología en el cultivo celular?
¿Qué procedimiento NO forma parte de la cronología en el cultivo celular?
¿Cuál de los siguientes es un ejemplo de línea celular continua?
¿Cuál de los siguientes es un ejemplo de línea celular continua?
¿Qué se busca en el procedimiento de recuento y viabilidad celular?
¿Qué se busca en el procedimiento de recuento y viabilidad celular?
¿Qué se entiende por disgregación celular?
¿Qué se entiende por disgregación celular?
¿Cuál es uno de los métodos mecánicos utilizados para la disgregación celular?
¿Cuál es uno de los métodos mecánicos utilizados para la disgregación celular?
¿Qué se obtiene tras realizar la disgregación de tejido?
¿Qué se obtiene tras realizar la disgregación de tejido?
¿Cuál es un método inmunológico para la selección de células?
¿Cuál es un método inmunológico para la selección de células?
¿Qué se requiere para realizar un recuento y determinar la viabilidad celular?
¿Qué se requiere para realizar un recuento y determinar la viabilidad celular?
¿Qué función tienen las enzimas proteolíticas en la disgregación celular?
¿Qué función tienen las enzimas proteolíticas en la disgregación celular?
¿Cuál es la finalidad de conocer la densidad celular tras la disgregación?
¿Cuál es la finalidad de conocer la densidad celular tras la disgregación?
¿Qué caracteriza a los métodos mecánicos frente a los enzimáticos?
¿Qué caracteriza a los métodos mecánicos frente a los enzimáticos?
¿Qué tipo de métodos se utilizan para separar distintos tipos celulares por su adhesión?
¿Qué tipo de métodos se utilizan para separar distintos tipos celulares por su adhesión?
¿Cuál es el color del Tripan azul cuando se utiliza en la identificación de células muertas?
¿Cuál es el color del Tripan azul cuando se utiliza en la identificación de células muertas?
¿Qué herramienta se utiliza para el recuento de células viables y no viables?
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¿Cuál de las siguientes es una consideración importante antes de sembrar células en un cultivo?
¿Cuál de las siguientes es una consideración importante antes de sembrar células en un cultivo?
Cuando se habla de 'cambio de medio' en el mantenimiento de cultivos, ¿qué se busca lograr?
Cuando se habla de 'cambio de medio' en el mantenimiento de cultivos, ¿qué se busca lograr?
¿A qué temperatura óptima deben incubarse los cultivos celulares?
¿A qué temperatura óptima deben incubarse los cultivos celulares?
¿Cuál es la frecuencia recomendada para observar los cultivos celulares bajo el microscopio en el control periódico?
¿Cuál es la frecuencia recomendada para observar los cultivos celulares bajo el microscopio en el control periódico?
¿Qué aspecto se observa al contar las células muertas con Tripan azul?
¿Qué aspecto se observa al contar las células muertas con Tripan azul?
En el cultivo celular, el término 'monocapa' se refiere a:
En el cultivo celular, el término 'monocapa' se refiere a:
¿Cuál es el porcentaje de FBS que se debe añadir al medio de cultivo?
¿Cuál es el porcentaje de FBS que se debe añadir al medio de cultivo?
¿Qué pasos debe seguir un investigador para realizar el subcultivo de células?
¿Qué pasos debe seguir un investigador para realizar el subcultivo de células?
¿Cuál es el criterio para realizar el subcultivo de las células?
¿Cuál es el criterio para realizar el subcultivo de las células?
¿Qué temperatura y concentración de CO2 se requiere para incubar las células?
¿Qué temperatura y concentración de CO2 se requiere para incubar las células?
¿Qué procedimiento se utiliza para despegar las células adheridas al medio?
¿Qué procedimiento se utiliza para despegar las células adheridas al medio?
¿Cuál de las siguientes opciones describe incorrectamente el uso de la tripsina?
¿Cuál de las siguientes opciones describe incorrectamente el uso de la tripsina?
¿Qué se debe hacer inmediatamente después de centrifugar las células en un falcon?
¿Qué se debe hacer inmediatamente después de centrifugar las células en un falcon?
¿Cuál es el objetivo del recuento celular con la cámara de Neubauer?
¿Cuál es el objetivo del recuento celular con la cámara de Neubauer?
Flashcards
Cultivo celular
Cultivo celular
Conjunto de procedimientos para mantener células vivas fuera del organismo (in vitro).
Equipos de cultivo celular
Equipos de cultivo celular
Componentes necesarios para cultivar células in vitro, incluyendo campanas de flujo laminar, incubadoras de CO2, microscopios invertidos, depósitos de nitrógeno líquido, neveras, congeladores y equipos de esterilización.
Tipos de cultivo celular
Tipos de cultivo celular
Se clasifican en cultivo de órganos, tejidos y células, donde cada tipo conserva diferentes niveles de organización tisular.
Cultivo de órganos
Cultivo de órganos
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Cultivo de tejidos
Cultivo de tejidos
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Cultivo de células
Cultivo de células
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Incubadora CO2
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Microscopio invertido
Microscopio invertido
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Cultivos celulares primarios
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Cultivos celulares secundarios
Cultivos celulares secundarios
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Fase exponencial
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Fase latencia
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Fase estacionaria
Fase estacionaria
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Cultivo de explantes
Cultivo de explantes
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Curva de crecimiento
Curva de crecimiento
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Senescencia celular
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Telómeros
Telómeros
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Líneas celulares continuas
Líneas celulares continuas
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Cultivo primario
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Disgregación celular
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Recuento celular
Recuento celular
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Inmortalidad celular
Inmortalidad celular
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Pases celulares
Pases celulares
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Métodos de disgregación celular
Métodos de disgregación celular
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Métodos mecánicos de disgregación
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Métodos enzimáticos de disgregación
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Selección celular
Selección celular
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Selección celular por propiedades específicas
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Selección celular por métodos inmunológicos
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Viabilidad celular
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Tripan azul
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¿Qué indica el color azul en un cultivo?
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Cámara de Neubauer
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Siembra de cultivo
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Factores a considerar antes de la siembra
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Control periódico microscópico
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Cambio de medio
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Monocapa
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¿Qué pasa con los cultivos cuando llegan al final de la fase exponencial?
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Subcultivo o pase
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Densidad Celular
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Factor de Dilución
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Tripsina
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PBS
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Descongelación de células
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¿Cómo se descongelan las células?
¿Cómo se descongelan las células?
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Study Notes
Tema 3: Cultivos Celulares
- Los cultivos celulares son un conjunto de procedimientos que permiten el mantenimiento de células vivas in vitro.
- Para realizar cultivos celulares, se necesita un laboratorio especializado con equipos específicos.
- Estos equipos incluyen: campanas de flujo laminar, incubadores de CO2, microscopios invertidos, depósitos de nitrógeno líquido, neveras y congeladores a diferentes temperaturas (-200°C, 4°C, -20°C, -80°C), equipos de esterilización (autoclave, sistemas de filtración, luz UV), contadores, pHmetros, placas calefactoras y pipetas automáticas.
Contenidos
- Introducción a los cultivos celulares.
- Biología de las células en cultivo (incluyendo curvas de crecimiento).
- Factores que influyen en el desarrollo de los cultivos celulares (soporte físico, medio de cultivo y atmósfera gaseosa).
- Procedimientos de cultivo celular (disgregación, recuento, siembra, mantenimiento, conservación y descongelación de cultivos).
- Contaminaciones en cultivos celulares (bacterias, levaduras, hongos, micoplasmas y virus).
1. Introducción
- Definición: cultivo celular como procedimientos para mantener células vivas in vitro.
- Necesidad de un laboratorio especializado con equipos específicos.
1.1 Tipos de cultivo celular
- Tres tipos principales: cultivos de órganos, de tejidos y de células.
1.1.1 Cultivo de órganos (o fragmentos de órganos)
- Se originan a partir de un fragmento de órgano, preservando parte de las características histológicas del tejido in vivo.
- Aplicaciones: estudio de interacciones intercelulares, respuestas a estímulos, estudios regenerativos, etc.
- Se mantiene en la interfase entre el medio de cultivo y una atmósfera controlada.
1.1.2 Cultivo de explantes (fragmentos de tejido)
- Los fragmentos de tejido se adhieren a una superficie y se les añade el medio de cultivo apropiado.
1.1.3 Cultivo de células
- Se introduce una suspensión de células en un recipiente con medio de cultivo y se incuban en condiciones óptimas para su proliferación y multiplicación.
- Diversas aplicaciones: investigación básica (metabolismo celular, interacciones celulares), investigación aplicada (producción de anticuerpos, vacunas, fármacos, estudios de toxicidad, uso de células madre para terapia celular, ingeniería e investigación de tejidos y órganos in vitro).
1.2 Cultivo celular primario y secundario
- Cultivo celular primario: Se obtiene directamente a partir de un tejido, disgregando sus células. Generalmente, hay varios tipos de células. Ejemplo: Vellosidades coriónicas
- Cultivo celular secundario: se obtiene a partir de un cultivo primario o de otro secundario mediante un subcultivo o "pase", normalmente con un único tipo de células.
2. Biología de las células en cultivo
2.1 La curva de crecimiento
- Una vez añadidas las células al medio de cultivo adecuado en un frasco y con condiciones óptimas, el crecimiento de las células presenta una dinámica particular.
- Fases de la curva sigmoide: latencia, exponencial y estacionaria.
2.1.1 Fase de latencia (primeras 24 horas)
- Las células se adaptan al medio. No hay crecimiento, el número de células se mantiene constante o incluso disminuye.
2.1.2 Fase exponencial (6-7 días)
- Las células crecen y se dividen rápidamente, el número de células aumenta exponencialmente hasta alcanzar un máximo.
2.1.3 Fase estacionaria
- El medio no admite más células, el crecimiento se detiene, y el número de células se mantiene constante.
2.2 Formas de crecimiento
- Crecimiento en monocapa: las células necesitan adherirse a una superficie sólida para proliferar y forman colonias. La proliferación puede detenerse por contacto entre las células.
- Crecimiento en suspensión: las células no requieren adherirse para crecer, como las células sanguíneas o células madre, y pueden crecer en suspensión, pero la proliferación puede detenerse por la densidad del cultivo.
2.3 Comportamiento tras varios pases
- Tras múltiples subcultivos (o "pases"), el cultivo primario da origen a una línea celular.
- Línea celular es una colonia de células obtenidas de un cultivo primario tras varios subcultivos.
- Tipos de líneas celulares:
- Primarias: se originan de un cultivo primario y su mantenimiento dura un tiempo limitado.
- Continuas: se originan de un cultivo primario y se mantienen sin límites temporales.
- Senescencia: tras cierto número de pases, las células pierden la capacidad de dividirse y mueren.
- Conservación de cultivos celulares primarios: se congelan para preservar la vida de las células y volver a usarlas después.
3. Factores que intervienen en el cultivo
- Soporte físico: tipo de recipiente, tratamiento de superficies.
- Composición y propiedades del medio de cultivo (composición, características fisicoquímicas).
- Atmósfera gaseosa.
- Condiciones de incubación (temperatura, humedad, etc.).
4. Procedimientos de Cultivo Celular
- Disgregación celular: procedimientos para obtener una suspensión celular que contiene los tipos de células deseados.
- Métodos mecánicos y enzimáticos para la disgregación.
- Selección de células.
- Recuento y viabilidad celular (densidad celular).
- Inicio del cultivo celular (siembra)
- Mantenimiento del cultivo (control periódico microscópico, cambio de medio y subcultivo o pase).
- Conservación de cultivos celulares mediante congelación.
- Descongelación de cultivos.
5. Contaminaciones
- Presencia de microorganismos en cultivos.
- Tres tipos: bacterias, levaduras/hongos y micoplasmas/virus, principalmente proveniente de los sueros animales.
- Medidas para prevenir contaminaciones.
6. Aplicaciones del cultivo celular
- Aplicaciones en investigación aplicada (virología, biotecnología, inmunología, farmacología, ingeniería de tejidos, toxicología)
- Aplicaciones en investigación básica (actividad intracelular, flujo intracelular de biomoléculas, genómica y proteómica, ecología celular, interacciones celulares.
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Description
Este cuestionario explora los fundamentos de los cultivos celulares, incluyendo su biología, equipos necesarios y factores que afectan su desarrollo. Se abordarán procedimientos esenciales como siembra, mantenimiento y conservación de cultivos celulares. Ideal para estudiantes de biología que deseen profundizar en el cultivo celular.