TP N° 7 : Le Noyau Interphasique PDF

TP N ° 7 LE NOYAU INTERPHASIQUE  Objectifs du TP: Etude de la structure du noyau au microscope photonique (état du noyau durant les phases du cycle cellulaire). Décrire les différents constituants du noyau inter-phasique au microscope électronique à transmission et à...

TP N ° 7 LE NOYAU INTERPHASIQUE  Objectifs du TP: Etude de la structure du noyau au microscope photonique (état du noyau durant les phases du cycle cellulaire). Décrire les différents constituants du noyau inter-phasique au microscope électronique à transmission et à balayage Etude de l’organisation. moléculaire de la chromatine par la technique de coloration (négative et positive ) observée au microscope électronique à Remarque : Donner brièvement le principe transmission. - Etude du noyau au microscope photonique Document 1  Description du document 1 en introduisant la notion du cycle cellulaire. Cellules en division ( mitose) ; le matériel Cellules en interphase ; le génétique sous forme de matériel génétique sous chromosomes ,absence forme de chromatine: noyaux de l’enveloppe nucléaire interphasiques , présence de et du nucléole. l’enveloppe nucléaire et le Cellules méristématiques des racines d’oignon à nucléole. différents stade du cycle cellulaire observées au M.P. GX 400 ( Technique histologique ) II- Etude du noyau au microscope électronique 1-Ultrastructure du noyau interphasique Document n° 2  Observer ,décrire et légender le document n°2  Conclusion  Réticulum endoplasmique granuleux Ribosomes ( synthèse Envelo protéine) M.Nucléaire ppe externe Espace nucléai M.Nucléaire périnucléaire interne re Lamina densa ( les lamines) Nucléoplas me Nucléole ( synthèse des sous unités ribosomes ) Hétérochromat ine périnucléolaire Euchromatine = chromatine dispersée Pore nucléaire Point de continuité (échanges) avec le R.E.G. Hétérochromatine = chromatine condensée Hyaloplasm e Mitochondrie (énergie) Ultrastructure du noyau interphasique au niveau d’une portion du pancréas exocrine de chauve souris observée au M.E.T G x  1-1-constituants et organisation du nucléole du noyau interphasique CG: composant granulaire (zone de maturation des sous unités ribosomales) Nucléol CFD : composant fibrillaire dense ( Gènes en cours de transcription ARNr 45S + Protéines CF : centre e ribosomales small et large ) fibrillaire ( Gènes non transcrits de l’ADN nucléolaire ) Ultrastructure du nucléole au niveau d’un noyau interphasique d’une portion de la cellule du pancréas exocrine de chauve souris en M.E.T. fort grossissement ( Technique cytologique) Conclusio n Le noyau interphasique est en activité :  Nombreux pores nucléaires  Richesse en euchromatine Richesse en Réticulum endoplasmique granuleux ; c’est une cellule active ( synthèse des protéines) 2-Aspect du noyau au microscope électronique à balayage Cryofracture passant dans FI: Membrane l’espace périnucléaire entre nucléaire interne les deux membranes nucléaires externe et interne FE:Membrane nucléaire externe Document 3 Répliques de la surface de noyaux des cellules d’ovocytes mettant en évidence de nombreux pores nucléaires observées au MEB GX…( Technique de cryodécapage )  Remarqu e: le pore nucléaire n’est pas une simple discontinuité de l’enveloppe nucléaire , il contient une structure complexe du pore nucléaire ( voir cours). La structure des pores nucléaires est dynamique. Leur nombre varie en fonction de l’activité physiologique de la cellule.  3-Organisation moléculaire de la chromatine Comparaison de la chromatine observée sur le Document document 2 et le document ( 4 ,5) 2 Euchromati = La Documen ne fibre A t4 11nm Hétérochromati = La Documen ne fibre B t5 25 nm Chromatine isolée ( noyaux éclatés + UCD) ,étalée observée Ultrastructure de la au MET ( Technique coloration chromatine au niveau d’un négative) noyau interphasique observée au MET Gx..( Technique des  Document 4’ AD Nucléoso me N La fibre nucléosomique (fibre A)(en collier de perle) observée au M.E.T. ( Techniques : noyaux éclatés ;chromatine isolée ,étalée et coloration positive )  Document 5’ La fibre B en solénoïde observée au M.E.T. ( Techniques : Noyaux éclatés , coloration positive )