Desarrollo Histórico del Cultivo Celular
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Questions and Answers

¿Cuál es la temperatura recomendada para el almacenamiento de suero y aditivos como la glutamina y antibióticos?

  • -20ºC (correct)
  • -80ºC
  • 4ºC
  • 0ºC

¿Cuál es la función de utilizar contenedores de nitrógeno líquido?

  • Almacenamiento de líneas celulares a largo plazo (correct)
  • Almacenamiento a corto plazo de enzimas
  • Desinfección de equipos
  • Congelación de medios de cultivo

¿Cuál es la velocidad típica recomendada para centrifugar células en un proceso estándar?

  • 1500-1800 rpm (correct)
  • 1200 rpm
  • 500 rpm
  • 2200 rpm

¿Qué se debe hacer inmediatamente después de la centrifugación?

<p>Decantar el sobrenadante y resuspender las células (A)</p> Signup and view all the answers

¿Qué instrumento se utiliza para contar células en un laboratorio?

<p>Hemocitómetro (B)</p> Signup and view all the answers

¿Quién fue el primero en cultivar tejido animal y describir la formación del axón?

<p>Harrison (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál fue un avance significativo en el cultivo celular durante el periodo de 1920-1940?

<p>Desarrollo de antibióticos (B)</p> Signup and view all the answers

¿Qué caracteriza a las células HeLa?

<p>Proliferan rápidamente y son cancerosas (C)</p> Signup and view all the answers

¿Qué investigador estableció la primera línea celular humana?

<p>George Gey (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el propósito del factor de crecimiento nervioso descubierto por Rita Levi-Montalcini?

<p>Estimular el crecimiento de los axones (B)</p> Signup and view all the answers

¿Qué importancia tuvieron los medios nutritivos en el desarrollo de técnicas de cultivo celular?

<p>Son esenciales para el crecimiento y la división celular (A)</p> Signup and view all the answers

¿Qué hallazgo hizo Hayflick sobre la cultivación de fibroblastos?

<p>La cultivación tiene un límite finito de pases (C)</p> Signup and view all the answers

¿Qué técnica se desarrolló entre 1920 y 1970 para el cultivo de células vegetales?

<p>Micropropagación vegetal (C)</p> Signup and view all the answers

¿Qué tipo de células son capaces de dar lugar a todos los tipos de células en un adulto?

<p>Células pluripotentes (C)</p> Signup and view all the answers

¿En qué año se realizó el primer trasplante de médula ósea alogénica?

<p>1968 (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es la principal característica de las células madre mesenquimatosas (MSC)?

<p>Son multipotentes (B)</p> Signup and view all the answers

¿Qué avance ocurrió en 2007 que cambió el paradigma sobre la diferenciación celular?

<p>Reprogramación de células adultas mediante factores de transcripción (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el principal tipo de células madre adultas que se han estudiado históricamente?

<p>Células madre de médula ósea (D)</p> Signup and view all the answers

¿Qué tipo de médula fue protagonista en el primer trasplante de células madre de cordón umbilical en 1988?

<p>Células madre de cordón umbilical (C)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es la función principal de la presión positiva en un laboratorio de cultivos celulares?

<p>Evitar la entrada de contaminantes. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Qué se aisló y cultivó en 1998 que tuvo importantes aplicaciones clínicas?

<p>Células madre embrionarias humanas (C)</p> Signup and view all the answers

¿Qué función tienen los factores de Yamanaka en el contexto de las células madre?

<p>Reprogramar células adultas a pluripotentes (C)</p> Signup and view all the answers

¿Qué causa la desdiferenciación de las células en cultivo?

<p>La proliferación en cultivo. (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de los siguientes no es un tipo de incubador mencionado?

<p>Incubador de vapor. (A)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es una de las características del suelo en un laboratorio de cultivos celulares?

<p>Fácil de limpiar y no poroso. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de las siguientes afirmaciones sobre la validez del modelo in vitro es correcta?

<p>Los pases sucesivos aumentan la aneuploidía. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es la temperatura recomendada para el crecimiento celular en incubadores robotizados?

<p>37ºC. (D)</p> Signup and view all the answers

¿Qué equipo se utiliza para la esterilización en un laboratorio de cultivos celulares?

<p>Autoclave. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Qué instrumentos se deben usar para observar las células en un laboratorio de cultivos?

<p>Microscopios invertidos. (D)</p> Signup and view all the answers

¿Qué tipo de células pueden dividirse indefinidamente y dar lugar a distintos linajes celulares?

<p>Células madre (B)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de las siguientes técnicas se utiliza para obtener cultivos de células disociadas?

<p>Métodos mecánicos o enzimáticos (B)</p> Signup and view all the answers

¿Qué ocurre con un cultivo celular primario tras un número determinado de pases?

<p>Entra en senescencia (A)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de las siguientes afirmaciones sobre el cultivo celular continuo es correcta?

<p>Ejemplos de líneas celulares continuas incluyen HeLa y Jurkat. (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es la principal diferencia entre las células madre y las células vegetales según el contenido?

<p>Las células madre tienen mayor plasticidad (A)</p> Signup and view all the answers

Los explantes primarios son fragmentos de tejido que se utilizan en cultivos. ¿Cuál es su característica principal?

<p>Las células de la periferia pueden migrar y proliferar (A)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es una característica de las células en cultivos adherentes?

<p>Requieren un sustrato como vidrio o plástico para proliferar. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Qué elección describe correctamente el cultivo celular finito?

<p>Entra en senescencia tras múltiples pases (C)</p> Signup and view all the answers

¿Qué describe mejor un cultivo en suspensión?

<p>Células que crecen en un medio líquido sin adherencia. (A)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es una ventaja del cultivo de órganos?

<p>Conserva la arquitectura del tejido in vivo. (A)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de las siguientes opciones es un ejemplo de línea celular primaria?

<p>Células endoteliales de aorta bovina (BAEC) (A)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de las siguientes opciones es una desventaja del cultivo de órganos?

<p>La cantidad de material cultivable es limitada. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Qué tipo de cultivos se caracteriza por perder el contacto con la matriz extracelular?

<p>Cultivos de células disociadas (A)</p> Signup and view all the answers

¿Qué describe mejor el cultivo organotípico en ingeniería de tejidos?

<p>Implica co-cultivos de diferentes tipos celulares y soportes biocompatibles. (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de los siguientes cultivos es más adecuado para células hematopoyéticas?

<p>Cultivos en suspensión. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Qué sucede en el cultivo de células adherentes al alcanzar la confluencia?

<p>Interfiere con el crecimiento debido a la inhibición por contacto. (A)</p> Signup and view all the answers

Flashcards

Células totipotentes

Las células totipotentes son capaces de diferenciarse en cualquier tipo de célula, incluyendo las células de la placenta.

Células pluripotentes

Las células pluripotentes pueden diferenciarse en cualquier tipo de célula del cuerpo, pero no en células de la placenta.

Células multipotentes

Las células multipotentes son capaces de diferenciarse en varios tipos de células dentro de un linaje específico.

Células madre embrionarias humanas (hESC)

Las células madre embrionarias humanas (hESC) son células pluripotentes que se pueden obtener de embriones en desarrollo temprano.

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Células progenitoras multipotentes de tejidos adultos (MAPCs)

Las células progenitoras multipotentes de tejidos adultos (MAPCs) son células multipotentes que se encuentran en tejidos adultos.

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Células iPS (células madre pluripotentes inducidas)

Las células iPS (células madre pluripotentes inducidas) son células adultas que se han reprogramado para adquirir las características de las células madre embrionarias.

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Factores de transcripción para iPS

Las células iPS se generan mediante la introducción de 4 factores de transcripción en células adultas.

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Reprogramación celular

La reprogramación celular es el proceso por el cual las células adultas se vuelven a programar para adquirir las características de las células madre embrionarias.

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Plasticidad celular

La capacidad de una célula para diferenciarse y dar lugar a distintos tipos de células.

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Células madre

Células que pueden dividirse indefinidamente y generar diferentes tipos de células.

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Explante primario

Un fragmento de tejido o órgano que se cultiva in vitro. Las células de la periferia pueden migrar y proliferar.

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Cultivo de células disociadas

Cultivo in vitro de células disociadas de un tejido. Puede ser en suspensión o en monocapa.

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Cultivo celular finito

Cultivo celular que tiene un número limitado de divisiones y entra en senescencia (envejece).

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Cultivo primario

Cultivo celular que se obtiene directamente a partir de un tejido y mantiene el fenotipo celular original. No es transformante: no se convierte en células cancerosas.

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Línea celular primaria

Cultivo celular que se obtiene a partir de un cultivo primario y se mantiene durante un número limitado de pases. Puede ser de distintos orígenes.

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Células madre adultas

Un tipo de célula madre que se puede obtener de tejidos adultos e iPSc humanas.

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Cultivo Tisular de Roux

Técnica de cultivo de tejidos que utiliza células de pollo en una solución salina, marcando el inicio de la investigación in vitro.

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Cultivo In Vitro de Haberlandt

Primeros intentos de cultivos vegetales in vitro utilizando células aisladas y medios con glucosa. Sin embargo, no se logró la multiplicación celular.

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Cultivo de Tejido Animal de Harrison

Primer cultivo exitoso de tejido animal, utilizando médula espinal embrionaria de anfibio, donde Harrison observó la formación del axón de las neuronas.

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Cultivo Celular de Burrows y Carrel

Descubrimiento de la importancia de los medios nutritivos en la proliferación celular, utilizando plasma suplementado con nutrientes extraídos de embriones de pollo. Además, se introdujo la asepsia en los cultivos.

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Cultivo Celular de Rous y Jones

Utilización de tripsina para separar células de embriones e iniciar el primer cultivo celular, mejorando las condiciones de asepsia y esterilidad con la introducción de antibióticos.

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Línea Celular HeLa

La primera línea celular humana, Célula HeLa, extraída de células cancerígenas del cuello uterino de Henrietta Lacks, fue la primera célula que se descubrió que era inmortal.

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Investigaciones de Eagle

Estudio de los requerimientos nutritivos de las células en cultivo, identificando los nutrientes esenciales para su crecimiento y desarrollo.

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Límite de Hayflick

Descubrimiento de la capacidad limitada de las células en cultivo. Las células de fibroblastos solo pueden dividirse por un número limitado de veces antes de morir.

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Línea celular continua

Una línea celular continua es una población de células derivada de un solo progenitor que es capaz de proliferar indefinidamente en cultivo.

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Cultivos en monocapa

Las células que crecen en monocapa se adhieren al sustrato y forman una sola capa de células.

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Cultivos en suspensión

Las células que crecen en suspensión no se adhieren al sustrato y flotan en el medio de cultivo.

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Cultivo de órganos

El cultivo de órganos es una técnica que permite mantener la estructura y función de un órgano in vitro.

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Cultivos organotípicos

Los cultivos organotípicos se basan en el cultivo de células en una matriz tridimensional que imita la estructura de un órgano.

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Ingeniería de tejidos

La ingeniería de tejidos busca crear tejidos y órganos funcionales a partir de células.

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Confluencia

La confluencia es el momento en que las células en cultivo cubren toda la superficie disponible.

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Microsoportes

Los microsoportes son pequeñas bolas que sirven como superficie de adhesión para las células.

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Contenedores de N2 liquido

Un tipo de contenedor que se usa para almacenar líneas celulares a largo plazo. El nitrógeno líquido mantiene las células en un estado de congelación profunda, lo que les permite sobrevivir durante largos períodos.

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Hemocitómetro

Un tipo de cámara que se usa para contar células. Tiene una cuadrícula grabada en la base que permite contar las células en un volumen conocido.

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pH-metro

Un tipo de dispositivo que se usa para medir la concentración de iones hidrógeno (H+) en una solución. Se utiliza para determinar el pH de una solución, que es una medida de su acidez o alcalinidad.

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Centrífugas

Un tipo de instrumento que se utiliza para separar células o partículas de diferentes tamaños y densidades. Consiste en un rotor que gira a alta velocidad, lo que genera una fuerza centrífuga que separa los componentes de la muestra.

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Citómetro de flujo

Un tipo de técnica que se utiliza para analizar células individuales. Utiliza un láser para iluminar las células y un detector para medir la dispersión de la luz. Se utiliza para determinar el tamaño, la forma y la complejidad de las células.

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Replaqueos/pases/subcultivo

Proceso que se da cuando los cultivos celulares llegan a su límite de crecimiento, debido a la falta de espacio o nutrientes. Se realiza una dilución de la densidad celular para permitir el crecimiento continuo.

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Presión selectiva en el cultivo

Células que han logrado superar el proceso de disgregación del tejido, adherirse al sustrato y proliferar, demostrando su capacidad de adaptación y supervivencia en el cultivo.

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Cantidad y coste en cultivos celulares

La necesidad de mantener una cantidad abundante de células para la investigación es más costosa que obtenerlas de animales, ya que requiere más tiempo y recursos.

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Desdiferenciación en cultivo celular

Fenómeno que sufren las células en cultivo, perdiendo su especialización y volviéndose más genéricas. La pérdida de características se compensa con el uso de marcadores que identifican su origen.

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Rediferenciación en cultivo celular

Utilización de hormonas o compuestos químicos para inducir a las células que han perdido su especialización a recuperar su función original.

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Inestabilidad cromosómica en cultivo celular

La inestabilidad en los cromosomas puede ocurrir en cultivos celulares, lo que representa un desafío para su uso en investigación. Las células pueden perder o duplicar cromosomas, lo que afecta a su funcionamiento.

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Validez del modelo in vitro

La validez del modelo in vitro depende del número de pases que se realizan en los cultivos celulares. Se debe evitar la acumulación de aneuploidía, donde las células tienen un número diferente de cromosomas al original.

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Distribución y características ideal para laboratorios de cultivo celular

Un ambiente controlado y limpio, libre de contaminantes, es fundamental para el crecimiento y la salud de las células. Un espacio de trabajo exclusivo con doble puerta, presión positiva y limpieza constante garantiza la seguridad del cultivo celular.

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Study Notes

Desarrollo Histórico del Cultivo Celular

  • Roux inició el cultivo tisular in vitro, cultivando células de embrión de pollo en solución salina durante 13 días.
  • Haberlandt intentó cultivar células vegetales, pero no lograron multiplicarse.
  • Harrison realizó el primer cultivo de tejido animal, utilizando médula espinal embrionaria de anfibio.
  • Burrows y Carrel desarrollaron medios nutritivos mejorados, utilizando plasma suplementado con extractos de embrión de pollo, lo que marcó el inicio de la asepsia.
  • Investigaciones posteriores se enfocaron en el cultivo de células de mamíferos (perros, gatos, conejos, tumores).
  • Rous y Jones desarrollaron extractos con tripsina para desagregar células de embrión de pollo, lo que permitió avances en cultivos celulares.
  • Entre 1920 y 1940, se destacaron avances en asepsia y esterilidad, incluyendo el desarrollo de los primeros antibióticos.
  • Sanford enfatizó la necesidad de nutrientes adecuados para la división celular.
  • Las técnicas de micropropagación vegetal, con uso de fitohormonas y factores de crecimiento, se desarrollaron entre 1920 y 1970.
  • Gey estableció la primera línea celular humana (células HeLa), capaces de crecer indefinidamente en cultivo.
  • El desarrollo de medios complejos, como el plasma de pollo y el suero de cordón umbilical, permitió mantener el cultivo celular de células tumorales (cancerígenas).
  • Surgió la importancia de las células tumorales en cultivos por su rápido crecimiento.
  • Los trabajos de Rita Levi-Montalcini y otros identificaron el Factor de Crecimiento Nervioso (FCN).
  • Eagle contribuyó a los requerimientos nutritivos para el cultivo de células.
  • Hayflick demostró la limitación del crecimiento de cultivos de fibroblastos in vitro.
  • En 1968 se realizó el primer trasplante de médula ósea alogénica.
  • Se establecieron líneas celulares, como la de neuroblastoma gracias a Augusti-Tocco y Sato.
  • El cultivo de vegetales también ha sido muy relevante.
  • La comercialización de materiales para cultivo celular animal y vegetal llegó en 1970.
  • En 1980 se inició la inmortalización o transformación celular.
  • Se aisló y cultivó células madre estromales (MSC) en 1988 , con importancia en la regeneración de tejidos.

Cultivos Animales vs Vegetales

  • Las células animales son limitadas en la plasticidad, a diferencia de las células vegetales.
  • La proliferación celular y la diferenciación se ven afectadas por factores como la presión, la temperatura, los nutrientes y otros, lo que genera un control preciso y fino.
  • Métodos in vitro como los cultivos celulares en monocapa y en suspensión, permiten la homogeneidad.
  • Es importante considerar consideraciones éticas debido al uso de tejidos animales en la investigación.

Cultivo Celular Continuo vs Primario

  • Los cultivos celulares primarios tienen una vida útil limitada, mientras que las líneas celulares continuas son inmortales.
  • Líneas celulares inmortales provenienen de células de tumores o transformaciones inducidas.
  • Los cultivos primarios se obtienen a partir de un tejido, y las células mantienen viabilidad en un tiempo limitado. Su mantenimiento depende de pases sucesivos.

Cultivos Vegetales (Micropropagación)

  • Las células vegetales tienen totipotencia, lo que les permite generar un nuevo individuo.
  • Los explantes son partes de un tejido vegetal que se utiliza como punto de inicio.
  • Los callos son masas de células vegetales desdiferenciadas, incapaces de realizar la fotosíntesis.
  • Se utiliza una amplia gama de hormonas, como auxinas y citoquininas, para controlar la diferenciación de las células vegetales.

Equipamiento del Laboratorio de Cultivos

  • Es importante contar con un espacio aislado, con una atmósfera a una presión ligeramente superior al exterior para evitar la entrada de contaminantes.
  • La esterilización del material es crucial, para evitar la contaminación.
  • Se utiliza una variedad de equipos, como autoclaves, filtros, cabinas de flujo laminar y congeladores para proteger las muestras de contaminantes.
  • Tipos de cabinas de seguridad biológica ayudan a proteger al usuario y el material.
  • Los incubadores de CO2(5%) ayudan al control de la temperatura y el gas.
  • Microscopios invertidos permiten observar muestras en el fondo de placas de cultivo.
  • Neveras y congeladores mantienen las sustancias en las condiciones requeridas.
  • Las centrífugas separan los componentes de una muestra.

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Description

Este cuestionario explora la evolución del cultivo celular in vitro a partir de los primeros experimentos de Roux y Harrison hasta los avances en asepsia y medios nutritivos. Aprenderás sobre las contribuciones de científicos clave y los métodos utilizados para cultivar células de diferentes organismos. Es una excelente manera de entender los fundamentos de la biología celular y sus aplicaciones.

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