TD1 Microscopie Optique : La Microscopie à Champ Clair 2024 PDF

TDs « biologie de la cellule animale » Pr. Vanessa DEHENNAUT Laboratoire : UMR CANTHER Cité scientifique Institut ONCOLILLE Bât SN4, porte 103 Campus CHRU...

TDs « biologie de la cellule animale » Pr. Vanessa DEHENNAUT Laboratoire : UMR CANTHER Cité scientifique Institut ONCOLILLE Bât SN4, porte 103 Campus CHRU 03 20 43 44 56 03 20 96 52 76 [email protected] MOODLE : TD BC1 gp V.DEHENNAUT Clé d’inscription rapide : kzrcgk 1  TDs « biologie de la cellule animale » TD1: microscopie optique à champ clair 1 (1h30) TD2: vacuoles et parois TD3: microscopie optique à champ clair 2: préparation des échantillons (1h30) TD4: les plastes TD5 : microscopie électronique à transmission (1h30) TD6: préparation TP « colorations cytochimiques» (1h) TD7: la mitose TD8: microscopie à fluorescence (1h30) 2 TPs biologie cellulaire TP1: Utilisation du microscope TP2 : la cellule végétale TP3: les plastes TP4: colorations cytochimiques TP5: la mitose TP6 : COLLE FINALE TDs/TPs 3 TD1: Microscopie optique : la microscopie à champ clair 4  Définition du microscope Étymologie: (micro- [ μικρός petit ] et -scope [ σκοπεϊν observer ] Instrument permettant l'observation visuelle de petits objets ou détails d'objets indiscernables (invisibles) à l'œil nu Propriété principale = grossissement = aptitude à fournir une image agrandie de l'objet étudié  jeu de lentilles 2 grands types: - microscopes optiques ou photoniques : utilisent l’énergie lumineuse = faisceau de photons - lumière blanche  microscopie à champ clair - longueur d’onde particulière  microscopie à fluorescence - microscopes électroniques : utilisent un faisceau d’électrons 5  Le principe d'un microscope, quelque soit son type, est de grossir l'image observée à l'aide d'un jeu de lentilles. Le grossissement va dépendre de plusieurs paramètres. Pouvoir séparateur, limite de résolution Distance minimale qui doit séparer 2 points contigus pour qu’ils soient distinguables l’un de l’autre 0,61 l d= n sin (a) n d : pouvoir séparateur l: longueur d’onde n: indice de réfraction du milieu entre l’objectif et l’objet l (1 dans l’air, 1,33 dans l’eau, 1,51 dans l’huile à immersion) a: ouverture numérique de la lentille (angle de demi- ouverture de l’objectif sur l’objet) 6 7 Microscopie en lumière directe (à fond/champ clair) Flux lumineux issu du condenseur traverse l’objet et le flux transmis sert à former l’image Selon intensité de coloration, la lumière sera +/- absorbée et la zone apparaîtra +/- sombre Quand pas d’objet le fond est uniformément clair 8 9 Microscopie droit versus inversé 10 Microscopie droit versus inversé 11  Grossissement / (A)grandissement Grossissement Le grossissement indique le grossissement de l’appareil optique (microscope ou loupe) qui a permis de réaliser l’observation et donc le dessin. Il est obtenu en multipliant les grossissements des éléments de l’appareil optique (objectif, oculaire, etc.). Une préparation microscopique est observée à l’aide d’un microscope possédant un oculaire × 10 et sous l’objectif × 15. Grossissement : × 150 12 https://planet-vie.ens.fr/article/1811/echelles-grossissements-agrandissements  Grossissement / (A)grandissement Agrandissement (ou grandissement) L’agrandissement est le rapport entre la taille du dessin d’observation réalisé et la taille réelle de l’objet. Une coupe de tige de rayon 3 millimètres est dessinée sous la forme d’un dessin où cette tige fait 15 centimètres de rayon. Agrandissement : × 50. 13 https://planet-vie.ens.fr/article/1811/echelles-grossissements-agrandissements  Grossissement / (A)grandissement Échelle L’échelle est une indication de la correspondance entre la taille du dessin et la taille réelle de l’objet. L’échelle est donc une manière différente de noter l’agrandissement. On peut représenter une échelle de deux manières : littérale : « Y cm → Z mm » (avec Y une longueur sur le dessin, Z la longueur réelle correspondante) ; graphique : une barre présente sur le dessin indique une taille précisée. Une coupe de tige de rayon 3 millimètres est dessinée sous la forme d’un dessin où cette tige fait 15 centimètres de rayon. 5 cm → 1 mm ou 10 cm → 2 mm etc… ou une représentation graphique. 14 https://planet-vie.ens.fr/article/1811/echelles-grossissements-agrandissements Calculer l’agrandissement de ces 2 photos 15