Les Groupes Sanguins PDF

Les groupes sanguins I. Introduction Groupes sanguins : ensemble d’antigènes (Ag) allotypiques (Ag communs à TOUS les êtres humains, mais variables selon les individus), présents sur la membrane du globule rouge et génétiquement déterminé. Déterminer un groupe sanguin = déterminer l...

Les groupes sanguins I. Introduction Groupes sanguins : ensemble d’antigènes (Ag) allotypiques (Ag communs à TOUS les êtres humains, mais variables selon les individus), présents sur la membrane du globule rouge et génétiquement déterminé. Déterminer un groupe sanguin = déterminer la présence ou non de certains Ag sur la membrane des GR et sur des nombreux tissus. o 352 antigènes de groupes sanguins pour l’instant (de nouveaux sont découverts chaque jour)  Ils sont regroupés en 38 systèmes (= ensemble d’Ags/ « famille » : les principaux (les plus importants car les plus dangereux en transfusion) sont les systèmes ABO, rhésus (RH) et Kel. Schéma ci-contre : Membrane du GR avec la bicouche phospholipidique, avec des protéines, des lipides, des glucides. Les antigènes sont portés par ces différentes structures des glycoprotéines : - Protéines (pour les rhésus) - Glucides (pour le système ABO) Ces différents systèmes codent pour des antigènes et ces antigènes ont des fonctions : - Les Ag du système ABO codent pour des enzymes qui vont transporter des sucres et les fixer à la surface du GR. - Les Ag du système RH sont portés par des protéines et ont un rôle de transporteur du NH4 => La molécule RH : transporteurs d’anion (transmembranaire) Ne pas apprendre toutes les fonctions, juste retenir que TOUS ces antigènes sont portés par des protéines et des glucides, mais ces glucides et protéines ont eux-mêmes une fonction. Ce sont les motifs antigéniques qui font qu’on parle de systèmes de groupes sanguins. II. Le système ABO A. Découverte C’est le 1er système de groupe sanguin décrit chez l’HOMME par Landsteiner en 1901 : après avoir mélangé les globules rouges ET plasma de tous les chercheurs de son équipe. Il s’est alors rendu compte que toutes les réactions étaient différentes et qu’il y avait des agglutinations entre certaines personnes. B. Généralités Ce système est basé sur la présence ou l’absence des antigènes A et B sur la membrane des GR. Anticorps correspondant à Ag absent de la surface de l’hématie est toujours présent dans le plasma (Ac naturel) Le système ABO comprend 4 groupes sanguins : A, B, AB et O. - Ce système est présent dans TOUS les tissus = peut alors dire qu’il est ubiquitaire ( /!\ SAUF cellules nerveuses, os et cornée) - Ag de nature glucidique donc porté par des glucides à la surface du GB. Répartition dans la population française : A : 45 % / O : 43 % / B : 9 % / AB : 3 % Retenir que A et O sont majoritaires. 1  C. Génétique Les gènes sont portés par le chromosome 9 et de sont de transmission héréditaire. Il existe 3 allèles : A, B et O - A et B sont les allèles CODOMINANTES - O est l’allèle RÉCESSIF Ces 3 versions du gène codent pour des enzymes, qui vont transporter des sucres et les fixer à la surface du globule rouge. Ces enzymes qui vont porter des sucres différents en fonction des allèles A, B ou O, vont apporter les sucres à la surface du globule rouge ce qui va créer l’antigène A et B. - Allèle A « code » pour une enzyme -> Ajout d’une N-acétylgalactosamine sur l’antigène H - Allèle B « code » pour une enzyme -> Ajout d’un galactose sur l’antigène H - Allèle O « code » pour une enzyme INACTIVE donc aucun des deux Explications : Une personne du groupe A, ça veut dire qu’à la surface de ses globules rouges, il y a la présence des antigènes A. Groupe B : surface du globule rouge, présence des antigènes B Groupe AB : présence des antigènes A et B Groupe O : pas d’antigènes à la surface.  On a 6 génotypes possibles qui peuvent donner 4 phénotypes groupes ABO.  Dans la ligne du milieu : 4 groupes sanguins.  6 possibilités au niveau génétiques pour donner ces groupes : Groupe A Groupe B Groupe AB Groupe O → Soit on a les 2 allèles A → 2 allèles B → 1 allèle A et une B : → 2 allèles de type O → codominantes Soit on a 1 allèle A et 1 O (A dominante donc on est quand → 1 allèle B et une O même de groupe A) Exemple : Des individus de groupe sanguin A sont de phénotype A mais peuvent être de génotype AA ou AO. Ainsi deux parents de groupe sanguin A peuvent avoir un enfant de groupe sanguin O s’ils sont de génotype AO D. Anticorps : Généralités Il existe 2 types d’anticorps : les anticorps naturels et les anticorps immuns L’anticorps correspondant à l’antigène absent de la surface de l’hématie est TOUJOURS présent dans le plasma : c’est un anticorps naturel. Pour les systèmes ABO, le système antigène-anticorps marche par PAIRE, c’est- à-dire que : - Si l’on à l’antigène, on n’a PAS l’anticorps - Si on n’a PAS l’antigène, on a forcément l’anticorps. Explications : → Groupe A = antigène A donc dans le sérum il y a l’anticorps anti B. → Groupe B = antigène B donc anticorps anti A dans le sérum → Groupe AB = on a les deux antigènes, donc PAS d’anticorps (on ne peut pas s’immuniser contre soit même) → Groupe O = on n’a pas d’antigène donc anticorps anti A et anti B. Quand on a un groupe sanguin, on doit avoir les deux concordants l’un avec l’autre, à la fois la version globulaire antigénique et la version sérique (= les anticorps présents dans le sang). 2  a. Anticorps naturels Les anticorps naturels sont réguliers (++) = présents de façon PERMANENTE et CONSTANTE dans le plasma/le sérum. Apparition dès les 1ers mois de vie (entre 3 et 6 mois) suite à une stimulation par l’environnement (bactéries…) donc ils sont donc absents chez le nouveau-né.  Le système va rencontrer pendant l’enfance énormément de virus et de bactéries, et il va s’immuniser contre les antigènes qu’il ne connaît pas. Ce sont de nature des Ig M (++): ne passent PAS la barrière foeto-placentaire et ne sont donc PAS dangereux pour la grossesse. Ils sont cependant dangereux pour la transfusion car ils sont directement présents dans le sang /!\ Responsable d’accidents hémolytiques aigus de transfusion Anticorps permanents, prêt à attaquer l’antigène correspondant des globules rouges transfusées !!! (++) Prévention ->Transfuser en ABO compatible On développe les anticorps par mimétisme de structure vis-à-vis des antigènes qu’on ne connaît PAS.  Si mon anticorps est présent, ça veut dire que je n’ai PAS l’antigène. Ils correspondent à l’Ag absent du GR : - Anti-B pour le groupe A - Anti-A pour le groupe B - Anti-A et anti-B pour le groupe O - Pas d’anticorps pour le groupe AB Ainsi, l’anticorps est présent quand l’antigène est absent et inversement. b. Anticorps immuns Ils sont inconstants et irréguliers (fluctuants) Peuvent apparaître après contact avec l’Ag correspondant (après transfusion, grossesse) De nature IgG (++) : peuvent traverser la barrière placentaire). On va les rechercher avec la RAI. Ils sont dangereux car capables de passer la barrière fœto-placentaire (MHNN). Fortement hémolysants : Ils sont dangereux en transfusion de plasma. E. Détermination du groupe sanguin Deux épreuves sont nécessaires pour la détermination du groupe sanguin : - Une épreuve globulaire : déterminer les Ag à la surface du GR - Une épreuve sérique : déterminer les Ac présents dans le plasma 1. Épreuve globulaire : détermination du groupage ABO Objectif : déterminer les Ag présents à la surface des GR 🡪 On mélange les GR du patient avec des anticorps tests. On réalise 4 tests : - GR patient + AC anti-A - GR patient + AC anti-B - GR patient + AC anti-A + anti-B - GR patient + réactif de contrôle (pour vérifier qu’il n’y ait pas de réactions non spécifiques, c’est souvent de l’eau, donc normalement le résultat de ce test est négatif, s’il est positif c’est qu’il y a des interférences, on lave alors les GR et on refait le test)  L’AC est piégé dans un gel de résine sur lequel on ajoute les GR, avant de centrifuger. → S’il y a agglutination (réaction positive) : présence de l’Ag sur le GR du sujet → S’il n’y a PAS d’agglutination (réaction négative) : absence de l’Ag sur le GR du sujet 3 Explications : → Carte avec différents puits, et on piège dans chacun dans un réseau de bille ou de gel des anticorps. Dans le premier il y’a un anticorps anti-A, dans le deuxième un anticorps anti-B, dans le 3 : anticorps anti A et B. → On ajoute les GR du patient dans les puits, on centrifuge la carte - Réaction positive : les anticorps reconnaissent les Ag, cela forme un réseau qui reste à la surface. - Pas de reconnaissance : tout va au fond du puit. Ici, l’antigène A est absent car pas de réaction anticorps antigène, par contre l’antigène B est présent car on a une réaction anticorps antigène dans les deux puits suivants. 2. Épreuve sérique : détermination du groupage ABO Objectif : déterminer les Ac naturels présents dans le plasma (= sérum) du patient. C’est l’épreuve inverse : On prend le plasma du patient et on les met en présence de GR dont on connaît le groupe sanguin. On réalise 3 tests : - Plasma du patient + GR A - Plasma du patient + GR B - Plasma du patient + GR O → S’il y a agglutination (positif) : présence de l’Ac dans le plasma du sujet → S’il n’y a PAS agglutination (négatif) : absence de l’Ac dans le plasma du sujet À la fin on regarde s’il y a concordance entre les 2 épreuves précédentes : On ajoute dans les deux puits le plasma du patient et les globules rouges qu’on connaît. Donc on ajoute des A à gauche et des B à droite, ici on a la présence d’une agglutination pour les GR A donc présence d’anticorps anti A donc patient du groupe B. Les deux épreuves concordent. III. Le système rhésus (RH) A. Généralités Je suis A+ => le – ou le + correspond au premier l'antigène RH1 (D) qui est TOUJOURS déterminer en même temps que le groupe ABOA = « Groupe ABO RH1 »  L’antigène RH1 (ou D) est le + immunogène après les Ags ABO Molécule RH : transporteur d’anion (transmembranaire) - Porte de nombreux antigènes : RH 1, 2, 3, 4, 5, 6,... Système complexe composé de 56 Ag : Fonction de transporteur d’ammonium Les 5 principaux définissent le phénotype RH : (c’est ce qu’on regarde quand on prescrit un groupe sanguin ABO RH Kell). - RH1 = D (le + important) - RH2 = C - RH3 = E - RH4 = c - RH5 = e C’est la nomenclature avec les chiffres qu’il faut retenir car elle est internationale. Celle avec la lettre existe toujours.  Antigène érythrocytaire UNIQUEMENT (= que sur la mbrn des globules rouge) Ces Ag sont portés par 2 protéines (et NON des glucides comme ceux du système ABO) => nature protéique On a un gène code pour RH1, un gène pour les autres (RH2, RH3, RH4, RH5). 4  B. Anticorps du système rhésus Anticorps immuns secondaires à une transfusion ou une grossesse. Il n’y a PAS d’Ac naturel et régulier (PAS d’IgM) car c’est le contraire SEULEMENT des IgG : passe la barrière foeto-placentaire donc dangereux pour la grossesse (MHNN = Maladie Hémolytique du Nouveau-Né) et en transfusion Système très immunogène = RH1 (++) Ils vont être présents de façon inconstante : ils sont secondaires à une transfusion ou à une grossesse quand il y’a une incompatibilité entre le patrimoine du patient et ce qu’on apporte au patient. Car si on ne possède pas un Ag, si on le reçoit on va s’immuniser et créer des Ac -> forcément des Ac immuns On les recherche par la RAI (= Recherche d’agglutinine irrégulière ou anticorps anti érythrocytaires). C’est au cours d’une seconde transfusion ou grossesse que ces anticorps prennent toute leur importance car ils pourront aller immuniser les GR apportés ou ceux au niveau fœtal. C’est à cause de ces AC que l’on peut retrouver des MHNN. C. Antigènes RH1 faibles et partiels Ag faible = MOINS de sites antigéniques à la surface du GR donc FAIBLE intensité. - Mise en évidence difficile in vitro dans les labos, on devra utiliser des AC plus puissants. - Au niveau de la transfusion ça ne change rien, il n’y aura PAS d’immunisation puisqu’on connaît déjà l’Ag. Ag partiel = il manque un morceau de l’Ag. S’il manque un morceau, on va pouvoir s’immuniser contre l’épitope (« morceau ») manquant car si on apporte un Ag partiel le système immunitaire ne va PAS reconnaître la partie manquante. C’est difficile à mettre en évidence, on utilise des AC dirigés contre certaines parties une à une.  Ce système d’Ag partiel peut exister pour tous les Ag différents (RH ++, pas trop pour ABO). Exemple : RH1 se constitue de 9 morceaux, s’il manque un morceau à un patient par anomalie génétique, le 1 par exemple, cela veut dire qu’il à l’Ag RH1 quasiment complet mais il lui manque un morceau. Si on lui apporte un RH1 complet, son système immunitaire va pouvoir s’immuniser contre la partie qui manque donc contre le morceau 1. Quand on fera le groupe sanguin, on dira : il est RH1 (car l’anticorps de dépistage n’est pas forcément dirigé contre toutes les parties de cet Ag) mais s’il manque une partie au patient qui n’est pas reconnue au niveau analytique, on pourra donner à tort du RH1 positif. À la place d’un RH1 partiel. Donc si on lui apporte un Ag complet, il va pouvoir s’immuniser contre cette partie de l’Ag qu’il ne connaît pas D. Détermination du système RH Détermination par une SEULE épreuve : épreuve globulaire (recherche d’Ag à la surface des GR) comme on n’a pas d’AC naturels. - GR du patient + AC anti-RH1 (D) - GR + AC anti-RH2 (C) - GR + AC anti-RH4 (c) - GR + AC anti-RH3 (E) - GR + AC anti-RH5 (e) Il y a alors 2 déterminations sur 2 prélèvements différents. On met les GR du patient, on centrifuge, on regarde si réaction d’agglutination entre nos antigènes du patient et AC de la carte : - Si positif => réseau - Si négatif => les GR vont se retrouver après centrifugation dans la cupule réactionnelle /!\ PAS d’épreuves sériques car PAS d’AC naturels irréguliers dans le sang du patient. 1 seule étape pour déterminer le système RH. 5  IV. Le système Kell 2 Ag principaux : Kel 1 (K) et Kel 2 (k, cellano). Ils sont antithétiques. (si Kel 1 absent, Kel 2 forcément présent, et inversement, et les deux peuvent être présents). Expression restreinte aux GR Ce sont des Ag TRÈS immunogènes (le plus immunogène derrière Ag RH1). C’est le système le + important en transfusion : faut systématiquement respecter l’ABSENCE de K en transfusion Détermination en même temps que le phénotype RH : « Phénotype RH KEL1 » Ils ne possèdent PAS d’Ac naturel ou régulier, ce sont uniquement des Ac immuns de type IgG qui apparaissent au cours de transfusion ou de grossesses.  Ce sont des protéines Il y a plus de 30 systèmes. Pour la plupart des situations, les Ag que l’on a vu suffisent (RH, Kel, ABO), mais pour certains patients, on observe et analyse d’autres Ag, familles de groupes sanguins. - Systèmes MNS, Duffy et JK : phénotype étendu. - C’est pour les patients transfusés régulièrement. (Hématologie, drépanocytose, hémoglobinopathie…) Connaitre une carte d’identité un peu étendue du patient sert à avoir des culots globulaires les plus proches possible du patient, on ne peut pas tous les regarder, mais on fait en fonctions des Ag les plus immunogènes, les plus dangereux en transfusion : ABO, RH, Kel puis MNS, Duffy, KJ. Pour avoir une carte valide, on fait une détermination définitive du phénotype ABO-RH- KEL à partir de 2 épreuves sur 2 prélèvements différents : - Soit à des heures différentes avec le même préleveur - Soit à des heures et préleveurs différents BUT : S’affranchir de tout problème d’usurpation d’identité PAS À APPRENDRE: o Bon : - Étiquette patient (nom, nom de naissance, prénom, date de naissance) - Date et heure du prélèvement - Nom et signature du préleveur obligatoires o Tube : - Étiquette (nom, nom de naissance, prénom, date de naissance) au moment du prélèvement avec identification vérifiée. ⇨ Les tubes pré-étiquetés sont à proscrire et une seule et même personne prélève et identifie les prélèvements. Réaction Coombs Direct/ Test Direct Antiglobuline Recherche à la surface des GR du patient des Ac de type IgG ou la fraction C3d du complément (stigmate de l’Ac IgM) V. Recherche d’anticorps irréguliers anti-érythrocytaire (RAI) o But : - Dépister une immunisation (acquise par transfusion ou par grossesse = développement d’Ac contre des Ag que le corps ne possédait pas avant.) - Dépister les anticorps naturels dangereux o Principe : - Réaction de Coombs indirecte : Sur sérum/plasma du patient + 3 hématies phénotypées (dépistage) - VALIDE pendant 72H - Délai technique de 1h à plusieurs jours,... RAI + : Identification de l’anticorps et comptabilisation des CGR RAI + un jour -> RAI + toujours 6  A. Panel de dépistage → On va s’occuper du sérum du patient (pour rechercher les Ac) en face duquel on met toute une batterie de GR dont on connaît la plupart des Ag des différents systèmes (ABO, RH, Kell). → S’il n’y a PAS de réaction, c’est positif. Épreuve de dépistage : On réalise 3 réactions différentes avec 3 cupules différents contenant potentiellement des Ac. Dans ces 3 réactions on va mettre le sérum du patient, donc les Ac, puis on va mettre la partie antigénique, donc des GR, dont on connaît la carte d’identité, c’est-à-dire TOUS leurs antigènes. Puis on va regarder si les GR s’agglutinent ou non. On note les résultats : - Si pour les 3 GR différents la réaction est négative, on dit que la RAI est négative car statistiquement, avec la représentation des Ag qui sont présents dans ces GR, on considère que les chances qu’il y ait cet Ac sont minces. - Si l’un des 3 est positif, on dit que la RAI est positive. On doit ensuite identifier l’AC en question. On rajoute alors 11 GR supplémentaires. Lorsqu’il s’agit d’AC RARES, cela peut prendre plusieurs jours et nécessiter d’ajouter encore des GR. Pour transfuser quelqu’un, il faut OBLIGATOIREMENT 2 déterminations de groupe et une RAI datant de moins de 72h (étendu à 21j si pas d’épisode immunisant dans les 6 mois précédents). Délai technique du RAI : entre 1h et plusieurs jours. VI. Quand réaliser les analyses Immuno-Hématologique (IH) ? o Groupage/ phénotype ABO Rhésus Kell (= ABO/RH1-2-3-4-5/KKEL1)  Chez TOUT receveur potentiel o Phénotype étendu (FY, JK, MNSs...)  Chez le futur polytransfusé (thalassémies, drépanocytose) et le futur greffé  Chez certains sujets poly-immunisés pour éviter l’impasse transfusionnelle par apparition d’un nouvel Ac (Fya/ Fyb – Jka / Jkb – M/N/S/s) o RAI pré-transfusionnelle OBLIGATOIRE avant toute transfusion ( 3H) donc PRÉVOIR o RAI post-transfusionnelle :  15 jours à 1 mois après la transfusion pour vérifier que le patient receveur ne s’est pas immunisé (RAI positif) contre de nouveaux Ag (ce qui peut provoquer des hémolyses si une nouvelle transfusion est faite dans le futur). 7  VII. Règles de compatibilité o Pour transfuser un patient, il faut disposer de : - 2 déterminations de groupe sanguin ABO, Rhésus, Kell (ABO, RH1-2-3-4-5, KEL1) - 1 résultat de RAI datant de moins de 72H o 2 règles importantes : - Dans la mesure du possible, ne PAS apporter au receveur un Ag qu’il ne possède PAS (cela pourrait provoquer un risque d’immunisation) - Ne PAS apporter un Ag contre lequel le receveur est immunisé /!\ RISQUE D'HÉMOLYSE !!!! Ces règles sont OBLIGATOIRES dans le système ABO !!! (Il y a les Ac naturels réguliers 🡪 directement hémolysant) et recommandé (++) pour les systèmes Rhésus et Kell A. Transfusion de culots globulaires et de plaquettes : règles de compatibilité (Schéma) On ne peut PAS apporter un Ag dont le patient a déjà l’AC, au risque d'immuniser les culots : il faut donc OBLIGATOIREMENT respecter le système ABO ! Concernant le système Rh et Kell : c’est recommandé +++, mais il n’y a PAS d’obligation légale. o O : peut donner à TOUT LE MONDE car PAS d’Ag A ou B à la surface des GR - PAS de risque de faire réagir les AC de la personne transfusée - Mais ne peuvent recevoir des culots que du groupe sanguin O o B : peut donner à des individus de groupe B ou AB - Mais PAS à ceux du groupe O et A (car présence d’AC anti-B dans le sérum qui attaqueraient directement les GR porteurs d’Ag B, ce qui provoquerait une hémolyse) - Peuvent recevoir des culots du groupe sanguin B et O o A : peut donner à des individus de groupe A ou AB - Mais PAS à ceux du groupe O et B - Peuvent recevoir des culots du groupe sanguin A et O o AB : ne peut donner qu’à des individus de groupe AB, car les GR possèdent à leur surface des Ag A et B (et le sérum des autres groupes contient des AC A, ou B, ou les 2)  Mais ils peuvent recevoir des culots des groupes sanguins AB, A, B et O B. Transfusion de plasma o C’est l’INVERSE : - AB : peut donner à TOUT LE MONDE car il ne possède dans son plasma aucun AC (ni anti-A, ni anti- B). - O : ne peut donner qu’à des individus de groupe O car il possède des AC anti-A et anti-B. VIII. Exercices (type concours) Exercice 1 : Dans l’idéal, il faudrait que tout le système Rh et Kell soit négatif, or en pratique cela n’existe pas.  Il faut respecter les négatifs : ne JAMAIS apporter au receveur un Ag qu’il ne possède PAS. Ici, il y a 2 risques (risques relatifs) pour le patient de s’immuniser mais ce n’est pas sûr à 100% : - En RH4 (1 chance sur 10) - En KEL1 (1 chance sur 50) Ce sont les statistiques et les calculs qui déterminent quel culot on donne au patient (en fonction des stocks disponibles, de l’urgence de la situation, de l’âge du patient...). En cas de 2e transfusion, il faudra tenir compte de ces risques d’immunisation RH4 et KEL1. 8 Exercice 2 : ABO : le receveur est AB, donc on peut lui donner un culot de N’IMPORTE QUEL GROUPE ABO. RH : le receveur est RH+1, RH+4, RH+5, donc on peut lui donner indifféremment un culot positif OU négatif pour les rhésus 1, 4 et 5. → Il faudra cependant mettre de préférence du RH-3. KEL : Il faudra de préférence mettre du KEL-1 Exercice 3 : ABO : Receveur de groupe sanguin O, il faut donc OBLIGATOIREMENT donner du O. KEL : Kel-1 donc il faut OBLIGATOIREMENT donner du Kel-1 pour éviter de réactiver les AC (ce qui provoquerait une hémolyse de tout le culot). ⇨ On recherche dans la banque de sang ce qui correspond le mieux. ⇨ En cas d’urgence vitale, on utilise les culots qui sont les + universels possibles (groupe sanguin O, RH-1, RH-2, RH-3 et HEL-1) pour éviter d’immuniser le patient. ⇨ RAI + => on fait une épreuve de comptabilisation Exercice 4 : Respecter le système ABO c’est à dire ici AB donc on peut donner N’IMPORTE QUEL GROUPE Respecter les anticorps Respecter le KELL -3 et KELL - 1 9