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Questions and Answers
¿Cuál de las siguientes afirmaciones describe correctamente la acción de la novobiocina?
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¿Qué diferencia principal existe entre la topoisomerasa I y la topoisomerasa II según el texto?
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En la replicación del ADN, ¿cuál es la función de las proteínas de unión a cadena sencilla (SSB)?
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¿Cuál es la dirección de avance de la helicasa durante la replicación del ADN?
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Según el texto, ¿cómo se describe la síntesis de la cadena rezagada durante la replicación del ADN?
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¿Qué conclusión se obtuvo del experimento de pulso y caza usando rifampicina?
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¿Cuál es la función de la proteína DnaA en la replicación en E.coli?
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¿Cuál es el efecto de la camptotecina en la replicación del ADN?
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¿Cuál es la secuencia de eventos INICIALES correcta en la replicación del ADN en E. coli, luego de la unión de DnaA al OriC?
¿Cuál es la secuencia de eventos INICIALES correcta en la replicación del ADN en E. coli, luego de la unión de DnaA al OriC?
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¿Cuál es la función principal de la topoisomerasa IV en el contexto de la replicación del ADN?
¿Cuál es la función principal de la topoisomerasa IV en el contexto de la replicación del ADN?
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¿Qué característica específica distingue la replicación del ADN en eucariotas con respecto a procariotas referente a la terminación?
¿Qué característica específica distingue la replicación del ADN en eucariotas con respecto a procariotas referente a la terminación?
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Si una horquilla de replicación en E. coli se encuentra con secuencias Ter de otra horquilla, ¿qué sucede?
Si una horquilla de replicación en E. coli se encuentra con secuencias Ter de otra horquilla, ¿qué sucede?
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¿Qué función desempeña la DAM metilasa en la replicación del ADN en E. coli?
¿Qué función desempeña la DAM metilasa en la replicación del ADN en E. coli?
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¿Cuál es la consecuencia principal de la falta de actividad de la telomerasa en las células somáticas eucariotas?
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¿Cuál es el papel de las proteínas SSB (single-strand binding proteins) en el proceso de replicación de ADN?
¿Cuál es el papel de las proteínas SSB (single-strand binding proteins) en el proceso de replicación de ADN?
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¿Cuál de las siguientes afirmaciones describe mejor el concepto de 'bucle terminal' en los telómeros eucariotas?
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¿Qué diferencia estructural principal existe entre los cromosomas de procariotas y eucariotas que afecta su replicación?
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En la replicación del ADN, ¿qué molécula es la responsable de generar el cebador de ARN?
En la replicación del ADN, ¿qué molécula es la responsable de generar el cebador de ARN?
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Study Notes
Medicamentos y Topoisomerasas
- La ADN girasa controla el superenrollamiento del ADN cortando las cadenas y restaurándolas con ayuda de ATP.
- La novobiocina es un antibiótico que bloquea la unión del ATP a la ADN girasa, inhibiendo la replicación.
- La topoisomerasa II es más común en procariotas, mientras que la topoisomerasa I es más común en humanos.
- La ADN girasa es un subtipo de topoisomerasa II, presente en procariotas. Humanos también poseen topoisomerasa II.
- La camptotecina inhibe la topoisomerasa I y se usa como antitumoral.
Horquilla de Replicación
- La helicasa avanza en dirección 5' a 3' para romper los puentes de hidrógeno entre las bases complementarias y abrir la doble hélice de ADN.
- Las proteínas de unión al ADN monocatenario (SSB) estabilizan el ADN abierto.
- La ADN girasa alivia la tensión generada por delante de la horquilla de replicación.
- Hay dos abrazaderas de deslizamiento (pinzas) en la cadena retrasada y una en la cadena líder.
- El complejo de helicasa y primasa se llama primosoma.
- La ADN polimerasa III sintetiza ambas cadenas, la líder (continua) y la retrasada (discontinua), de forma simultánea.
- La cadena retrasada se sintetiza con fragmentos de Okazaki, en un modelo de bucle (loop).
- La cadena líder se sintetiza de forma continua.
Experimentos Pulso y Caza
- La rifampicina inhibe las ARN polimerasas, pero no las primasas.
- En presencia de rifampicina, la síntesis de la cadena retrasada no se ve afectada, mientras que la síntesis de la cadena líder sí.
- Esto indica que la primasa es suficiente para la síntesis de la cadena retrasada, mientras que la ARN polimerasa también participa en la síntesis de la cadena líder.
- Ambas enzimas sintetizan los cebadores.
Replicación en Procariotas
Iniciación
- El origen de replicación en E. coli se llama OriC.
- Numerosas copias de la proteína DnaA se unen a OriC, iniciando la separación de las hebras con gasto de ATP.
- Las proteínas HU se unen a la doble hélice e facilitan su separación.
- La helicasa DnaB desenrolla el ADN.
- La primasa sintetiza los cebadores de ARN.
- OriC contiene 13 secuencias de 3 pares de bases y 4 secuencias de 9 pares de bases.
- La enzima DnaA, en presencia de ATP y otros factores como HU e IHF, se une a OriC, iniciando la replicación.
- El complejo DnaB-DnaC abre la doble hélice.
- Una vez DnaB se une a la horquilla, DnaC se separa.
- DnaG sintetiza cebadores, mientras SSB mantiene la doble hélice abierta.
- La DAM metilasa actúa antes que otras enzimas, metilando las secuencias de inicio. El DNA nuevo es hemimetilado.
Elongación
- Las dos cadenas, líder y retrasada, se replican simultáneamente.
- Dos unidades de ADN pol III están implicadas en la síntesis de las dos cadenas.
- El replisoma está formado por el primosoma (primasa + helicasa), proteínas SSB y dos holoenzimas de ADN pol III.
Terminación
- Dos horquillas de replicación avanzan en direcciones opuestas.
- Las secuencias Ter permiten la finalización de la replicación. Cada horquilla debe encontrar 4 secuencias Ter de la otra horquilla (un total de 8 secuencias Ter).
- Una horquilla puede ser más rápida que la otra, causando que la horquilla más lenta espere.
ADN Topoisomerasa IV
- La topoisomerasa IV desenreda los cromosomas recién formados después de la replicación.
Características de la Replicación en Eucariotas
- Múltiples orígenes de replicación.
- La reconstrucción cromatínica es diferente en eucariotas (el ADN se asocia con proteínas).
- El proceso implica modificaciones estructurales para permitir el acceso a proteínas reguladoras de la transcripción.
Telómeros y Terminación
- Los telómeros son secuencias repetitivas que protegen los extremos de los cromosomas.
- Tras la eliminación de los cebadores, el extremo de los telómeros adopta una forma de bucle terminal para proteger el ADN.
- El extremo 3' del telómero está enriquecido en guanina (G).
- La telomerasa contiene una subunidad de ARN molde y una transcriptasa inversa.
- La telomerasa sintetiza ADN a partir del ARN molde, extendiendo el extremo 3' del telómero.
- La telomerasa actúa exclusivamente en el extremo 3', por lo que el extremo 5' se acorta.
- Telomerasa es más activa durante mitosis celular.
- El acortamiento de los telómeros está relacionado con el envejecimiento y la senescencia celular.
- Los cromosomas procariotas son circulares, sin extremos y por lo tanto no requieren telómeros.
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