Resumo de Genética - P1 PDF
Document Details
Uploaded by Deleted User
Tags
Summary
This document provides a summary of genetics, covering topics such as the study of genes, chromosomes, and the organization of genetic material. It also explains the concepts of genotype and phenotype, and introduces the basics of the processes of DNA replication and protein synthesis.
Full Transcript
Genética Apostila 1 - Introdução à genética ➔ Genética: estudo do perfil genético dos indivíduos ◆ Estudo da hereditariedade: características que são passadas de uma geração para a outra através da reprodução, sendo elas adquiridas de 50% de cada um dos genitores...
Genética Apostila 1 - Introdução à genética ➔ Genética: estudo do perfil genético dos indivíduos ◆ Estudo da hereditariedade: características que são passadas de uma geração para a outra através da reprodução, sendo elas adquiridas de 50% de cada um dos genitores. ➔ Genes: é o conjunto de bases nitrogenadas; ◆ Sequências de nucleotídeos que codificam RNAs e ptn ◆ É uma porção do DNA capaz de produzir uma ptn ◆ São responsáveis pela expressão das características hereditárias ◆ São as ptn formadas que nos diferem -> cada material genético tem genes diferentes que produzem ptn diferentes em cada indivíduo ➔ Cromossomos: é a molécula de DNA condensada associado com as histonas ◆ Humanos: 46 cromossomos, sendo 44 autossomos e 2 sexuais (XX ⇒ feminino / XY ⇒ masculino) ◆ Em cada cromossomo são encontrados milhares de genes e, por sua vez, milhares de nucleotídeos ◆ Os cromossomos sexuais não são homólogos ➔ Cariótipo: conjunto completo de cromossomos (imagem) ➔ Células haploides (n): 1 conjunto de cromossomos ➔ Células diploides (2n): possuem 2 conjuntos de cromossomos (1 n de cada genitor) ◆ São reduzidas a células haploides para que haja novamente o encontro de gametas n na reprodução sexual ◆ Nessas células pode haver genes que expressam as mesmas características, que “anulam” outro, etc ➔ Genoma: conjunto total de genes ➔ Genótipo (composição de genes do indivíduo) X Fenótipo (expressão desses genes) ➔ Alelos: versões de um mesmo gene ◆ Dominante: sempre se expressam ◆ Recessivo: se expressam quando há 2 alelos recessivos juntos ➔ Homo e heterozigose: ◆ Genótipo homozigoto: herda alelos idênticos de seus genitores ◆ Genótipo heterozigoto: herda alelos diferentes de seus genitores ➔ Nutrigenética: busca conhecer as características genéticas de um indivíduo com o intuito de promover uma dieta personalidade e que esteja de acordo com o seu metabolismo, pré-disposições e etc Apostila 2 - Organização do material genético ➔ Material genético: responsável pela expressão das características individuais herdadas ➔ Ácidos nucleicos: macromoléculas que contém as informações hereditárias capazes de informar sobre a síntese de ptn por aquele corpo; ◆ Nucleotídeos: unidades formadoras dos ácidos nucleicos;forma uma ligação de fosfodiéster nos ácidos nucleicos; são formados por: 1 base nitrogenada (adenina, timina, uracila, guanina ou citosina) ○ Purinas ( 2 aneis de carbono-nitrogênio) : A e G ○ Pirimidinas (1 anel carbono-nitrogênio): C, T e U ○ OBS: DNA (A = T, C ≡ G) X RNA (A = U, C ≡ G) 1 pentose (ribose ou desoxirribose) Grupo fosfato ➔ DNA: material genético dos seres vivos; molécula grande que ficam no núcleo ◆ Humanos: presente no núcleo celular (linear - presença de ptn histonas) e nas mitocôndrias (têm DNA circular, assim como as bactérias → teoria da endossimbiose) ➔ RNA: + simples; ◆ São menores = podem transitar pela célula após serem sintetizados pelo núcleo; ◆ Tipos e funções durante a síntese de ptn RNAm: transcreve a informação do DNA para uma molécula de RNA - codifica as ptn ○ Splicing: processo de amadurecimento do RNAm; ocorre a remoção de sequências transcritas que correspondem aos íntrons (regiões do gene que não existe informação genética); esse processo explica porque um mesmo gene pode produzir ptn diferentes RNAt: transporta o AA para o ribossomo para a realização da síntese RNAr: constitui o ribossomo ➔ “Sentido da vida”: sequencia do DNA é sintetizada na direção 5’ → 3’ ◆ Em uma extremidade da fita do DNA está livre a hidroxila do carbono-5 da primeira pentose e na outra está livre a hidroxila do carbono-3 da última pentose. ◆ Na fita complementar a este sentido é invertido. ➔ Síntese proteica: 1. Gene é transcrito em uma sequência de RNA (RNAm primário) contendo uma cópia da sua sequência de nucleotídeos. É uma sequência que corresponde aos éxons (codificantes; estes vão permanecer no RNAm maduro) e introns (não codificante; por não estarem no RNAm maduro, não ser traduzidos em AA) 2. Ptn ativadoras/repressoras da expressão dos genes participam e possibilitam que a transcrição do gene ocorra. 3. Essas ptn se ligam ao DNA em “regiões reguladoras” e promovem a ligação da DNA polimerase na “região promotora” 4. Após a transcrição, os introns são retirados 5. Splicing ⇒ amadurecimento do RNAm que, agora, contém apenas os éxons 6. RNAm sairá do núcleo para o citoplasma 7. No citoplasma, RNAm será traduzido em uma sequência de AA para formar uma ptn Apostila 3 - Cariótipo, mitose, meiose e gametogênese ➔ Introdução: ◆ Cada espécie possui seu cariótipo ◆ Célula que não está em divisão apresenta moléculas de DNA não duplicadas, emaranhadas e não condensadas ◆ Cromossomo duplicado contém as cromátides irmãs unidas pelo centrômero ◆ Sequência de nucleotídeos do DNA é copiada durante a divisão celular (fase S) ◆ Até que ocorra a anáfase, as cromátides irmãs permaneceram ligadas pelo centrômero ➔ Cariótipo humano: ◆ Humano: 46 pares de cromossomos condensados e compactados 44 autossomos: homólogos - carregam mesmo tipo de informação genética mas não necessariamente as mesmas versões dos genes 2 sexuais: não são homólogos; X e Y; eles se pareiam na meiose pois possuem pequenas regiões homólogas em ambas extremidades (regiões pseudoautossômicas) ◆ Análise de cariótipo: importante para identificar anomalias centrômero: região visualmente mais estreita ○ posição do centrômero: metacêntrico (no meio), submetacêntrico (p < q), acrocêntrico (próximo de uma das extremidades, telocêntricos (na extremidade e com apenas o q; humanos não possuem esse tipo) Braço: parte que vai do centrômero até a extremidade; podem ser curtos (p) ou longos (q) ○ Extremidades são chamadas de telômeros → previnem o encurtamento dos cromossomos durante a replicação do DNA e o envelhecimento Heterocromatina: + condensada; contém mais timina e adenina; não tem gene; ex: centrômero e q do cromossomo Y Eucromatina: - condensadas; contém mais guanina e citosina; tem muitos genes ◆ Métodos de análise de cromossomos: Técnica de bandamento G: tripsina marca padrões nos cromossomos ○ Parte escura ( + T e A) X parte clara ( + G e C) Identificação do locus (“endereço”) do gene a partir das divisões do cromossomo: ○ Processo para encontrar o gene com a anomalia: número do cromossomo → braço do cromossomo (p ou q) → número da região do cromossomo → banda → sub banda ○ Ex: 7g36.3 Técnica de bandamento C: consiste em corar regiões de heterocromatina; identificar anomalias estruturais que envolvam alterações no centrômero FISH: utilizado em cromossomos condensados ou não, estuda as alterações que envolvem uma sequência específica de nucleotídeos do gene mas não identifica as informações do restante do genoma “Pintura de cromossomos”:utilizada em análise de cromossomos de qualquer espécie; sequência de nucleotídeos de um cromossomo autossomo e dos 2 cromossomos sexuais são marcadas com fluorocromos de diferentes cores ➔ Mitose: separação do material genético das células somáticas resultando em 2 células-filhas idênticas e com mesmo número de cromossomos da célula-mãe ◆ Interfase: fase pré divisão; crescimento e duplicação de cromossomos Fase G1: aumento do volume celular e duplicação de organelas Fase S: síntese do DNA Fase G2: aumento do volume celular, síntese de ptn, núcleo delimitado pela membrana nuclear, cromossomos duplicado e não condensados ◆ Prófase: início da mitose; Cromatina se condensa em cromossomos (visível em microscópio) Membrana nuclear se desfaz Formação de fusos em polos opostos Centríolos se afastam devido ao alongamento dos microtúbulos ◆ Metáfase: Desaparecimento da membrana nuclear Cromossomos se fixam nas fibras polares e se aliam individualmente na placa metafásica ◆ Anáfase: Microtúbulos se ligam a estruturas do centrômero (cinetócoros) das duas cromátides Separação das cromátides indo cada uma para um polo Cada polo contém um conjunto completo de cromossomos contendo 1 DNA ◆ Telófase Cromossomos se condensam Cada conjunto de cromossomos que estavam em polos opostos são isolados em novos núcleos Citocinese: divisão do citoplasma ◆ OBS: erros na mitose → geralmente ocorrem na metáfase (desalinhamento dos cromossomos na placa metafásica causando distribuição desigual de cromossomos pelas novas células; célula geralmente morre mas também pode sobreviver e causar expressões anormais de gene) ➔ Meiose: célula-mãe dá origem a 4 células-filhas sexuais contendo metade do número de cromossomos; ocorre quando há reprodução sexual entre eucariotos ◆ Intérfase (igual a da meiose) ◆ Meiose : reducional (diploide - haploide) Prófase 1: ○ Cromossomos se condensam ○ Pares de cromossomos homólogos se alinham ○ Formação de tétrades (cada uma com 4 cromátides) ○ Pode ocorrer crossing-over (troca do material genético entre cromátides não irmãs); confere variabilidade genética ○ Centríolos migram para polos opostos da célula ○ Membrana nuclear se desfaz ○ Pares de cromossomos começam a migrar para a placa metafásica (≠ da mitose) Metáfase 1: ○ Cromossomos homólogos permanecem lado a lado e ficam alinhados na placa metafásica (diminuição da célula-mãe na hora da separação na anáfase) ○ Cada par de cromossomos ( c/ 1 exemplar de cada genitor) pareiam de forma aleatória na placa ⇒ “embaralhamento dos cromossomos”; confere variabilidade genética Anáfase 1: ○ Pares de cromossomos homólogos se encontram na placa metafásica e depois se separam em polos opostos devido ao encurtamento dos microtúbulos ○ Cromátides irmas permanecem juntas (≠ da mitose) por ptn coesinas ○ Cromossomos homólogos se separam com números diferentes de cromossomos dos genitores ⇒ variabilidade genética Telófase 1: ○ Fibras de fuso continuam levar os cromossomos para polos opostos ⇒ cada polo apresentará um conjunto haploide (n) de cromossomos ○ 2 células-filhas com 23 cromossomos (possuem ainda 2 cromátides irmãs) ◆ Intercinese: intervalo entre meiose 1 e 2; não ocorre síntese de DNA ◆ Meiose 2: similar a mitose; equacional (2 haploides - 4 células c/ 23 cromossomos Diferenças da meiose 1 e da meiose 2: apenas na prófase 1 ocorre o crossing over; anáfase 1 os cromossomos homólogos se separam X anáfase 2 ocorre a separação das cromátides irmãs ➔ Gametogênese: processo pelo qual uma célula haploide (n) é formada a partir de uma diploide (2n) ◆ Espermatogênese: homem ➡ espermatozoide São produzidos continuamente milhares espermatozoides por dia ⇒ maior possibilidade de fecundar um óvulo Produção ocorre nos testículos (túbulos seminíferos) Processo 1. Espermatogônia se divide por mitose p/ formar células diploides ; é ela que dá início a prófase 1 → formação de espermatócitos primários 2. Espermatócitos primários terminam a primeira divisão meiótica → formação de espermatócitos secundários (n) 3. Espermatócito secundário se dividem p/ concluir a meiose 2 com a separação das cromátides irmãs → formação de 4 espermátides (n) contendo 23 cromossomos não duplicados 4. Espermátides se diferenciam em espermatozoides maduros ◆ Ovocitogênese: mulher ➡ óvulo Processo 1. Antes do nascimento: células germinativas primordiais se replicam por mitose → formação de ovogônias 2. Antes do nascimento: ovogônias sofrem mitoses → formação dos ovócitos primários que tem sua meiose 1 interrompida (prófase 1) 3. Início da puberdade: ovócitos primários começam a amadurecer de acordo com o ciclo menstrual, porém só 1 termina a sua maturação para se tornar óvulo 4. Ciclo menstrual: cada mês ocorre a ovulação do ovócito primário dando a continuidade a meiose 1 → formação do ovócito secundário (n) e 1 corpúsculo polar (n) dentro do folículo 5. Ciclo menstrual: ovócito secundário inicia a meiose 2 parando na metáfase 2 6. Após fecundação: ovócito secundário termina a meiose 2 e origina 1 óvulo maduro e mais 1 corpúsculo polar ◆ OBS ➡ Principais diferenças: Mulher já nasce com ovócitos primários parados em prófase 1 que só irão amadurecer a cada mês após a puberdade X homens começam a produzir espermatozoides em grande quantidade desde o início da puberdade Mulheres tem número finito de de gametas Mulheres só terminam a meiose 2 após a fecundação ◆ Fertilização: Ovócito formará um óvulo e o terceiro corpúsculo polar; caso não ocorra a fecundação o óvulo se degenera Fecundação ocorre nas tubas uterinas e o óvulo se fixará na parede do útero Fecundação vai gerar um zigoto 2n que vai sofrer várias mitoses Apostila 4 - Replicação do DNA e transcrição do DNA em RNA ➔ Replicação do DNA: ◆ Ocorre durante a intérfase (fase S), onde a célula que vai se dividir precisa duplicar o material genético para depois dividi-lo igualmente na mitose ◆ Célula tenta ao máximo diminuir possíveis erros na duplicação do material genético, porém mutações podem acontecer (sejam elas benéficas ou não) ◆ Replicação semi-conservativa: Usa uma fita-mãe para ser molde da fita-filha ◆ As fitas do DNA são antiparalelas e por isso a nova fita sempre será formada no sentido 5’ → 3’ ◆ Replicação do DNA (fase S) e a transcrição do RNA (fase G1) não são dependentes uma da outra mas não podem ocorrer simultaneamente ◆ “Participantes” importantes: helicases (separam as fitas de DNA), ptn SSB (mantém as duas fitas de DNA separadas), topoisomerases (enzimas que diminuem a tensão da alfa-hélice), DNA polimerase e enzimas de reparo ◆ Processo: 1. origem da replicação: marca o ponto onde deve ocorrer a duplicação e onde chega a helicase para separar as fitas de DNA; formação das bolhas de replicação 2. Helicase inicia a separação das fitas de DNA; cada uma das duas fitas terá sua sequência de nucleotídeos copiadas → gera 2 moléculas de DNA compostas por uma fita molde e uma recém-sintetizada 3. Após a separação das fitas, as ptn SSB vão entrar em ação para manter essas fitas separadas e estabilizadas para dar continuidade ao processo 4. DNA-topoisomerase entra em ação evitando o enovelamento da fita dupla em excesso por tensões que são criadas com a separação da dupla-hélice 5. DNA-primase cria pontos de ancoragem com RNA para a DNA-polimerase trazer os primeiros nucleotídeos formadores da nova fita; esse segmento de RNA inicial é denominado “primer” ou “iniciador” e é ele quem fornecerá a extremidade 3’-OH livre 6. DNA- polimerase cria fita a partir da colocação de novos nucleotídeos no sentido 5’→ 3’ por meio do pareamento de bases com a fita molde 7. A replicação do DNA é bidirecional e por isso ocorre a replicação contínua de uma das fitas e descontínua de outra (nesta existe a formação dos fragmentos de okazaki que futuramente serão reunidos pela enzima ligase) 8. DNA-polimerase substitui os iniciadores/primers de RNA por desoxirribonucleotídeos; se houver erro durante a síntese da fita complementar a DNA-polimerase irá reparar 9. DNA-ligase une a fita descontínua 10. Formação das 2 fitas obs: enzima telomerase realiza a manutenção do comprimento dos cromossomos a cada ciclo de divisão celular → evita o “envelhecimento” (causado pelo encurtamento do cromossomo) ➔ Dogma central da biologia molecular ◆ Conjunto de processos que explica como a informação codificada no DNA determina um produto funcional ◆ DNA → RNAm → PTN DNA: tem informações para a síntese de ptn RNAm: transcreve a informação p/ síntese de ptn e a leva p/ os ribossomos onde ela será traduzida Ribossomo: onde ocorre a tradução das informações e a formação das ptn/ sequência de AA (produto funcional) ◆ Expressão gênica ➔ Transcrição do DNA em RNA ◆ Primeira etapa da síntese de ptn ◆ A transcrição ocorre no núcleo ◆ Fita de RNAm fabricada a partir de uma fita molde do DNA (gene) ◆ Processo: 1. RNA-polimerase vai se ligar no DNA até encontrar a região promotora (indica quando um gene está começando); essa enzima poderá se ligar a região promotora e iniciar a transcrição do gene a partir de um filamento molde de DNA 2. Enzima abre o dna e faz com que uma das fitas possa servir como fita molde 3. RNA-polimerase vai percorrendo a fita molde, pega bases nitrogenadas que estão livres no núcleo e as une com as bases nitrogenadas do RNAm 4. Pareamento das bases (A = U e G ≡ C) 5. A leitura do DNA pelo RNA se dá na direção 3’ → 5’ enquanto a síntese da fita será 5’ → 3’ 6. RNA-polimerase continuará lendo nosso gene até encontrar uma sequência de término do gene 7. RNA-polimerase se desgruda 8. A fita de RNAm vai para o núcleo 9. DNA é fechado 10. RNAm amadurece (splicing) e, ao se tornar maduro pode ir para o citoplasma celular OBS → Splicing: - ocorre a eliminação dos introns e a permanência do éxons; esse processo permite a reorganização dos exons, possibilita a formação de uma ptn diferente e, ainda, protege o RNAm da degradação e da tradução dele em uma sequência de AA; introns tem função reguladora Apostila 5 - Tradução RNAm ➔ O RNAm transcrito tem a informação que ainda não representa o produto funcional do gene e, por isso deve ser traduzida em uma sequência de AA que, futuramente, se tornará uma ptn funcional ➔ Tradução: utilização do RNA formado na transcrição p/ formar ptn ➔ Código genético: é universal; conjunto de informações que esclarece: ◆ 3 nucleotídeos = 1 Códon = 1 AA ◆ Códon de início ⇒ metionina (AUG) ◆ Códon de parada/ stop codon ⇒ UAA, UAG e UGA ◆ Existem 20 AA que são gerados a partir da combinação das bases nitrogenadas (64 combinações diferentes) ⇒ AA pode ser codificado em mais de 1 códon ⇒ código redundante/degenerado ◆ A ptn formada depende da ordem dos AA que a formam ➔ Necessita-se da participação dos ribossomos (“fábrica de ptn”) e de RNAt ➔ Processo: 1. Subunidade menor do ribossomo reconhece uma parte do RNAm e se liga nessa região 2. Subunidade menor do ribossomo se desloca pelo RNAm em busca de um códon de início 3. Quando o códon de início é encontrado, um RNAt preso na subunidade maior do ribossomo com um anticódon UAG em sua base liga-se no códon AUG do RNAm 4. Outro RNAt se liga ao sítio A e pareia com o códon 2 do RNAm seguindo a regra de ligação de códons e anticódons 5. A presença de 2 RNAt com 2 AA possibilita a formação de uma ligação peptídica entre esses AA 6. Apos a instauração da ligação peptídica, o RNAt que está no códon um é liberado e o segundo códon vai para o sítio p 7. Ribossomo percorre por mais uma parte do RNAm chegando ao códon 3 8. Um novo RNAt contendo um anticódon compatível com o códon do RNAm irá chegar ao sítio A para formar uma nova ligação peptídica entre os AA 9. Esse processo segue acontecendo até o momento em que o ribossomo encontra com o stop códon ➔ Produto final da tradução: um polipeptídeo que dará origem ao produto funcional da expressão dos genes codificantes, uma ptn Apostila 6 - Mutações genéticas ➔ Mutação: qualquer alteração na sequência de DNA e que podem ser transmitidas para as próximas gerações ➔ Mutações gênicas: ◆ Causam alterações no fenótipo encontradas geralmente em unidades funcionais do DNA ◆ Indivíduo portador do alelo ancestral/selvagem s/ mutações = fenótipo padrão X Indivíduos com alelo mutante = fenótipo diferente ◆ RNAm leva uma sequência mutante que pode resultar em uma tradução de uma ptn diferente; um único ribonucleico pode gerar grandes alterações ◆ Mutações no DNA ocorrem de forma espontânea por erros durante a replicação e/ou por agentes físicos( Raio X e luz ultravioleta ), químicos ( subs similares a bases nitrogenadas que podem ser incorporadas no DNA) e biológicos (vírus) ◆ Mutações podem ocorrer durante as divisões das células germinativas, das divisões mitóticas das células de um embrião, nas células somáticas ◆ Existem mutações benéficas ou deletérias ⇒ conferem variabilidade genética ◆ Polimorfismo: resultam na expressão de características físicas e metabólicas que não sejam patogênica, não sofrem pressão seletiva e podem apresentar uma frequência maior que 1% da população ◆ Tipos de mutações gênicas: C/ troca de sentido:substituição de um nucleotídeo que leva a codificação de um AA diferente; altera a ptn final S/ sentido:substituição de um nucleotídeo que resulta em um códon de parada; interrompe a tradução da ptn Silenciosa: troca de nucleotídeos que resultam no mesmo AA; não altera a ptn final Por inserção de nucleotídeos: insere um ou + nucleotídeos na sequência de DNA, que pode causar um deslocamento da leitura e mudar a sequência de AA no ponto de inserção ○ S/ mudança na matriz de leitura: envolve a inserção de um número de nucleotídeos múltiplos de 3; todos os AA codificados após ele serão os mesmos ○ C/ mudança na matriz de leitura: envolve a inserção de um número de nucleotídeos não múltiplos de 3; todos os AA codificados após ele serão alterados Por deleção de nucleotídeos: sequência do alelo mutante apresenta nucleotídeos ausentes quando comparado com o alelo ancestral ○ S/ mudança na matriz de leitura:envolve a deleção de um número de nucleotídeos múltiplos de 3; todos os AA codificados após ele serão os mesmos ○ C/ mudança na matriz de leitura: envolve a deleção de um número de nucleotídeos não múltiplos de 3; todos os AA codificados após ele serão alterados Reversa: substituições ou inserções de nucleotídeos ocorrendo no local de uma mutação anterior causando a volta da sequência original Supressoras: Segunda mutação em outra região do genoma que, de alguma forma, modifica ou suprime o efeito de outra mutação Dinâmicas: envolvem variações no número de repetições de uma sequência de nucleotídeos dentro de um gene; geram instabilidade no número de repetições que podem aumentar ou diminuir ao longo das gerações; comum em doenças hereditárias ➔ Anomalias Cromossômicas: alterações em segmentos ou no cromossomo inteiro que correspondem a centenas de genes; raramente apresentam um defeito único no indivíduo ◆ Numéricas: Número de cromossomos diferente da espécie → heteroploidia Euploidias: número de cromossomos é múltiplo exato do número haploide (n) da espécie Aneuploidias número diferente de cromossomos não é múltiplo do número haploide da espécie; ex: síndrome de turner (45,X), síndrome de Klinefelter (47,XXY), síndrome de down (47, XX + 21 ou 47,XY = 21)... ◆ Estruturais: quebra ou reintegração incorreta de segmentos cromossômicos, podem ser balanceadas, não balanceadas ou translocações Transgênicos: ➔ Organismos modificado geneticamente por genes de outro organismo ➔ Transgênicos ≠ organismos geneticamente modificados ➔ Terapia genica: transcreve o gene correto p/ expressar a ptn; dá a possibilidade de um organismo sintetizar uma ptn que ele não sintetizava ➔ Insulina: ◆ Cópia da insulina humana → introduz a insulina na molécula do plasmídeo bacteriano → corta com enzima e introduz a sequência do gene → enzima ligase → coloca os plasmídeos na bactéria → bactéria sintetiza a ptn e produz a insulina humana ➔ Alimentos transgênicos: ◆ toxinas bacterianas tornam possível que a planta que expresse essa toxina seja mais resistente a pragas ◆ Transgênico = + resistentes = - agrotóxicos e - perdas ◆ OBS: é normal ter intolerância e alergia ao alimento, portanto essas reações nem sempre são cupka dos transgênicos ➔ Engenharia genética: busca obter, amplificar e manipular fragmentos específicos do DNA ◆ DNA recombinante: combina DNAs de 2 organismos diferentes ◆ DNA doador: tem a amostra do gene ◆ DNA vetor: plasmídeo e/ou bacteríofago ◆ Enzimas de restrição: reconhecem sequências específicas de nucleotídeos → corta o DNA apenas nas sequencias selecionadas; são produzidas naturalmente por bactérias; grupo metil (inibe a transcrição do gene)