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Lipoprotéines Plan Introduction I. Structure II. Classification III. Métabolisme des lipoprotéines 1- Le cycle exogène 2- Le cycle endogène 3- La voie de retour du cholestérol IV. Exploration du métabolisme des LP 1- Etude de l’aspect du sérum 2- Etude des paramètres lipidique V. Les dyslipoprotei...

Lipoprotéines Plan Introduction I. Structure II. Classification III. Métabolisme des lipoprotéines 1- Le cycle exogène 2- Le cycle endogène 3- La voie de retour du cholestérol IV. Exploration du métabolisme des LP 1- Etude de l’aspect du sérum 2- Etude des paramètres lipidique V. Les dyslipoproteinémies 1. Primaires 2. Rares 3. Secondaires Conclusion 2 Introduction • Lipides: famille hétérogène de molécules hydrophobes, insolubles dans les milieux biologiques aqueux. • Principaux lipides du plasma: • Cholestérol • Triglycérides • phospholipides • Ils sont véhiculés au sein d’édifices macromoléculaires complexes : les lipoprotéines. • Lipoprotéine= lipide + apolipoprotéine. 3 Intérêt • la fréquence des hyperlipoprotéinémies et leur retentissement sur la paroi artérielle. • Une relation certaine entre le niveau de la cholestérolémie et la fréquence des atteintes cardio-vasculaires. • 80% des personnes victimes d’un IDM sont porteuses d’un trouble du métabolisme lipidique. 4 Plan Introduction I. Structure II. Classification III. Métabolisme des lipoprotéines 1- Le cycle exogène 2- Le cycle endogène 3- La voie de retour du cholestérol IV. Exploration du métabolisme des LP 1- Etude de l’aspect du sérum 2- Etude des paramètres lipidique 3- lipidogramme V. Les dyslipoproteinémies 1. Primaires 2. Rares 3. Secondaires Conclusion 5 II. Structure des lipoprotéines 1- Lipides plasmatiques: • Principaux lipides du plasma : – Cholestérol : précurseur essentiel des acides biliaires, vitamine D, hormones stéroïdiennes. Constituant des membranes cellulaires. CE AG + CL – Triglycérides : forme de transport et stockage de l’énergie lipidique. – Phospholipides : constituants membranaire • Au niveau plasmatique les lipides se lient à des apolipoprotéines. 6 II. Structure des lipoprotéines 2- Les apoprotéines: • Ce sont des protéines synthétisées sous forme de propeptide ou prépropeptide. • La nomenclature alphabétique des apolipoprotéines regroupe des protéines ayant des structures et des fonctions très différentes. • on connait actuellement dix apolipoprotéines principales A I , A II, AIV, A V, B, CI, CII, CIII, D, E et une apoprotéine particulière L’apo a. • D’autres apoproteines, présentent à l’état de trace et dont le rôle est mal défini ont été découverte ces dernières années. 7 II. Structure des lipoprotéines Le rôle des apoprotéines: ü Un rôle structural de maintien du complexe macromoléculaire pour la solubilisation et le transport des sites de synthèse vers les sites d'utilisation (situées à la périphérie) ü Un rôle métabolique : - en permettant la reconnaissance des sites récepteurs à apolipoprotéines B et E. - Elles permettent les échanges lipidiques avec d’autres lipoprotéines et avec les cellules. ü Un rôle d’effecteur enzymatique: - activateur ou inhibiteur d’enzymes intervenant dans le métabolisme des lipoprotéines Ex: apo CII activateur, apo CIII inhibiteur de la lipoprotéine lipase 8 Les apolipoprotéines apoprotéines Site de synthèse Rôle fonctionnel AI Foie, intestin Structural Activation LCAT A II Foie Activation HTGL A IV Foie, intestin Activation LCAT B 100 Foie Ligand récepteur LDL B 48 Intestin Structural CI Foie Active LCAT C II Foie Active LPL C III Foie Inhibe LPL et la liaison ApoErécepteurs D Foie, muscle, placenta, intestin, cerveau,… -------------- E Foie, cerveau , macrophages,… Ligand récepteur Apo B/E a foie --------------9 II. Structure des lipoprotéines 3-les lipoprotéines • Couche périphérique : • cholestérol libre (CL). • phospholipides (PL). • Apolipoprotéines. • le noyau est formé de lipides hydrophobes : • triglycérides (TG). • esters de cholestérol (CE). 10 II. Structure des lipoprotéines Apoprotéines Phospholipides Cholestérol libre CE = Cholestérol estérifié TG = Triglycérides 11 II. Structure des lipoprotéines Structure des lipoprotéines en 3D 12 Plan Introduction I. Structure II. Classification III. Métabolisme des lipoprotéines 1- Le cycle exogène 2- Le cycle endogène 3- La voie de retour du cholestérol IV. Exploration du métabolisme des LP 1- Etude de l’aspect du sérum 2- Etude des paramètres lipidique 3- lipidogramme V. Les dyslipoproteinémies 1. Primaires 2. Rares 3. Secondaires Conclusion 13 III. Classification des lipoprotéines • 5 classes selon leur composition (lipidoprotéique), leur densité (mise en évidence par ultracentrifugation): o Chylomicrons o Very Low Density Lipoprotein (VLDL) o Intermediate Density Lipoprotein (IDL) o Low Density Lipoprotein (LDL) o Hight Density Lipoprotein (HDL) 14 III. Classification des lipoprotéines Lipoprotéine Densité % protéines % lipides Principaux Principales lipides Apo. Chylomicrons < 0.99 2 89 TG B48, CII, CIII, AI, AIV VLDL 0.99 – 1.006 10 90 TG B100, CII, E IDL 1.006 – 1.019 20 80 TG B100, E LDL 1.019 – 1.063 25 75 Cholestérol B100 HDL 1.063 – 1.125 50 50 Cholestérol PL AI, AII Lipoprotéine a 1,055-1,085 35 65 Cholestérol B100, a 15 III. Classification des lipoprotéines Selon la mobilité électrophorétique : α Pré-β β Dépôt - α-lipoprotéines (HDL). - pré-β lipoprotéines (VLDL). - β lipoprotéines (LDL). - Les Chylomicrons : au point de dépôt. 16 Rôle des lipoprotéines CHYLOMICRONS Ø Transport des TG d’origine alimentaire Ø Apport d’acides gras aux tissus: - tissu adipeux. - Foie. - Muscle. Ø Sous l’action de la lipoprotéine lipase et grâce au récepteur de l’apoE. 17 Rôle des lipoprotéines VLDL Ø Transport des TG d’origine endogène Ø Action de la lipoprotéine lipase Ø Se transforment en IDL IDL Ø Transport des TG/Chol Ø Convertis en LDL ou captés par le foie 18 Rôle des lipoprotéines LDL Ø Principal transport du cholestérol (sous forme estérifié). Ø Captées par les cellules grâce au récepteur LDL. HDL Ø Captent le cholestérol des cellules périphériques ou des autres lipoprotéines. Ø Assurent son retour vers le foie (cholestérol estérifié éliminé dans la bile). 19 Plan Introduction I. Structure II. Classification III. Métabolisme des lipoprotéines 1- Le cycle exogène 2- Le cycle endogène 3- La voie de retour du cholestérol IV. Exploration du métabolisme des LP 1- Etude de l’aspect du sérum 2- Etude des paramètres lipidique 3- lipidogramme V. Les dyslipoproteinémies 1. Primaires 2. Rares 3. Secondaires Conclusion 20 III-Métabolisme des lipoprotéines • Synthèse : Principalement par le foie et intestin. • Nombreux échanges et transformations dans le sang circulant et les tissus. • Fonction de TRANSPORT des TG et du Cholestérol. • TG : transportés depuis intestin ou foie vers tissus utilisateurs des AG : • Muscles, cœur • Tissu adipeux • Foie 21 III-Métabolisme des lipoprotéines • 3 voies interdépendantes et reliées : - La voie exogène : transport et utilisation des lipides alimentaires. - La voie endogène : transport et utilisation des lipides de synthèse hépatique (ou extra hépatique). - La voie inverse des HDL : la voie de retour du cholestérol : des tissus périphériques vers le foie. 22 La voie exogène: HDL AGL + MG CL + PL CELLULE INTESTINALE TG B4 8+ Golgi B 48 A C A ENDOTHELIUM CAPILLAIRE LIPOPROTEINE LIPASE Lysos ome CHYLOMICRON E AGL RECEPTEUR à l'APO E (LRP) REMNANT AGL - Albu TG de réserve CELLULE HEPATIQUE 23 Métabolisme des VLDL HDL TG CETP CE B1 0 E 0+ ENDOTHELIUM CAPILLAIRE VLDL +C Golgi TG LIPOPROTEINE LIPASE Lysosome AGL HL (lipase hépatique) RECEPTEUR B/E (R-LDL) LDL REMNANT (IDL) AGL - Albu Oxydation CELLULE HEPATIQUE VOIE SCAVENGER (Macrophages) RECEPTEUR B/E (R-LDL) Lysosome CELLULE PERIPHERIQUE 24 III-Métabolisme des lipoprotéines • S’il existe un déficit d’épuration des LDL: è ces LP séjournent plus longtemps dans le sang et vont passer dans l’espace sous endothélial et se transformer en LDL oxydées. • Ces derniers se fixent sur les macrophages qui stockent le CE des LDL. • Le macrophage se transforme alors en cellule spumeuse qui joue un rôle dans l’athérosclérose. 25 La voie endogène 26 La voie inverse du cholestérol 27 Schéma récapitulatif du métabolisme des lipoprotéines 28 Plan Introduction I. Structure II. Classification III. Métabolisme des lipoprotéines 1- Le cycle exogène 2- Le cycle endogène 3- La voie de retour du cholestérol IV. Exploration du métabolisme des LP 1- Etude de l’aspect du sérum 2- Etude des paramètres lipidique 3- lipidogramme V. Les dyslipoproteinémies 1. Primaires 2. Rares 3. Secondaires Conclusion 29 IV.Exploration du métabolisme des LP è Le bilan lipidique est un des éléments de la première étape de la stratégie de prévention des maladies cardiovasculaires . En résumé, un bilan lipidique complet : la détermination, au bout de 12 h de jeûne, des paramètres suivants : – aspect du sérum. – cholestérol total (CT). – triglycérides (TG). – HDL-cholestérol (C-HDL). – LDL-cholestérol (C-LDL). – apolipoprotéine B. – apolipoprotéine A-I. 30 IV.Exploration du métabolisme des LP qConditions pré analytiques - Patient à jeun depuis au moins 12heures - Prélèvement du sang veineux - Tube sec ou avec héparine - Centrifugation 3000Tr/mn pdt 5 mn 31 qConservation du prélèvement §Bilan de routine . +4°C pendant 7 jours . Au de là: -15°C et -20°C 32 qÉtudes des paramètres lipidiques ØAspect du sérum Chez un sujet à jeun depuis 12 H . Sérum doit être clair: peu VLDL; pas chylomicrons . S’il est opalescent: excès VLDL . S’il est lactescent: présence chylomicrons Contrôler: test de crémage; garder+ 4°C pdt 24h → crème à la surface sérum 33 Dosage des triglycérides §Intérêt: évaluer le risque athérothrombotique, pancréatique § Méthodes: enzymatiques 34 Les méthodes enzymatiques § Plus utilisées, elles reposent sur le dosage enzymatique du glycérol libérée après action de la lipase § Plusieurs techniques: • Technique GK; GPDH • Technique à la LDH • Technique à l’oxydase- peroxydase • Spectroréflectométrie 35 Technique à l’oxydase- peroxydase ATP TG ADP 3AG + Glycérol lipase Glycérol3P Glycérol kinase Glycérol oxydase dase y x o r pe Quinone imine colorée +H2O l+ Phéno h én a p o n i 4 am H2O2 + DH acétone P zone Lecture à 540nm 36 Dosage du cholestérol total § Intérêt: Evaluer le risque lipidique cardiovasculaire § Plusieurs techniques: . Plus anciennes sont colorimétriques . Plus utilisées( routine) sont enzymatiques . Méthode de référence est chromatographique en phase gazeuse 37 Réaction à la cholestérol oxydase et peroxydase CE Cholestérol estérase CL + O2 Chol oxydase Cholesténe-4-one + H2O2 Phénol+4 aminophénazone Peroxydase 4H2O Quinone imine Lecture à 540 nm 38 §Méthode chromatographique L’échantillon sérique est passé sur Chromatographie en phase gazeuse suivie d’une mesure par spectrométrie de masse §Valeurs usuelles CT ˂ 5,70 mmol/L ou 2,2 g/L 39 Dosage du cholestérol HDL § Intérêt: il est admis que HDL-C constitue la fraction protectrice du cholestérol car il existe une relation inverse entre la concentration en HDL-c et la fréquence des complications cardiovasculaires § Méthodes: indirecte et directe 40 Méthode indirecte - S’effectue après précipitation LDL, VLDL par complexes de polyanions ou l’acide phosphotungstique en présence de cations bivalents - HDL dosés / technique enzymatique surnagent après centrifugation du précipité - Interférence TG à partir de 4 mmol/L 41 Méthode directe § Se fait après blocage des autres lipoprotéines par • des Ac anti Apo B • Sulfates d’alpha-cyclodextrine et de dextrane • Polyanions § Suivi d’un dosage enzymatique §Valeurs usuelles de HDL-CT Homme: ˃1,10 mmol/L ou ˃ 0,45 g/L Femme: ˃1,30 mmol/L ou ˃ 0,55g/L 42 Évaluation du cholestérol des LDL § Intérêt Des taux importants de LDL-c plasmatiques conduisent à des plaques d’athérome dans la paroi des artères, elles sont donc un facteur de risque des maladies cardiovasculaires. § Méthodes: directe , par calcul 43 Dosage direct des LDL -Étapt 1: Réactifs masquant chylomicrons, VLDL, HDL - Étape 2: Dosage du cholestérol de la fraction LDL 44 üÉvaluation par la formule de Friedewald § Condition: TG˂ 4 mmol/L ou 3,5 g/L LDL(mmol/L): Chol total- (HDL chol +TG/2,2) LDL(g/L): Chol total-- HDL chol- TG/5) § Formule de Planella Si TG˃3,5 g/L LDL= 0,41Chol T(mmol/L)+ 1,7 Apo B(g/l)- 0,32TG - 0,27 § Valeurs usuelles: ˂ 1,6g/L 45 ØAutres paramètres Techniques Dosage des Apo protéines AI et B immunonéphélémétrie, immunoturbidimétrie Valeurs usuelles - apoAI: ˃ 1,20 g/L - Apo B: ˂0,8 g/L Dosage lipoparticule AI immunologiques ˃ 0,35 g/L Dosage de la Lp (a) immunonéphélémétrie, immunoturbidimétrie ˂0,3 g/L 46 Appréciation du risque athérogène rapport: C-LDL/C-HDL ˂ 3,5 Apo B/ Apo AI ˂ 3,5 47 Plan Introduction I. Structure II. Classification III. Métabolisme des lipoprotéines 1- Le cycle exogène 2- Le cycle endogène 3- La voie de retour du cholestérol IV. Exploration du métabolisme des LP 1- Etude de l’aspect du sérum 2- Etude des paramètres lipidique 3- lipidogramme V. Les dyslipoproteinémies 1. Primaires 2. Rares 3. Secondaires Conclusion 48 DYSLIPOPROTEINEMIES Dyslipoproteinémies primaires ou familiales Dyslipoproteinémies primaires classées Classification de FREDRICKSON Dyslipoproteinémies secondaires Dyslipoproteinémies primaires non classées Classification de DE GENNES Métaboliques Iatrogènes Hormonales 49 Hyperlipoprotéinémies familiales Fredrickson I IIa IIb III fréquence Hyperchylomicronémie primaire hypercholestérolémie hyperlipidémie mixtes dysbétalipoprotéinémie Très rare fréquent fréquent rare Caractéristiques biologiques TG, CT↑↑↑↑ Chyl à jeun CT,↑↑↑ LDL ↑↑ TG N CT, TG ↑↑ LDL, VLDL ↑↑ TG ↑↑ CT ↑ Chyl, IDL ↑↑ Aspect du sérum Lactescent Désordre génétique associé Déficit familial en LPL Clair Hyper chol. Polygénique Hypercho. Familiale Déficit en récepteur B/E Opalescent Hyperlipidé. Familiale combinée Hypercho. Familiale opalescent Homozygotie apo E2 IV Hypertriglycéridémie endogène fréquent TG↑↑↑↑ CT N VLDL ↑↑↑ Opalescent Hypertriglycéridémie familiale V Hyperlipoprotéinémie mixte rare TG ↑↑↑↑ CT ↑ Chyl à jeun VLDL↑↑↑ LDL et HDL ↓ lactescent Déficit en apo CII Hyperlipémie familiale combinée Hypertriglycéridémie familiale 50 Suite phénotypes Clinique I Exprimé chez enfant , xanthomes papulaires éruptifs, hépatosplénomégalie Pancréatite, lipémie rétinienne IIa Enfant ++ Adulde: AVC prématurés, xanthomes tendineux, histoire familiale IIb Enfant ++ Adulde: AVC prématurés, xanthomes tendineux Histoire familiale III Xanthomes plans palmaires quelques fois tndineux IV hépatosplénomégalie Pancréatite, parfois AVC prématurés, xanthomes éruptifs V hépatosplénomégalie Pancréatite, lipémie rétinienne xanthomes papulaires éruptifs 51 Manifestations cliniques : Xanthomatose cutanéotendineuse exubérante Xanthome tendineux Arc cornéen (Forme hétérozygote) (Forme hétérozygote) (forme homozygote) Xanthome du tendon d’Achille Xanthomes des extenseurs des doigts Euromed University 52 Classification selon De Gennes Type selon Fredrickson Hypercholestérolémies essentielles CT/TG˃2,5 -Forme mineure: expression biologique permanente, manifest cardio. vasculaires occasionnelles -Forme majeure : xanthomatose tendineuse, hyperchol. Familiale(XTHF) -Forme monstrueuse de XTHF Hypercholestérolémies mixtes CT/TG ˂= 2,5 TG/CT˂= 2,5 IIa -Forme mineure: expression biologique permanente, qlq manifest cardio. vasculaires -Forme majeure avec ou sans xanthomatose IIb Hypertriglycéridémies majeures TG/CT˃2,5 -Formes exogènes dépendantes des graisses(↓LPL) -Formes endogènes indépendantes des graisses(glucidodépendante, LPL N) -Formes exogènes et endogènes I IV V III 53 Dyslipoproteinémies primaires non classées • La maladie de TANGIER: – Analphalipoproteinémie autosomique récessive avec mutation sur le gène de l’apo AI. – Le transport reverse du cholestérol n’est plus effectué et il se dépose dans différents tissus. Dyslipoprotéinémies rares Définition Hyperlapobétali poprotéinémie ↑ apo B LDL N ou ↑ + petites , denses ↑ Lp(a) ↑αLP ↑HDL-chol ↑Apo AI LDL N ↓αLP ou abs = maladie de Tangier ↓HDL-chol ↓↓ Apo AI Risque athérogène Transmission Très élevé très élevé Génétique Nul Protection contre athérosclérose Autosomique dominante Très élevé Autosomique dominante 55 Dyslipoprotéinémies secondaires Une dyslipoprotéinémie secondaire peut être iatrogène ou bien être la conséquence de nombreuses pathologies 56 Principaux Dyslipoprotéinémies secondaires Type selon Fredrickson Pathologies métaboliques -Diabète -Insuffisance rénale -Hyper uricémies Syndrome néphrotique Pathologie hormonale - Hypothyroïdies Hyperlipoprotéinémies iatrogènes -Contraceptifs stéroïdiens - béta bloquants -Diurétiques thiazidiques, Anse -Corticoïdes -Interférons -Inhibiteurs des protéases CT TG IV ou IIb N ou + + IIb ou IV + + ++ N ou ++ N ou + N + N ou + + + + + + + + + IIa ou IIb IIb ou IV IV IIb IV ou IIb 57 Conclusion •L’hypercholestérolémie fait parti de l’une des causes majeures de la mortalité cardiovasculaire •Pour l ’éviter Il faut un dépistage systématique des hyperlipémies associé à une modification du régime alimentaire. 58 MERCI DE VOTRE ATTENTION 59