Review Isolasi DNA Genome Hewan dan Bakteri PDF
Document Details
Uploaded by ChasteZinnia
Universitas Negeri Yogyakarta
Tags
Summary
This document reviews the process of isolating DNA from animal and bacterial genomes. It covers preparation procedures, equipment, data analysis techniques, and important considerations. The document was created by UNIVERSITAS NEGERI YOGYAKARTA.
Full Transcript
Apa itu Isolasi DNA dan Prinsip/Prosesnya? Metode/Teknik pemisahan DNA dari komponen-komponen lainnya (protein, RNA, dll.) dalam suatu sel makhluk hidup sehingga diperoleh DNA murni. Prinsip / Cara Kerja Preparasi Lisis Sel Binding Washing Elution Apa KIT yang diguna...
Apa itu Isolasi DNA dan Prinsip/Prosesnya? Metode/Teknik pemisahan DNA dari komponen-komponen lainnya (protein, RNA, dll.) dalam suatu sel makhluk hidup sehingga diperoleh DNA murni. Prinsip / Cara Kerja Preparasi Lisis Sel Binding Washing Elution Apa KIT yang digunakan dalam Isolasi DNA Genome Hewan dan Bakteri? FavorPrep Blood/Cultured Cells Genomic DNA Extraction Kit by FavorGen Buffer FATG : Lisis buffer Buffer FABG :Mendenaturasi protein dan membantu berikatan dengan membrane silika Buffer W1 : Mendenaturasi protein dan kontaminan lain Buffer Wash : Pencucian dari garam garam buffer Buffer Elusi : Melepas DNA dari membrane silika Bagaimana cara kerja Isolasi DNA Genome hewan? Preparasi Sampel Darah Collect fresh blood in a vacutainer tube. Mammalian blood can be up to 50 μl Not mammalian blood (eg. bird or fish) can be up to 10 μl. Add 150 μl of FATG Buffer and the blood sample into a 1.5 ml microcentrifuge tube. Mix by vortexing. Vacutainer Tube Bacterial Cells Preparation FATG Bagaimana cara kerja Isolasi DNA Genome Bakteri? ELEKTROFORESIS DNA Ladder DNA Marker: Tiangen 1 kb DNA Ladder CONTOH VISUALISASI DNA GENOME BAKTERI S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 HASIL ISOLASI DNA MARKER / DNA LADDER P BIO A 23 P BIO C 23 Fungsi Spektrofotometer Alat yang digunakan untuk menghitung seberapa besar konsentrasi senyawa atau zat yang ada pada sebuah sampel dengan menghitung nilai absorban yang diperoleh pada panjang gelombang tertentu Analisis Hasil Isolasi DNA 1. Mengukur tingkat kemurnian dan konsentrasi DNA 2. Panjang gelombang 260 nm dan 280 nm Konsentrasi DNA DNA = A260 x 50 x Faktor pengenceran Keterangan: 50 = konstanta tetap yang digunakan untuk mengukur DNA. Absorbansi 1 unit pada A260 setara dengan konsentrasi 50 µg/mL DNA untai ganda dalam larutan. Faktor pengenceran = Total Volume Akhir Volume Sampel (DNA) Kemurnian DNA DNA = A260 A280 Keterangan: Kemurnian DNA berada pada rentang nilai 1,8 – 2,0 Kuvet Kuarsa Mikro Langkah Kerja Nyalakan spektrofotometer (dibagian belakang). Kemudian tunggu proses Inisiasi berlangsung (semua OK) Tunggu sekitar 15-30 menit sebelum digunakan. TUJUAN LAPORAN PRAKTIKUM 1. Mengetahui proses tahapan isolasi DNA genome bakteri dan hewan 2. Mengetahui perbedaan proses tahapan isolasi DNA genome bakteri dan hewan 3. Mengetahui hasil visualisasi isolasi DNA genome bakteri dan hewan 4. Mengetahui proses dan hasil analisis kuantitatif DNA dengan teknik spektrofotometri