Podcast
Questions and Answers
Apa itu isolasi DNA?
Apa itu isolasi DNA?
Metode pemisahan DNA dari komponen-komponen lainnya dalam sel makhluk hidup sehingga diperoleh DNA murni.
Cocokkan buffer dengan fungsinya dalam isolasi DNA.
Cocokkan buffer dengan fungsinya dalam isolasi DNA.
Buffer FATG = Lisis sel Buffer FABG = Mendenaturasi protein Buffer W1 = Mendenaturasi protein dan kontaminan lain Buffer Wash = Pencucian garam-garam buffer Buffer Elusi = Melepas DNA dari membrane silika
Apa fungsi spektrofotometer dalam analisis DNA?
Apa fungsi spektrofotometer dalam analisis DNA?
Menghitung konsentrasi senyawa atau zat pada sampel dengan menghitung nilai absorban.
Pengukuran konsentrasi DNA dilakukan dengan rumus $DNA = A260 \times ______ \times Faktor pengenceran$. Apa nilai tetap yang digunakan?
Pengukuran konsentrasi DNA dilakukan dengan rumus $DNA = A260 \times ______ \times Faktor pengenceran$. Apa nilai tetap yang digunakan?
Signup and view all the answers
Kemurnian DNA harus berada pada rentang nilai 1,8 – 2,0.
Kemurnian DNA harus berada pada rentang nilai 1,8 – 2,0.
Signup and view all the answers
Apa tujuan laporan praktik isolasi DNA?
Apa tujuan laporan praktik isolasi DNA?
Signup and view all the answers
Kit apa yang digunakan dalam isolasi DNA genome hewan dan bakteri?
Kit apa yang digunakan dalam isolasi DNA genome hewan dan bakteri?
Signup and view all the answers
Apa itu isolasi DNA?
Apa itu isolasi DNA?
Signup and view all the answers
Apa saja langkah dalam proses isolasi DNA?
Apa saja langkah dalam proses isolasi DNA?
Signup and view all the answers
Apa KIT yang digunakan dalam isolasi DNA genome hewan dan bakteri?
Apa KIT yang digunakan dalam isolasi DNA genome hewan dan bakteri?
Signup and view all the answers
Buffer yang digunakan untuk lisis sel disebut ______.
Buffer yang digunakan untuk lisis sel disebut ______.
Signup and view all the answers
Berapa banyak darah yang dapat dikumpulkan untuk isolasi DNA dari darah mamalia?
Berapa banyak darah yang dapat dikumpulkan untuk isolasi DNA dari darah mamalia?
Signup and view all the answers
Apa tujuan dari analisis hasil isolasi DNA?
Apa tujuan dari analisis hasil isolasi DNA?
Signup and view all the answers
Pada panjang gelombang berapa kemurnian DNA biasanya diukur?
Pada panjang gelombang berapa kemurnian DNA biasanya diukur?
Signup and view all the answers
Cocokan buffer dengan fungsinya:
Cocokan buffer dengan fungsinya:
Signup and view all the answers
Mengapa spektrofotometer digunakan dalam analisis isolasi DNA?
Mengapa spektrofotometer digunakan dalam analisis isolasi DNA?
Signup and view all the answers
Study Notes
Isolasi DNA
- Isolasi DNA adalah proses memisahkan DNA dari komponen sel lainnya seperti protein, RNA, dan lipid.
- Tujuannya adalah mendapatkan DNA murni.
Prinsip dan Proses Isolasi DNA
- Preparasi : Mempersiapkan sampel dan alat yang diperlukan.
- Lisis Sel : Memecah membran sel menggunakan buffer lisis (misalnya FATG Buffer).
- Binding : Memisahkan DNA dari larutan dengan menggunakan membrane silika dan buffer FABG.
- Washing : Membersihkan kontaminan dari membrane silika menggunakan buffer W1 dan buffer Wash.
- Elution : Melepaskan DNA dari membrane silika dengan menggunakan buffer elusi.
Kit Isolasi DNA
- FavorPrep Blood/Cultured Cells Genomic DNA Extraction Kit oleh FavorGen merupakan kit yang umum digunakan untuk isolasi DNA genom hewan dan bakteri.
Isolasi DNA Genom Hewan
- Sampel darah segar (hingga 50 μl untuk mamalia, hingga 10 μl untuk hewan non-mamalia) ditambahkan ke 150 μl FATG Buffer dalam tabung mikrocentrifuge 1.5 ml.
- Sampel diaduk dengan vortexing.
Isolasi DNA Genom Bakteri
- Sampel bakteri ditambahkan ke FATG Buffer dalam tabung mikrocentrifuge.
- Langkah selanjutnya sama dengan isolasi DNA genom hewan.
Visualisasi DNA Genom Bakteri
- Hasil isolasi DNA dapat dilihat dengan elektroforesis.
- DNA Ladder digunakan sebagai marker ukuran.
Spektrofotometer
- Alat yang digunakan untuk menentukan konsentrasi DNA dengan mengukur absorbansi pada panjang gelombang tertentu.
Analisis Hasil Isolasi DNA
- Analisis menggunakan spektrofotometer bertujuan untuk:
- Mengukur konsentrasi DNA.
- Mengukur kemurnian DNA.
Konsentrasi DNA
- Rumus: Konsentrasi DNA = A260 x 50 x Faktor pengenceran
- A260 adalah absorbansi pada panjang gelombang 260 nm.
- Faktor pengenceran = Total Volume Akhir / Volume Sampel (DNA).
- 50 adalah konstanta yang menunjukkan bahwa 1 unit absorbansi pada A260 setara dengan konsentrasi 50 µg/mL DNA untai ganda dalam larutan.
Kemurnian DNA
- Rumus: Kemurnian DNA = A260 / A280
- A280 menunjukkan absorbansi pada panjang gelombang 280 nm (Protein).
- Nilai kemurnian DNA yang ideal berada di antara 1,8 - 2,0.
Langkah Kerja Spektrofotometer
- Nyalakan spektrofotometer dan tunggu hingga proses inisiasi selesai.
- Tunggu 15-30 menit sebelum alat siap digunakan.
Tujuan Laporan Praktikum
- Memahami tahapan isolasi DNA genom bakteri dan hewan.
- Memahami perbedaan proses isolasi DNA genom bakteri dan hewan.
- Memahami hasil visualisasi isolasi DNA genom bakteri dan hewan.
- Memahami proses dan hasil analisis kuantitatif DNA dengan teknik spektrofotometri.
Isolasi DNA
- Proses pemisahan DNA dari komponen sel lainnya seperti protein dan RNA
- Tujuan: Mendapatkan DNA murni
- Prinsip Isolasi DNA:
- Preparasi: Mempersiapkan sampel untuk proses lisis
- Lisis Sel: Memecah membran sel dan melepaskan DNA
- Binding: Mengikat DNA ke membran silika
- Washing: Menghilangkan kontaminan dari membran silika
- Elution: Melepaskan DNA dari membran silika
Metode Isolasi DNA Genome Hewan dan Bakteri
- FavorPrep Blood/Cultured Cells Genomic DNA Extraction Kit
-
Buffer:
- FATG: Buffer lisis
- FABG: Mendenaturasi protein dan membantu berikatan dengan membran silika
- W1: Mendenaturasi protein dan kontaminan lain
- Wash: Mencuci garam dari buffer
- Elusi: Melepas DNA dari membran silika
Isolasi DNA Genome Hewan
-
Preparasi Sampel Darah:
- Kumpulkan darah segar dalam tabung vakum.
- Darah mamalia: 50 μl
- Darah non-mamalia (burung, ikan): 10 μl
- Tambahkan 150 μl buffer FATG dan sampel darah ke dalam tabung mikrocentrifuge 1.5 ml.
- Campur dengan vortex.
Isolasi DNA Genome Bakteri
- Preparasi: Gunakan buffer FATG
Elektroforesis DNA
- Teknik pemisahan DNA berdasarkan ukuran
- DNA Ladder: DNA dengan ukuran yang telah diketahui untuk membandingkan ukuran DNA sampel
- Marker DNA: Contoh, Tiangen 1 kb DNA Ladder
Visualisasi Hasil Isolasi DNA
- Hasil Isolasi DNA dapat dilihat pada gel elektroforesis
- Contoh hasil visualisasi:
- S1, S2, S3, S4, S5, S6, S7 menunjukkan sampel DNA yang telah diisolasi
- Marker / DNA Ladder (ukuran DNA telah diketahui)
Spektrofotometer
- Alat untuk menentukan konsentrasi dengan menghitung absorbansi pada panjang gelombang tertentu.
- Fungsi dalam analisis isolasi DNA:
- Menghitung tingkat kemurnian dan konsentrasi DNA
- Panjang gelombang 260 nm untuk mengukur konsentrasi DNA
- Panjang gelombang 280 nm untuk mengukur protein
Analisis Kuantitatif DNA
-
Konsentrasi DNA:
- Konsentrasi DNA = A260 x 50 x Faktor Pengenceran
- 50 = konstanta tetap
- Faktor Pengenceran = Total Volume Akhir / Volume Sampel (DNA)
-
Kemurnian DNA:
- Kemurnian DNA = A260 / A280
- Nilai ideal: 1.8 - 2.0
Tujuan Praktikum Isolasi DNA
- Memahami proses tahapan isolasi DNA genome bakteri dan hewan
- Mengetahui perbedaan proses isolasi DNA genome bakteri dan hewan
- Memahami hasil visualisasi isolasi DNA genome bakteri dan hewan
- Memahami proses dan hasil analisis kuantitatif DNA dengan teknik spektrofotometri
Studying That Suits You
Use AI to generate personalized quizzes and flashcards to suit your learning preferences.
Related Documents
Description
Quiz ini membahas tentang proses isolasi DNA, termasuk prinsip dan langkah-langkah yang terlibat. Anda juga akan menemukan informasi mengenai kit isolasi DNA yang umum digunakan untuk genetik hewan dan bakteri. Uji pengetahuan Anda tentang teknik isolasi DNA dan aplikasinya dalam biologi molekuler.
