Grupos Sanguíneos y Hemoderivados PDF

GRUPOS SANGUÍNEOS Y PRUEBAS DE BANCO DE SANGRE Los hemoderivados se dividen en rojos, plaquetas y plasma, se pueden obtener de sangre total o por aféresis. GRUPOS ERITOCITARIOS -​ Ag de membrana -​ Ac en relación a ese Ag. Clasificación de Ac ​ Cómo se producen: -​ Natur...

GRUPOS SANGUÍNEOS Y PRUEBAS DE BANCO DE SANGRE Los hemoderivados se dividen en rojos, plaquetas y plasma, se pueden obtener de sangre total o por aféresis. GRUPOS ERITOCITARIOS -​ Ag de membrana -​ Ac en relación a ese Ag. Clasificación de Ac ​ Cómo se producen: -​ Naturales, naces con ellos, son Ac frente a un Ag diferente al que tienes. Ej. Sistema ABO. -​ Inmune, aparecen tras un contacto inmunológico(transfusión, embarazo). Ej. Rh. ​ Presencia en la población -​ Regulares. Presente en todas las personas sanas. Únicamente - ABO. -​ Irregulares. No siempre aparecen. Ej. Rh. *ABO Ac naturales regulares Ig G son monoméricas, atraviesan la barrera o membrana placentaria y actúan a 37ºC. (Rh) Ig M son pentámeras y actúan entre 22-4ºC. (ABO) SISTEMA ABO Ag del sistema ABO (Ig M) Los Ag del sistema ABO son A y B, (aunque también existe la sustancia H) y los cuatro grupos de este sistema se establecen según existan en la membrana del eritrocito uno, los dos o ninguno de ellos. La presencia o no de estos Ag en la membrana eritrocitaria viene determinada genéticamente y se hereda según las leyes de Mendel. Estos genes se encuentran en el cromosoma 9 y cada individuo posee 2 alelos, uno de cada progenitor, de tal forma que la relación que existe entre los alelos A y B es de codominancia (si aparecen los 2 en el genotipo se manifiestan ambos fenotípicamente) y entre cualquiera de los alelos A ó B con el O es de dominancia. Además estos genes productores de Ag están relacionados con el sistema Hh: el alelo H es el más frecuente en la población mundial y es dominante y el h, que es un alelo nulo o amorfo (cuando está en estado de homozigosis no codifica nada). Los genotipos Hh y HH son capaces de sintetizar una enzima que permite la formación de la sustancia H. -​ gen A + sustancia H = forma una sustancia A -​ gen B + sustancia H = forma una sustancia B -​ 0 + sustancia H = No se altera la sustancia H -​ genotipo hh - 0 Bombay no tiene Ag de membrana no tiene H precursora. Solo puede donar otro 0 Bombay. Incidencia muy baja en la población. No toda la sustancia H se transforma en A ó B, por lo que siempre encontramos sustancia H en los hematíes. Sin embargo, es un Ac débil que tiene poca significación clínica. El gen A tiene, a su vez, 2 alelos: A1 y A2, de forma que aproximadamente el 80% de la población del grupo A presenta el alelo A1 y el 20% A2. La variación se establece en la estructura de la sustancia que determina, y da lugar a especificidades antigénicas distintas. Algunos A2 pueden tener anti-A1, no invalida la transfusión. Los Ac del sistema ABO son todos regulares a excepción de Anti-A1 producido por el A2. 1 Sistema secretor Existe un gen secretor (Se), con 2 alelos, que da lugar a que aparezcan en las secreciones corporales los mismos Ag del sistema ABO de los eritrocitos. Los individuos con genotipo SeSe presentarán estos Ag en las secreciones y los sese (gen nulo) no los tendrán. Esto es importante cuando la determinación celular y sérica del sistema ABO no es concluyente. Determinación de los grupos ABO (Técnica de hemaglutinación directa) ​ Determinación celular (Ag de membrana) -​ Muestra: Sangre total (suspensión de hematíes lavados) -​ Reactivos: Anti-A, Anti-B, Anti-A1, Anti-H. ​ Determinación sérica (Ac, solo se realiza en ABO porque son regulares) -​ Muestra: plasma (EDTA) o suero inactivado (inactivación de complemento 54ºC, 30 min) -​ Reactivo (suspensión de hematíes lavados y tipados): Cél A1 (puede haber aglutinación si presenta A2), células B, Células 0 (control negativo) y células de paciente para descartar anemia hemolítica autoinmune. Variaciones de los Ag ABO -​ Variaciones debidas a la existencia de alelos pocos frecuentes → fenotipos débiles (no son suficientemente aglutinógenos) -​ Variaciones debidas al medio → hemopatías malignas, agentes infecciosos ( E.coli). Modificación temporal. El genotipo del sistema ABO codifica para una enzima transferasa que modifica la sustancia H SISTEMA Rh El Rh es un sistema complejo formado por 3 locis Dd Cc Ee. El genotipo codifica directamente para el fenotipo asociados. ​ D es dominante sobre d. Marca si el Rh es + o -. -​ Dd y DD se expresan como D → Rh + -​ dd, nulo no codifica para nada → Rh - ​ Cc y Ee la relación entre sus alelos es de dominancia, se expresan ambos. Determinación del fenotipo de Rh La determinación del grupo Rh, es una determinación celular, ya que es irregular y se realiza mediante una hemaglutinación. -​ Muestra: Sangre total o suspensión de hematíes lavados. -​ Reactivos: Ejemplo: Genotipo dd Cc̄ ee / Fenotipo dCc̄e -​ Anti D -​ Anti C + -​ Anti c̄ + -​ Anti E -​ Anti e + 2 Compleja del sistema Rh Variabilidad de los Ag: ​ Locus D débil. Determinación Técnica: Coombs indirecto Muestra: Suspensión de hematíes lavados Reactivos: -​ Anti D -​ SFI -​ SAG o suero de Coombs Procedimiento 1.​ Suspensión de hematíes + Anti D 2.​ Lavar con SFI para retirar los Anti-D no unidos. 3.​ Añadir el suero de Coomb -​ No aglutina Rh - -​ Aglutina Rh + variante DU (D débil) ​ Ag D parciales (no se detectan a priori). Existen individuos, aparentemente D positivos, a los que le falta alguna parte del Ag, y por lo tanto pueden inmunizarse contra la parte ausente. El Ac reaccionará con los eritrocitos de los Rh positivos completos, pero no con los suyos, dando la falsa impresión de un auto Ac anti-D en un sujeto Rh positivo. Ac del sistema Rh -​ Los Ac son inmunes, irregulares y de tipo Ig G. -​ El Ag D es el más inmunógeno, con mayor relevancia. -​ Más frecuentes anti-D, anti-c, anti-E, anti-e y anti-C -​ Producen R.H.P (reacción hemolítica postransfusional) y E.H.R.N (enfermedad hemolítica del recién nacido) SISTEMA Kell Se determina en la sangre del donante, pero no en el receptor. Los Ag más conocidos son KK (0.2% de la población) y k (Cellano) (99.8 %) → los más inmunógenos, mayor posibilidad de generar Ac. Los Ag inducen una respuesta humoral → Producción de Ac. Ac anti-Kell presentes imposibilitan la transfusión. SISTEMA DUFFY Fy gen no silencioso, protección frente a Plasmodium. Causa poco frecuente de incompatibilidad transfusional pero sí que pueden producir R.H.P y EHRN (en bajo grado) - escaso poder inmunógeno de sus Ag. SISTEMA LUTHERAN Poco interés transfusional. Los anti-Lub son muy raros pero pueden provocar R.H.P y una leve EHRN. Los anti-Lua son menos raros pero no frecuentes, aglutinan en medio salino (IgM) a títulos bajos, pero no provocan ni R.H.P ni EHRN. SISTEMA KIDD Puede provocar reacción hemolítica postranscripcional. 3 SISTEMA MNSs Los Ac son irregulares, naturales o inmunes. SISTEMA LEWIS Este sistema no es propiamente eritrocitario, porque los Ag no son sintetizados por los precursores, sino que los adquieren directamente del plasma. Pueden ser neutrales o inmunes. SISTEMA Ii El interés de estos Ags no es tanto transfusional, sino que la presencia de i en adultos va asociado a hemopatías malignas. Los anti-i son auto Ac (IgM aglutininas frías) y su hallazgo es menos habitual. Asociados a enfermedades autoinmunes, son autoanticuerpos. SISTEMA P Existen individuos con el gen silencioso que no codifican para estos Ag. Los Ac producidos por los individuos p se denominan anti-Tja, son IgG, hemolíticos y muy peligrosos en las transfusiones (R.H.P). También se han descrito casos de EHRN. DETECCIÓN DE AC IRREGULARES Técnica: Coombs indirecto Muestra: Suero inactivado o plasma (EDTA) Reactivos: Panel de eritrocitos tipados (Sin 0, y otros Ag de otros sistemas), SSF y suero de Coombs. Procedimiento: 1.​ Colocar una gota de suspensión globular en un tubo. 2.​ Colocar dos gotas de suero en estudio 3.​ Centrifugar y leer 4.​ Incubar a 37ºC 30 minutos 5.​ Centrifugar y leer 6.​ Lavar tres veces con solución fisiológica 7.​ Agregar dos gotas de suero de Coombs 8.​ Centrifugar y leer Interpretación de los resultados: se descargan la presencia de Ac en los tubos en los que no hay aglutinación. Consecuencia por la presencia de Ac irregulares: si hay presencia de Ac irregulares no se puede usar para donación. Para el receptor la presencia de Ac irregulares, los eritrocitos que reciban NO deben presentar esos Ag. PRUEBAS PRE-TRANSFUSIONALES (Donante y receptor) ​ ABO -​ Determinación celular -​ Determinación sérica ​ Rh -​ Fenotipo completo -​ Determinación del DU ​ Determinación de Ac irregulares. Si el plasma de donante presenta Ac irregulares, no se puede usar para donación. Industria farmacéutica ​ Determinación de otros sistemas eritrocitarios (Solo donante) 4  ​ Pruebas cruzadas. -​ Prueba cruzada mayor → Mezcla los eritrocitos del donante con suero o plasma del receptor. -​ Prueba cruzada menor → Mezcla eritrocitos del receptor con el plasma del paciente. Técnica en gel - Aglutinación en la banda superior + GRUPOS PLAQUETARIOS En las plaquetas al igual que en los eritrocitos podemos encontrar diferentes Ag y por consiguiente una respuesta inmunitaria. -​ Algunos de éstos Ag son compartidos con otros sistemas presentes en células y tejidos, otros sin embargo son Ag específicos de las plaquetas y se denominan HPA (Human Platelet Antigens). -​ Actualmente existen 6 sistemas HPA definidos con Ag de alta frecuencia (a) y de baja frecuencia (b). HPA-1, HPA-2, HPA-3, HPA-4, HPA-5 Y HPA-15- Los Ag plaquetarios HPA, son los principales causantes de la trombocitopenia fetal/neonatal aloinmune (TFNA) y de la púrpura postransfusional (PPT), en cambio su importancia es menor en la refractariedad y en la aparición de cuadros febriles tras la transfusión. -​ Los HLA son los Ag de histocompatibilidad más importantes en humanos. -​ Los Ag HLA son los principales responsables de la refractariedad plaquetaria, es decir, la falta de rendimiento plaquetario después de transfusiones plaquetarias ABO compatibles. Los grupos plaquetarios son importantes en la donaciones de plaquetas y en la observación de trombopenias En la transfusión de plaquetas no es necesario mantener la compatibilidad del sistema ABO, en cambio si se tiene en cuenta el Rh, sobre todo en mujeres. REACCIONES TRANSFUSIONALES Las reacciones transfusionales o postransfusionales pueden ser: a. Inmediatas - En el momento de la transfusión o tras 24h. 1.​ Inmunes (Ag-Ac): -​ Reacciones febriles no hemolíticas (Ac anti leucocitos y anti plaquetas) -​ Reacción hemolítica aguda eritrocitaria: el caso más grave es por la incompatibilidad -​ ABO por hemólisis intravascular con liberación de enzimas vasoactivas → colapso cardiopulmonar. Casos menos graves por hemólisis extravascular (Rh y otros grupos eritrocitarios) -​ Destrucción aguda plaquetaria -​ Reacciones alérgicas: caso más grave → déficit de IgA 2.​ No inmunes (No hay Ac mediando la reacción): -​ Reacciones febriles por pirógenos o citoquinas -​ Reacción hemolítica de causa no inmune -​ Contaminación bacteriana en el proceso (Más susceptibles PLAQUETAS) -​ Sobrecarga circulatoria -​ Alteraciones metabólicas por transfusión masiva ( más de 10 bolsas en 24 horas) -​ Reacción hipotensiva -​ Embolia producida por burbujas de aire 5 b. Retardadas: 1.​ Inmunes: -​ Reacción hemolítica retardada -​ Púrpura post-transfusional -​ Reacción transfusional del injerto contra el huésped 2.​ No inmunes: -​ Transmisión de enfermedades infecciosas: VHB, VHC, VIH, CMV, EBV, Treponema pallidum, Plasmodium -​ hemosiderosis HEMOCOMPONENTES *Citaféresis hace referencia a las células y por tanto a la plaquetaféresis y a la eritroféresis. SANGRE TOTAL Se usan cuando se produce una gran pérdida de sangre. Las bolsas contienen anticoagulante + conservante. CPD → 21 días CPD-A ó CPD-SAG-manitol → 35 días Otros a 42 días Indicaciones: Sólo en situaciones de déficit de g.r + Déficit de volumen plasmático. Hemocomponentes Extracción de hemocomponentes a partir de sangre total : -​ Antes de las 6 h ó algo más sí → 20°C (butanodiol) 1. Filtrado 2. Centrifugación 3. Prensado de las bolsas Bolsa madre - recoge sangre → Filtro - elimina leucos en su mayoría y posibles coágulos → Centrifugar - separación por bolsa → Prensar 6 HEMATÍES ​ Concentrado de hematíes -​ Separación del plasma - centrifugación -​ Contiene parte de leucocitos y plaquetas (puede) -​ Debe contener 45 g de Hb -​ A 4 °C→ 35 días de conservación -​ Indicaciones: Reposición de hematíes y anemias -​ Contraindicaciones: Aloinmunización frente a -​ Ag leucocitarios e intolerancia al plasma ​ Hematíes BCR -​ Se elimina parte del plasma y capa leucoplaquetaria -​ Contraindicaciones: Intolerancia al plasma -​ Uso en pacientes que han recibido alguna transfusión y no han presentado intolerancia al plasma ​ Hematíes leucodepleccionados -​ Se eliminan la mayoría de leucocitos -​ Indicaciones: pacientes con Ac- anti leucocitarios, pacientes con necesidad de cte de transfusión y prevenir transmisión de CMV (citomegalovirus) -​ Contraindicaciones: Intolerancia al plasma ​ Hematíes AS (solución aditiva o nutritiva) -​ Hematíes + leucocitos + plaquetas -​ Se añade solución nutritiva → 42 días ​ Hematíes AS-BCR -​ Hematíes pobre en leucocitos y plaquetas -​ Se añade solución nutritiva → 42 días ​ Hematíes lavados - El lavado se realiza justo antes de ser usados -​ Separación de plasma y lavado con solución isotónica -​ Si se realiza a 4°C → 24 h máximo -​ Si se realiza a Tª ambiente → 6 h máximo -​ Indicaciones: en paciente que tienen Ac anti-IgA ó han mostrado reacciones alérgicas ​ Hematíes congelados - Donaciones autólogas -​ Congelar en un plazo de 7 días desde extracción -​ Añadir crioprotector (glicerol, hidroxi-etil-almidón) -​ Pueden durar 10 años e incluso 21 -​ Tras descongelación → lavado (para eliminar crioprotector) → 4 °C hasta 24 h ​ Neocitos -​ Hematíes relativamente jóvenes → aptos para pacientes que necesitan transfusiones periódicas PLASMA ​ Plasma fresco congelado -​ Debe contener niveles normales de albúmina, Ig y factores de la coagulación -​ La obtención del plasma à entre 6 y 18 h después de la extracción -​ Congelación completa → 1 h 7  -​ Indicaciones: alteraciones de coagulación (que se pueden compensar), PTT (púrpura trombótica trombocitopénica), quemados y materia prima para fraccionamiento (industria) -​ Contraindicaciones: intolerancia al plasma, grupo no compatible y contagio de enf. Virales (plasma es vehículo de enfermedades virales -​ Para prevenir contagios: inactivación (proceso fisicos y quimicos de descontaminacion) y cuarentena Plasma congelado se centrifuga: ​ Crioprecipitado (Precipitado) *Factores de coagulación -​ Fracción crioglobulínica del plasma -​ Contiene: F. VIII-C, F. Von Willebrand, FNG(fibrinógeno), F. XIII y Fibronectina -​ Indicaciones: C.I.D (coagulación intravascular diseminada), defectos de FNG (tanto cualitativos como cuantitativos) y carencia de F. VIII ​ Plasma deplecionado (sobrenadante) -​ Plasma - (menos) crioprecipitado -​ Indicaciones: PTT y pacientes que requieren compensar el volumen plasmático PLAQUETAS ​ Plaquetas * Mayor probabilidad de contaminación -​ Para 1 unidad estándar → ≈ 5 unidades de sangre total -​ Preparación: A partir de PRP (Plasma rico en plaquetas) A partir de BC (buffer-coat) -​ Almacenamiento → 20 – 24°C, en agitación (evitar agregados), disponibilidad de O2 y no + de 5 días -​ Indicaciones: trombocitopenia grave, pacientes oncológicos -​ Contraindicaciones: no donar Rh+ a niñas y mujeres Rh- en edad fértil ​ Plaquetas congeladas -​ Crioprotector: glicerol a baja concentración o DMSO -​ Tras descongelación → lavado, suspensión en plasma y utilizar inmediatamente -​ Indicaciones: previsión de transfusión autóloga AFÉRESIS ​ Hematíes. Se obtiene la misma cantidad que con 2 unidades de s.t ​ Plasma. Unidad estándar equivale a 3 unidades de s.t ​ Plaquetas. Unidad estándar equivale a 5 ó + unidades de s.t ​ Granulocitos. (solo en aféresis) -​ Debe ser sometidos a radiación ionizante -​ No debe ser almacenado + de 24 h -​ Neutropenia severa y sepsis ​ CPH. Deben conservarse congeladas entre – 80 y -196°C 8