40 Questions
¿Qué tipo de compuestos se emplean en los fluoroinmunoensayos como marcadores?
Marcadores fluorescentes
¿Cuál es un ejemplo de compuesto fluorescente que puede ser usado como marcador en un fluoroinmunoensayo?
La Fluoresceína
¿En qué tipo de análisis la reacción antígeno-anticuerpo altera considerablemente las propiedades fluorescentes del marcador usado?
Fluoroinmunoensayos homogéneos
¿Qué no se requiere en los fluoroinmunoensayos homogéneos una vez se ha producido la reacción inmunológica?
Separación de la fracción ligada y de la fracción libre
¿Qué tipo de modalidades han aparecido a lo largo del tiempo en los fluoroinmunoensayos homogéneos?
Variantes competitivas
¿Para qué se desarrollaron las variantes competitivas de los fluoroinmunoensayos homogéneos?
Para medir compuestos de bajo peso molecular
¿Qué tipo de sustancias se pueden medir con las variantes competitivas de los fluoroinmunoensayos homogéneos?
Fármacos y hormonas derivadas de aminoácidos
¿Qué técnica tiene un límite de detección entre 0,2-0,4 nanogramos/mililitro?
Técnica de radioinmunoanálisis (RIA)
¿En qué consiste la técnica de inmunocromatografía?
Separación por la distribución diferente entre una fase móvil y una fase estacionaria
¿Qué método se emplea para detectar la reacción antígeno-anticuerpo específica en la técnica de Western Blot?
Sondas marcadas radiactivamente
¿Cuál es la función principal de la fase móvil en la cromatografía?
Transportar al espécimen a lo largo de una capa o columna que contiene la fase estacionaria
¿Qué tipo de cromatografía emplea una fase móvil gaseosa y una fase estacionaria líquida?
Cromatografía de gas-líquido
¿Cuál es la principal ventaja de la técnica de radioinmunoanálisis (RIA) en comparación con FIA y CLIA?
Menor tiempo para la detección de la señal
¿Qué se emplea para cuantificar la presencia de pequeñas cantidades de un determinado antígeno o anticuerpo en una muestra biológica en la técnica de RIA?
Inhibición competitiva de la unión de un antígeno marcado radiactivamente con su anticuerpo específico
¿Qué tipo de interferencia puede provocar la unión de una sonda fluorescente a las proteínas del suero en un fluoroinmunoensayo heterogéneo?
Extinción de la fluorescencia
¿Qué tipo de técnica utiliza sondas especiales con fluorescencia tardía para aumentar la sensibilidad?
Fluoroinmunoensayo de absorción tardía
¿Qué tipo de ensayo emplea esteres de acridinio como marcadores que reaccionan oxidativamente para producir quimioluminiscencia?
Ensayo quimioluminiscente usando esteres de acridinio como marcadores
¿Cuál es una de las ventajas del ensayo quimioluminiscente usando esteres de acridinio como marcadores?
Alta sensibilidad
¿Qué tipo de moléculas se emplean para generar quimioluminiscencia en los inmunoensayos quimioluminiscentes?
Derivados del luminol, esteres de acridino, piridopiridacinas, dioxetanos
¿Qué tipo de técnica utiliza un instrumental especial acompañado de sondas especiales que consiguen aumentar la sensibilidad?
Fluoroinmunoensayo de absorción tardía
¿Qué tipo de compuestos se requieren para que los derivados del luminol produzcan luz en los inmunoensayos quimioluminiscentes?
Radicales –OH como iniciador químico, H y O
¿Qué función cumple el anticuerpo secundario en el Western Blot?
Visualizar el lugar donde se formaron los complejos Antígeno buscado - Anticuerpo primario.
¿Cuál es un método común de bloqueo utilizado en el Western Blot?
Solución de leche desnatada.
¿Qué puede causar una gran cantidad de falsos positivos en el Western Blot?
Unión no específica del sistema de detección a la membrana.
¿Cuál es una desventaja de la tinción con negro amido en el Western Blot?
Interfiere en los procedimientos de inmunodetección.
¿En qué se basa la tinción mediante biotina-estreptavidina en el Western Blot?
En la afinidad de la estreptavidina por la biotina.
¿Para qué se emplea la técnica de Western Blot en el diagnóstico de la infección por VIH?
Confirmar resultados positivos del enzimoinmunoanálisis (EIA).
¿Qué función cumple el bloqueo en el Western Blot?
Prevenir la unión no específica del sistema de detección a la membrana.
¿Qué solución se puede usar en el bloqueo si hay una gran cantidad de falsos positivos en el Western Blot?
Bloqueo en Tween-20.
¿Qué método de tinción no es permanente y puede desaparecer con un procesado posterior en el Western Blot?
Ponceau S.
¿Qué marcador se puede utilizar para producir una señal detectable en el Western Blot?
Enzima
¿Qué es crucial para prevenir la unión no específica del sistema de detección a la membrana en el Western Blot?
Proceso de bloqueo
¿Qué sustancia común se utiliza para el bloqueo en el Western Blot?
Leche desnatada
¿Qué se busca en el Western Blot para confirmar el diagnóstico de la infección por VIH?
Anticuerpos específicos
¿Qué técnica es ampliamente utilizada para confirmar el diagnóstico de la infección por VIH?
Western Blot
¿Qué se utiliza para detectar anticuerpos frente a la polimerasa o la cubierta del VIH en el Western Blot?
Anticuerpo secundario
¿Qué se utiliza para controlar la transferencia realizada en el Western Blot?
Tinciones
¿Qué se emplea para confirmar los resultados positivos de VIH obtenidos a través de pruebas de detección primaria?
Transferencia Western
¿Qué se utiliza en lugar del anticuerpo secundario en algunos casos en el Western Blot?
Proteína A
¿Qué método de tinción específica se utiliza en el Western Blot?
Tinción Ponceau S
Study Notes
El texto proporcionado contiene información detallada sobre el proceso de Western Blot y su aplicación en la detección de la infección por VIH. Aquí hay un resumen de los puntos clave:
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El proceso de Western Blot implica el uso de un anticuerpo secundario marcado con una enzima diseñado para reconocer el anticuerpo primario, permitiendo la visualización de complejos antígeno-anticuerpo.
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El anticuerpo secundario puede ser marcado de diferentes maneras para producir una señal detectable, como en películas radiográficas o manchas de color en un filtro.
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En algunos casos, se utiliza la Proteína A o Proteína G en lugar del anticuerpo secundario, modificadas para hacerlas visibles.
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El proceso de bloqueo es crucial para prevenir la unión no específica del sistema de detección a la membrana, evitando falsos positivos.
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Soluciones comunes de bloqueo para el Western Blot incluyen leche desnatada, albúmina sérica bovina (BSA) y bloqueo en Tween-20, este último útil para evitar falsos positivos.
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Las proteínas en el filtro pueden ser teñidas para controlar la transferencia realizada, utilizando diferentes métodos de tinción basados en técnicas inmunohistoquímicas.
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Algunas tinciones específicas incluyen tinta china, negro amido, tinción Ponceau S, tinción mediante Oro Coloidal y tinción mediante biotina-estreptavidina.
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La técnica de Western Blot es ampliamente utilizada para confirmar el diagnóstico de la infección por VIH, empleando pruebas de tercera y cuarta generación que ofrecen sensibilidad elevada y diagnósticos más rápidos y certeros.
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Los resultados positivos de VIH obtenidos a través de pruebas de detección primaria deben ser confirmados mediante transferencia Western o inmunotransferencia.
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Se buscan antígenos específicos del VIH, como la presencia de anticuerpos en el suero del paciente frente a proteínas específicas del virus, en la transferencia de Western Blot.
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La técnica de Western Blot también puede diseñarse para detectar anticuerpos frente a la polimerasa o la cubierta del VIH.
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El uso de métodos de cuarta generación en la detección del VIH permite un diagnóstico más rápido y certero, sin necesidad de esperar el período ventana.
Identificación de conjugados mediante quimioluminiscencia. Aprende sobre la separación y detección de conjugados en esta técnica analítica.
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