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Questions and Answers
¿Cuál de las siguientes afirmaciones sobre el ARN mensajero (ARNm) es correcta?
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¿Qué función tiene el ARN de transferencia (ARNt) durante la síntesis de proteínas?
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En el proceso de transcripción, ¿cuál es la característica principal que lo diferencia de la replicación del ADN?
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¿Cuál de las siguientes afirmaciones sobre los intrones es correcta?
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¿Cuál es la dirección en la que se sintetiza el ARN durante la transcripción?
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¿Qué tipo de ARN forma parte de los ribosomas y tiene una función estructural?
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Durante la transcripción, ¿qué ocurre en la fase de elongación?
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¿Cuál es una función principal del ARN ribosómico (ARNr)?
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¿Cuál de los siguientes factores altera la función del promotor?
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¿Qué sucede después de que se sintetizan los primeros 8 o 9 nucleótidos durante la transcripción?
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¿Cuál es la composición de la unión del promotor en la iniciación de la transcripción?
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¿Cuál es el papel del factor NusA durante la elongación de la transcripción?
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¿Qué implica el espaciado entre las secuencias consenso en un promotor bacteriano?
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¿Qué determina el nivel de expresión basal de los genes en E. coli?
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¿Cuál de las siguientes opciones describe mejor el ciclo σ en la transcripción?
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¿Cuántas subunidades σ se han identificado en E. coli?
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¿Cuál es la función principal de las diferentes subunidades σ en E. coli?
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¿Qué sucede con el promotor del choque térmico en E. coli cuando se sustituye σ70 por σ32?
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¿Cuál de las siguientes afirmaciones es correcta sobre la síntesis de ARN en procariotas?
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En el modelo de la ARN polimerasa durante la fase de elongación, ¿cuál es el papel del sitio activo?
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¿Cuál es una de las características de la señal de terminación independiente de ρ?
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¿Qué ocurre si una ARN polimerasa libera un transcrito prematuramente?
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¿Qué elemento contiene típicamente un terminador dependiente de ρ?
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¿Qué función cumple la proteína ρ durante la terminación dependiente de ρ?
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¿Cómo afecta la horquilla en el proceso de terminación independiente de ρ?
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¿Cuál es el proceso de migración de la proteína ρ?
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¿Qué aspecto de la transcripción puede ser regulado?
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¿Cuál de las siguientes afirmaciones es correcta sobre la actividad de la proteína ρ?
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En la terminación independiente de ρ, ¿qué sucede en la horquilla?
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¿Cuál es la dirección de síntesis del ARN durante el proceso de transcripción?
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¿Qué papel tiene el grupo 3'-OH en la síntesis de ARN?
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¿Cuál de las siguientes afirmaciones sobre la ARN polimerasa es correcta?
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¿Qué interviene en la selección del nucleótido durante la transcripción?
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¿Qué sucede con la burbuja de transcripción durante la elongación?
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¿Cuál es la velocidad de elongación de la ARN polimerasa durante la transcripción?
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¿Cuál es la función de las topoisomerasas en el proceso de transcripción?
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¿Qué ocurre con el ARN después de que se aparea temporalmente con el ADN molde?
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¿Cuál es el efecto de la falta de actividad exonucleasa 3'-5' en la ARN polimerasa?
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¿Qué tipo de doble hélice se forma durante la transcripción?
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¿Cuál es la función principal de los activadores en la transcripción eucariota?
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¿Cuál ARN polimerasa es responsable de la síntesis de ARNm?
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¿Qué estructura se une primero en el proceso de transcripción en eucariotas?
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¿Qué características comparten los promotores reconocidos por la ARN polimerasa II?
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¿Qué componente forma la cola carboxilo terminal en la ARN polimerasa II?
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¿Cuál de las siguientes proteínas se une a la caja TATA durante el proceso de transcripción?
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¿Qué tipo de ARN es sintetizado por la ARN polimerasa III?
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¿Qué factor es crucial para la formación del complejo de transcripción activo?
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Study Notes
Metabolismo del ARN
- El ARN desempeña funciones de almacenamiento, transmisión de información y catálisis (funcional).
- La transcripción es el proceso por el cual segmentos de ADN producen cadenas de ARN complementarias. Este proceso tiene lugar en ADN de doble cadena, con excepción de los genomas de ARN de ciertos virus.
- La maduración del ARN es un proceso posterior a la transcripción que implica modificaciones en el ARN.
Terminología
- Un gen es un segmento de ADN (a veces ARN) que contiene la información necesaria para sintetizar un producto biológico funcional, como una proteína o ARN específico.
- Los genes eucariotas tienen una estructura compleja compuesta de exones (codificantes) e intrones (no codificantes).
- Las secuencias de aminoácidos en una proteína están codificadas por los exones.
Clases de ARN
- ARN mensajero (ARNm): este codifica la secuencia de aminoácidos de uno o más polipéptidos.
- ARN de transferencia (ARNt): este lee la información del ARNm y transfiere el aminoácido adecuado a la cadena polipeptídica en crecimiento.
- ARN ribosómico (ARNr): forma parte de los ribosomas.
- Otros ARN especializados tienen función reguladora y catalítica. Son precursores de otros ARN.
Replicación vs. Transcripción
- Replicación: Copia el cromosoma entero. La dirección de la síntesis es 5'→3'. Requiere cebador. Las dos hebras de ADN sirven de molde.
- Transcripción: Solo transcribe genes o grupos de genes determinados. La dirección de la síntesis es 5'→3'. No requiere cebador. Solo una de las hebras de ADN sirve de molde.
Transcripción por la ARN polimerasa
- Requiere un molde de ADN de una hebra, ATP, GTP, UTP, CTP, Mg2+ y Zn2+ (cofactores).
- La dirección de la síntesis es 5'→3'.
- El mecanismo catalítico es similar al de las ADN polimerasas.
- El grupo 3'-OH actúa como nucleófilo, facilitando el desplazamiento del PPi y el ataque por el grupo 3'-OH.
- Selección del nucleótido por apareamiento de bases de Watson y Crick (A-U, G-C).
- La nueva cadena de ARN se aparea temporalmente con el ADN molde (doble hélice híbrida ARN-ADN ~8 bp).
Burbuja de transcripción
- La ARN polimerasa mantiene unos 17 pb desenrollados en la burbuja de la transcripción.
- La velocidad de elongación es de 50-90 nucleótidos por segundo.
- No existe actividad exonucleasa 3'→5'. El movimiento de las burbujas de transcripción provoca rotación de las hebras de ADN, provocando vueltas superhelicoidales.
Cadenas molde y no molde del ADN
- La secuencia codificante de un gen puede estar en cualquiera de las dos hebras del cromosoma.
- La secuencia en la hebra no molde es idéntica a la del transcrito de ARN pero cambiando T → U.
ARN polimerasa de E. coli
- Enzima compleja que tiene 6 subunidades, donde 5 son el núcleo y 1 es σ.
- La subunidad σ se une transitoriamente y dirige el núcleo de la enzima hacia sitios específicos del ADN.
- Existen diferentes holoenzimas según el tipo de subunidad σ.
- La holoenzima σ70 es la más común.
Promotores
- Secuencias específicas del ADN donde se une la ARN polimerasa.
- Promotores de E. coli están entre -70 y +30, con secuencias consenso en -10 (TATAAT) y -35 (TTGACA).
- La presencia de la secuencia (UP) entre -40 y -60, rica en A y T, estimula la transcripción.
- Existen promotores típicos de E. coli, que la holoenzima que contiene σ70 reconoce.
Iniciación (Transcripción)
- Unión e inicio
- Se forma un complejo cerrado (ADN no desenrollado).
- Se forma un complejo abierto donde una región de 12-15 pb se desenrolla cerca de la secuencia -10.
- Se incia la transcripción dentro del complejo abierto (la subunidad σ se libera).
- La polimerasa abandona el promotor para elongar el ARN.
Ciclo σ
- La proteína NusA se une al ARN pol y compite con la subunidad σ, desplazándola.
- Al completarse el proceso, se disocia NusA y la ARN polimerasa se separa del ADN.
- Un factor σ (por ejemplo, σ70 u otro) se puede unir a la E para iniciar un nuevo ciclo de transcripción.
7 subunidades σ diferentes en E. coli
- Las subunidades σ tienen funciones únicas dentro de las distintas holoenzimas.
Promotores bacterianos
- La eficacia de unión y de inicio de la transcripción depende de la presencia y espaciamiento de las secuencias consenso.
- Los cambios en las secuencias -35 y -10 alteran la función del promotor, afectando la unión de la ARN polimerasa y el inicio de la transcripción.
- Las secuencias promotoras determinan el nivel de expresión basal de los genes.
Terminación (Transcripción)
- Hay terminación independiente de p (caracterizada por regiones autocomplementarias en el transcrito de ARN y residuos AAA-UUUU en la hebra molde).
- Hay terminación dependiente de p. La proteína p se une, migra y facilita la disociación del ARN y la ARN polimerasa.
Terminadores dependientes de p
- Carecen de AAA en la hebra molde y a veces contienen elementos ricos en CA.
- La proteína ρ se une, migra y facilita la disociación del ARN y la ARN polimerasa.
Regulación de la transcripción
- La transcripción está regulada para suministrar los productos génicos en las proporciones requeridas.
- La regulación se puede dar en cualquiera de las etapas de la transcripción.
- La regulación preferente se da en la unión de la polimerasa y las etapas de inicio.
- La regulación se puede realizar a través de diferencias en la secuencia del promotor o proteínas (activadores y represores) que se unen a secuencias próximas o alejadas del promotor.
- Se incluye el ejemplo de las proteínas activadoras y represoras como la proteína receptora de AMPc y el represor Lac.
ARN polimerasas eucariotas
- Hay 3 tipos de ARN polimerasas (I, II, III).
- ARN polimerasa I: sintetiza rangos de ARN prerribosómico.
- ARN polimerasa II: sintetiza ARNm y ARN especializados (que reconocen miles de promotores con secuencias diferentes).
- ARN polimerasa III: sintetiza ARNt, ARNr 5S y ARN especializados. En las tres ARN polimerasas eucariotas se encuentran secuencias reguladoras localizadas tanto dentro como fuera del gen.
ARN polimerasa II
- Tiene 12 subunidades.
- La subunidad grande, RBP1, tiene un dominio carboxilo terminal (CTD).
- El dominio CTD tiene varias repeticiones (1-200) de la secuencia YSPTSPS, y se regula a través de la fosforilación.
Transcripción en eucariotas
- Requiere múltiples proteínas para formar el complejo de transcripción activo.
- Existe fosforilación de Pol II en el dominio CTD por parte de TFIIH durante la iniciación.
- Existen varios factores de transcripción específicos para Pol II.
Proceso de la transcripción (eucariotas) (en detalle)
- Unión de la ARN polimerasa y factores de transcripción
- Se une TBP (proteína de unión a TATA) a la caja TATA del promotor.
- TFIIB y otros factores se unen al complejo.
- La ARN polimerasa se une al complejo.
- Se forma el complejo abierto gracias a TFIIH y una hélice de ADN.
- Se incia la transcripción.
- La polimerasa abandona el promotor.
- TFIIH y TFIIE se separan.
Proceso de transcripción (elongación)
- El factor TFIIF permanece asociado para potenciar la actividad de la ARN polimerasa.
- Suprimen pausas.
- Coordinan la interacción entre complejos responsables de la maduración postranscripcional del ARNm.
Factores de elongación
- Se da la fosforilación de Pol II dentro del CTD.
Proceso de transcripción (Terminación y liberación)
- ARN polimerasa I: parecido a dependiente de rho.
- ARN polimerasa III: parecido a independiente de rho.
- ARN polimerasa II: acoplado a la maduración del ARN, proteína Rat1.
Inhibidores de la ARN polimerasa
- Actinomicina D y Acridina intercalan en pares G-C consecutivos del ADN, causando la deformación y bloqueando el desplazamiento de la ARN polimerasa.
- Rifampicina se une a la subunidad ẞ de ARN polimerasa bacteriana, inhibiendo el desalojo del promotor.
- α-Amanitina bloquea la ARN polimerasa II. Con concentraciones altas también bloquea la ARN polimerasa III.
Otras funciones de TFIIH
- La reparación del ADN es más eficiente en los genes transcritos.
- Un componente esencial del complejo autónomo de reparación por escisión de nucleótidos.
- TFIIH está involucrado en el síndrome de Cockayne. Es un error en la vía que repara lesiones por rayos UV en genes activos.
Regulación de la transcripción en eucariotas
- Proceso complejo mediado por proteínas reguladoras que interactúan con factores de transcripción y ARN polimerasa.
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Description
Este cuestionario abarca conceptos clave sobre el ARN mensajero, el ARN de transferencia y el ARN ribosómico en el contexto de la síntesis de proteínas. Responde preguntas sobre la transcripción y las funciones de diferentes tipos de ARN. Ideal para estudiantes de biología que deseen profundizar en este tema importante.