Podcast
Questions and Answers
Con independencia del tipo de muestra utilizada para la extracción, es una técnica
minuciosa, que involucra lisis de la célula ...:
Con independencia del tipo de muestra utilizada para la extracción, es una técnica minuciosa, que involucra lisis de la célula ...:
En la extracción del ARN debe considerarse:
En la extracción del ARN debe considerarse:
Durante la lisis celular se procede a la destrucción de las estructuras formadas por
lípidos y proteínas permitiendo la liberación de los ácidos nucleicos del núcleo
celular. La disgregación del tejido y su homogeneización se llevan a cabo en un
buffer de lisis ...:
Durante la lisis celular se procede a la destrucción de las estructuras formadas por lípidos y proteínas permitiendo la liberación de los ácidos nucleicos del núcleo celular. La disgregación del tejido y su homogeneización se llevan a cabo en un buffer de lisis ...:
Tras la lisis celular y la eliminación de las proteínas de la muestra, se precipitan los
ácidos nucleicos añadiendo................................. . Este método permite la obtención de
ADN de gran pureza y presenta la ventaja de que las soluciones utilizadas son muy
seguras para la salud del personal técnico que realiza la extracción:
Tras la lisis celular y la eliminación de las proteínas de la muestra, se precipitan los ácidos nucleicos añadiendo................................. . Este método permite la obtención de ADN de gran pureza y presenta la ventaja de que las soluciones utilizadas son muy seguras para la salud del personal técnico que realiza la extracción:
Signup and view all the answers
En la extracción de ácidos nucleicos que involucra solventes orgánicos, una vez que
estos últimos son añadidos se forman dos fases según el dibujo de arriba ... :
En la extracción de ácidos nucleicos que involucra solventes orgánicos, una vez que estos últimos son añadidos se forman dos fases según el dibujo de arriba ... :
Signup and view all the answers
Para facilitar la precipitación también suelen añadirse cationes monovalentes... :
Para facilitar la precipitación también suelen añadirse cationes monovalentes... :
Signup and view all the answers
Señale la incorrecta:
Señale la incorrecta:
Signup and view all the answers
La relación de las absorbancias .............................................. permite conocer si el ADN
obtenido está contaminado por la presencia de compuestos aromáticos:
La relación de las absorbancias .............................................. permite conocer si el ADN obtenido está contaminado por la presencia de compuestos aromáticos:
Signup and view all the answers
Esta relación anterior es muy estable y en general se considera que el ADN es de
calidad óptima cuando la relación anterior es mayor de:
Esta relación anterior es muy estable y en general se considera que el ADN es de calidad óptima cuando la relación anterior es mayor de:
Signup and view all the answers
Cuándo se considera que la muestra está contaminada por proteínas o fenoles:
Cuándo se considera que la muestra está contaminada por proteínas o fenoles:
Signup and view all the answers
Señale la falsa respecto a la integridad del ADN. :
Señale la falsa respecto a la integridad del ADN. :
Signup and view all the answers
Extracción de ADN genómico mediante precipitación por sales, un reactivo indicado
no es necesario:
Extracción de ADN genómico mediante precipitación por sales, un reactivo indicado no es necesario:
Signup and view all the answers
Extracción de ADN genómico mediante método de extracción de ADN con solventes
orgánicos, se emplean habitualmente:
Extracción de ADN genómico mediante método de extracción de ADN con solventes orgánicos, se emplean habitualmente:
Signup and view all the answers
El principio de extracción en columna de sílice se basa en la capacidad de adsorción
de los ácidos nucleicos en una columna de sílice ante la presencia de altas
concentraciones de sales caotrópicas, entre ellas se encuentran:
El principio de extracción en columna de sílice se basa en la capacidad de adsorción de los ácidos nucleicos en una columna de sílice ante la presencia de altas concentraciones de sales caotrópicas, entre ellas se encuentran:
Signup and view all the answers
Los contaminantes de la muestra, en la extracción en columna de sílice, son
eliminados con posteriores lavados de la columna y finalmente el ADN es eluído
con H20 o un tampón de resuspensión ...:
Los contaminantes de la muestra, en la extracción en columna de sílice, son eliminados con posteriores lavados de la columna y finalmente el ADN es eluído con H20 o un tampón de resuspensión ...:
Signup and view all the answers
Método de purificación por unión a microesferas magnéticas, señale la correcta:
Método de purificación por unión a microesferas magnéticas, señale la correcta:
Signup and view all the answers
En la metodología anterior, el rendimiento obtenido para muestras de sangre total se
sitúa en un rango de entre ................................... ADN/ ml de sangre:
En la metodología anterior, el rendimiento obtenido para muestras de sangre total se sitúa en un rango de entre ................................... ADN/ ml de sangre:
Signup and view all the answers
En la extracción de ARN, la resina consiste en cuentas de sílica con superficie
hidrofílica con tamaño de partícula reducido, hechas con cantidades elevadas de
grupos dietilaminoetil (DEAE). La purificación se basa en la interacción de estos
grupos DEAE cargados ...:
En la extracción de ARN, la resina consiste en cuentas de sílica con superficie hidrofílica con tamaño de partícula reducido, hechas con cantidades elevadas de grupos dietilaminoetil (DEAE). La purificación se basa en la interacción de estos grupos DEAE cargados ...:
Signup and view all the answers
Es muy importante tomar precauciones para evitar la contaminación con ARNsas
exógenas, por ejemplo, tratar el agua y soluciones salinas con inhibidores de
ARNsas, como el DEPC al ....:
Es muy importante tomar precauciones para evitar la contaminación con ARNsas exógenas, por ejemplo, tratar el agua y soluciones salinas con inhibidores de ARNsas, como el DEPC al ....:
Signup and view all the answers
posteriormente el ARN ea purificado a partir de la fase acuosa mediante precipitación a baja temperatura con isopropanol- centrifugación....simililar como se hace con ADN
posteriormente el ARN ea purificado a partir de la fase acuosa mediante precipitación a baja temperatura con isopropanol- centrifugación....simililar como se hace con ADN
Signup and view all the answers
La Cromatografía por exclusión de tamaño se fundamenta en la separación de
ácidos nucleicos de acuerdo con su peso molecular, empleando una columna
empaquetada con una matriz de gel conformada por partículas poliméricas orgánicas
o de sílice; ambos materiales, mecánica y químicamente estables y con un contenido
bajo en grupos iónicos, originan una red de poros hidrofílicos uniformes. Indique la
falsa:
La Cromatografía por exclusión de tamaño se fundamenta en la separación de ácidos nucleicos de acuerdo con su peso molecular, empleando una columna empaquetada con una matriz de gel conformada por partículas poliméricas orgánicas o de sílice; ambos materiales, mecánica y químicamente estables y con un contenido bajo en grupos iónicos, originan una red de poros hidrofílicos uniformes. Indique la falsa:
Signup and view all the answers
Una técnica muy empleada en la purificación de AANN es la extracción por
gradientes de densidad de:
Una técnica muy empleada en la purificación de AANN es la extracción por gradientes de densidad de:
Signup and view all the answers
Teniendo en cuenta que cada molécula absorbe la luz a una longitud de onda
específica (los ácidos nucleicos a ........................... nm), es posible calcular su
concentración en una muestra:
Teniendo en cuenta que cada molécula absorbe la luz a una longitud de onda específica (los ácidos nucleicos a ........................... nm), es posible calcular su concentración en una muestra:
Signup and view all the answers
Con arreglo a la ley de Lambert-Beer, existe una relación lineal entre la absorbancia
A y la concentración de la molécula de AANN, conforme a la siguiente ecuación:
Con arreglo a la ley de Lambert-Beer, existe una relación lineal entre la absorbancia A y la concentración de la molécula de AANN, conforme a la siguiente ecuación:
Signup and view all the answers
Se mide la absorbancia de la muestra con un aparato llamado espectrofotómetro. El
aparato funciona conforme a un principio sencillo: se irradia una muestra con una
radiación luminosa de longitud de onda conocida y se mide la energía luminosa
.
.................................. con una célula fotoeléctrica situada detrás de la muestra:
Se mide la absorbancia de la muestra con un aparato llamado espectrofotómetro. El aparato funciona conforme a un principio sencillo: se irradia una muestra con una radiación luminosa de longitud de onda conocida y se mide la energía luminosa . .................................. con una célula fotoeléctrica situada detrás de la muestra:
Signup and view all the answers
Indique la falsa:
Indique la falsa:
Signup and view all the answers
Se dispone de un stock de ADN, y usted lo diluye serialmente en una solución
buffer de fosfato de sodio dibásico a pH 5,2. El stock original es de 300 uM de ADN,
y se diluye primeramente 1:20, y posteriormente de la solución así obtenida, se
toman 10 uL y se mezclan con 90 uL frescos del buffer indicado, qué concentración
final de ADN tenemos? b (300/20 = 15 uM. Después se toman de la solución de 15
uM 10 uL en 100 uL totales (10+90), es decir se diluye 1/10, así que finalmente
tenemos 15/10 = 1,5 uM ADN)
Se dispone de un stock de ADN, y usted lo diluye serialmente en una solución buffer de fosfato de sodio dibásico a pH 5,2. El stock original es de 300 uM de ADN, y se diluye primeramente 1:20, y posteriormente de la solución así obtenida, se toman 10 uL y se mezclan con 90 uL frescos del buffer indicado, qué concentración final de ADN tenemos? b (300/20 = 15 uM. Después se toman de la solución de 15 uM 10 uL en 100 uL totales (10+90), es decir se diluye 1/10, así que finalmente tenemos 15/10 = 1,5 uM ADN)
Signup and view all the answers
El índice que indica contaminación por fenol es:
El índice que indica contaminación por fenol es:
Signup and view all the answers
Señale la incorrecta acerca de la fluorimetría:
Señale la incorrecta acerca de la fluorimetría:
Signup and view all the answers
Para la cuantificación de ARN, se realiza un pretratamiento con ADNsas, y suele
emplearse RiboGreen, un colorante que absorbe a ...:
Para la cuantificación de ARN, se realiza un pretratamiento con ADNsas, y suele emplearse RiboGreen, un colorante que absorbe a ...:
Signup and view all the answers
En la figura anterior se considera que la muestra de ADN íntegra es:
En la figura anterior se considera que la muestra de ADN íntegra es:
Signup and view all the answers
En la figura anterior, se considera que la muestra de ARN íntegra es:
En la figura anterior, se considera que la muestra de ARN íntegra es:
Signup and view all the answers
En este caso en lugar de ser un material poroso lo que dificulta la movilidad de los
ácidos nucleicos es una corriente de cargas que arrastra la muestra o fuerza
electroendosmótica, hablamos de la técnica ....:
En este caso en lugar de ser un material poroso lo que dificulta la movilidad de los ácidos nucleicos es una corriente de cargas que arrastra la muestra o fuerza electroendosmótica, hablamos de la técnica ....:
Signup and view all the answers
Los plásmidos son moléculas de....:
Los plásmidos son moléculas de....:
Signup and view all the answers
Un tamaño clásico y aproximado, como ejemplo, en un plásmido es:
Un tamaño clásico y aproximado, como ejemplo, en un plásmido es:
Signup and view all the answers
Existen muchos plásmidos disponibles para usar con este fin y la mayoría contienen
al menos los siguientes elementos:
Existen muchos plásmidos disponibles para usar con este fin y la mayoría contienen al menos los siguientes elementos:
Signup and view all the answers
En la purificación de ADN plasmídico, qué solución se emplea:
En la purificación de ADN plasmídico, qué solución se emplea:
Signup and view all the answers
Para el estudio del plásmido purificado, se emplea electroforesis en gel de agarosa
al.....:
Para el estudio del plásmido purificado, se emplea electroforesis en gel de agarosa al.....:
Signup and view all the answers
Las células se someten a un tratamiento para ser transformadas por AFN presente en
el medio externo, las células así tratadas reciben el nombre de:
Las células se someten a un tratamiento para ser transformadas por AFN presente en el medio externo, las células así tratadas reciben el nombre de:
Signup and view all the answers
¿Qué son las endonucleasas de restricción?
¿Qué son las endonucleasas de restricción?
Signup and view all the answers
En el procedimiento de digestión con endonucleasas de restricción, se añade la
mezcla enzimática ....:
En el procedimiento de digestión con endonucleasas de restricción, se añade la mezcla enzimática ....:
Signup and view all the answers
Study Notes
Técnicas de Extracción de Ácidos Nucleicos
- La extracción de ácidos nucleicos es una técnica minuciosa que involucra lisis de célula y liberación de los ácidos nucleicos del núcleo celular.
- Durante la lisis celular, se destruyen las estructuras formadas por lípidos y proteínas, permitiendo la liberación de los ácidos nucleicos.
Lisis Celular y Precipitación de Ácidos Nucleicos
- La disgregación del tejido y su homogeneización se llevan a cabo en un buffer de lisis.
- Tras la lisis celular y la eliminación de las proteínas de la muestra, se precipitan los ácidos nucleicos añadiendo un reactivo.
Precipitación con Solventes Orgánicos
- En la extracción de ácidos nucleicos que involucra solventes orgánicos, se forman dos fases y se precipitan los ácidos nucleicos.
- Para facilitar la precipitación, también suelen añadirse cationes monovalentes.
Calidad del ADN
- La relación de las absorbancias permite conocer si el ADN obtenido está contaminado por la presencia de compuestos aromáticos.
- La relación anterior es muy estable y en general se considera que el ADN es de calidad óptima cuando la relación es mayor de 1,8.
Extracción de ADN Genómico
- La extracción de ADN genómico mediante precipitación por sales no requiere un reactivo indicado.
- La extracción de ADN genómico mediante método de extracción de ADN con solventes orgánicos se emplea habitualmente.
Extracción en Columna de Sílice
- El principio de extracción en columna de sílice se basa en la capacidad de adsorción de los ácidos nucleicos en una columna de sílice ante la presencia de altas concentraciones de sales caotrópicas.
- Los contaminantes de la muestra son eliminados con posteriores lavados de la columna y finalmente el ADN es eluído con H2O o un tampón de resuspensión.
Métodos de Purificación
- La purificación por unión a microesferas magnéticas permite la obtención de ADN de gran pureza.
- La Cromatografía por exclusión de tamaño se fundamenta en la separación de ácidos nucleicos según su peso molecular, empleando una columna empaquetada con una matriz de gel.
Extracción de ARN
- En la extracción de ARN, la resina consiste en cuentas de sílica con superficie hidrofílica con tamaño de partícula reducido, hechas con cantidades elevadas de grupos dietilaminoetil (DEAE).
- Es muy importante tomar precauciones para evitar la contaminación con ARNsas exógenas, por ejemplo, tratar el agua y soluciones salinas con inhibidores de ARNsas, como el DEPC.
Cuantificación de ADN y ARN
- La concentración de ADN y ARN se puede calcular mediante la medición de la absorbancia a una longitud de onda específica (260 nm).
- La ley de Lambert-Beer establece una relación lineal entre la absorbancia A y la concentración de la molécula de ADN o ARN.
Studying That Suits You
Use AI to generate personalized quizzes and flashcards to suit your learning preferences.
Description
Este cuestionario pone a prueba tu conocimiento sobre la técnica de extracción de muestras, que implica procesos como purificación, precipitación, lavado y disolución. Debes seleccionar la secuencia correcta de pasos involucrados en esta técnica.
