Laboratorio Malattie Parassitarie PDF

Parassi& con larve nelle feci: strongili respiratori e nel cane strongiloides stercoralis. Protozoi troviamo giardia, trofozoita (in caso di diarrea profusa) e le cis&. Apicomplexa come, ad esempio, i coccidi dove troviamo le oocis& es. pollo. Cane e ga>o possono avere sarcocis&s e troveremo ovocis&...

Parassi& con larve nelle feci: strongili respiratori e nel cane strongiloides stercoralis. Protozoi troviamo giardia, trofozoita (in caso di diarrea profusa) e le cis&. Apicomplexa come, ad esempio, i coccidi dove troviamo le oocis& es. pollo. Cane e ga>o possono avere sarcocis&s e troveremo ovocis& e sporocis&. Elemen& parassitari nelle feci variano in base al peso specifico in elemen& pesan& e leggeri: - Pesan&: uovo di cestodi pseudofillidei e trematodi - Leggeri: quasi tu>e le ovocis&, specie coccidiche tranne una che infe>a il cavallo, quasi tu>e le uova di nematodi, cis& di giardia e uova dei cestodi ciclophillidei. Le ovocis& di giardia se messe in soluzione troppo densa si modificano e non sono più riconoscibili. Flo>azione: analisi qualita&va. Mescolo campione fecale con una miscela a peso specifico più elevato, per questo bisogna sapere se sono elemen& leggeri o pesan&. Si prende un pochino di campione, si me>e in un matraccio e ci si versa la soluzione con peso specifico più elevato rispe>o alle uova che voglio trovare. Una volta miscelato passo tu>o in un colino per togliere le impurità e verso la miscela in un cilindre>o di vetro formano una cupola convessa all’apice, vi appoggio sopra il vetrino ed aspe>o circa 20 minu& in modo che le uova salgano verso l’alto ed aderiscano al vetrino. Prendendolo lateralmente lo appoggio su un vetrino portaoggeO ed osservo il tu>o al microscopio. Per quasi tuO tranne fasciola e i paramphistomidi che si usa sedimentazione. Anche per cis& protozoarie. Soluzioni: - Bassa densità: hanno un peso specifico più basso, sono più economiche e la più usata nei paesi la&ni è la soluzione satura di NaCl che ha un peso specifico di 1,2. Gli svantaggi sono la rapida cristallizzazione (circa 30 minu&). Nei paesi anglosassoni si usano soluzioni a solfato di zinco al 33% che hanno costo maggiore e un peso specifico di 1,18. Non cristallizza e non si hanno modificazioni delle cis& di giardia. - Alta densità: solo per ricerca di elemen& pesan&. La flo>azione è ada>a per uova ad alta densità più piccole di fasciola e paramphistomide per cui si usa la tecnica della sedimentazione. Sono iodio mercurato di potassio non più usato a causa dell’impa>o ambientale del mercurio oppure Solfato di zinco al 38% con peso specifico di 1,35 per uova trematodi (no fasciola e param.). UPG = uovo per grammo di feci Sedimentazione: analisi qualita&va. Sfru>a il principio per cui gli elemen& parassitari in un liquido con peso specifico minore tendono a sedimentare verso il basso. Si usano circa 2 pale>a&ne di feci, circa 4 g inserite nel cono di sedimentazione, viene riempito con il liquido (anche acqua) fino a circa metà/3/4 e aggiungo due gocce di twin, un tensioaOvo in grado di facilitare la disintegrazione del campione fecale quando giro con la paleOna, aspe>o 20 minu& poi svuoto la parte del surnatante senza togliere il sedimento, riempio nuovamente con acqua e con&nuo così finché l’acqua non è trasparente e vedo il sedimento infondo. Svuoto il cono dall’acqua e il sedimento lo me>o sulla piastra e osservo allo stereoscopio. Si usa per fasciola, paramphistomidi e tuO gli elemen& parassitari che non si possono me>ere in evidenza con le soluzioni flo>an&. Non si u&lizza il blu di me&lene come colorante altrimen& coloriamo tu>o di blu e non è più possibile fare la differenziazione es tra fasciola e paramphistomidi che si riconoscono per il colore. Questa tecnica si usa negli animali adul&. Bermann: analisi qualita&va. Tecnica d’elezione per la diagnosi di strongiloides stercolralis nel cane e nel ga>o e in tuO quei casi in cui nelle feci troviamo la larva L1 come gli strongili respiratori. È composto da un bara>olo di plas&ca di 10/15 cm opaco per evitare il passaggio della luce dato che le larve sono fotofobiche, un imbuto di pla&ca o di vetro dove tramite una gommina c’è una prove>a. L’imbuto viene riempito fino a metà di acqua e vi viene posta una re&na dove si inserisce il campione fecale che dev’essere metà a conta>o con l’acqua e metà con l’aria appendendolo ad una bacche>a che viene messa in trasversale sull’apertura. Serve anche una bacche>a di vetro che vada fino dentro l’acqua per evitare la formazione di bolle che potrebbero impedire il passaggio delle larve. Sopra si me>e un tappo per evitare la dispersione dell’odore ma senza chiuderlo. Si sfru>a l’idrofilia delle larve che tendono a spostarsi verso l’acqua. Si aspe>a circa 12/24 ore ma per pra&cità quasi sempre 24. Al termine del tempo si preleva il fondo della prove>a e si me>e in una piastra per osservarla allo stereoscopio. Le larve possono essere bloccate tramite l’u&lizzo del liquido di Lugol (una goccia) che le farà apparire arancioni. Ha una sensibilità del 100% quindi anche solo 1 larva nel campione viene messa in evidenza dalla tecnica. Mc master: analisi quan&ta&va. Lo scopo della tecnica è calcolare alla fine di tu>o le UPG per iden&ficare la gravità dell’infestazione parassitaria. U&lizza un supporto in plas&ca in cui ci sono due camere di cui ognuna fornita di un re&colato composto da 6 file ver&cali. Al termine della tecnica bisogna contare gli elemen& parassitari in ogni fila di re&colato e mol&plicarli per determina& fa>ori. Si prepara come la flo>azione ma servono 2g di feci pos& in soluzione con 28 ml di soluzione flo>ante che può variare in base al peso specifico dell’elemento che cerco ma solitamente si usa la soluzione flo>ante di cloruro di sodio (1,2 peso specifico). Con una pipe>a si prende il contenuto e tenendo una pressione costante si riempie ogni camera partendo dall’angolo, la pressione va mantenuta per evitare la formazione di bolle che potrebbero rendere ina>endibile il test. Se il conteggio viene effe>uato su una singola camera, si valutano gli elemen& parassitari e si mol&plica prima per 100 (noi facciamo 2 g di feci per 28 ml di soluzione flo>ante, per noi il rapporto è 0,14 che si valuta 0,15, considerando che il contenuto in ml in ciascun re&colo è 0,15 quindi 0,15/0,15 viene 100) e poi per 2 (perché sono i grammi di feci). Se conto su due camere mi viene 0,30 il quan&ta&vo di ml e quindi mol&plica prima per 50 e poi per 2. Si legge al microscopio oOco ma senza ingrandire fino a 40x perché sennò si rompe. Mini flotac: tecnica quan&-qualita&va perché anche in questo caso dopo si fa flo>azione. Si prende il mini flotac un apparecchio messo appunto da un professore di vet di Napoli, si apre girando, il so>o si riempie con 18 ml di soluzione flo>ante (può essere fa>o anche a 38). Nel tappo c’è un conino viola che va riempito con il campione fecale e quindi perme>e di non pesarlo perché è già la quan&tà giusta, prendi il tappo lo giri, chiudi e tramite il pirulo rosso inizi a stantuffare per 1/2 minu& finché non si è omogenizzato il composto. Le camere sono cos&tuite da 2 pezzi di plas&ca uni& ad incastro girando, c’è una chiave di plas&ca da inserire sopra, con una pressione costante dall’angolo si riempiono le due camere. Aspe>o 10/20 minu& per far si che le uova salgano e poi giro la chiave per dividere le due semi-camere inferiori dalle superiori. Le inferiori non vanno usate perché vi rimane il sedimento mentre le superiori si. Si legge al microscopio oOco. La misurazione con micrometro: - ObbieOvo 40x: devo prendere il numero delle tacche del micrometro che corrispondo all’elemento parassitario e lo mol&plico per 2,6 - ObbieOvo a 10x: devo prendere il numero di tacche del micrometro che corrispondono all’elemento e lo mol&plico per 9,8. Diff Quick: colorazione standard tramite passaggio in 3 liquidi in cui in ogni liquido per 30 secondi. Il primo è un fissante fa>o da metanolo ed etanolo, il secondo la fuxina (un colorante comune), terzo il blu di me&lene poi passi in acqua per risciacquare e lasci asciugare. Diagnos&ca Ascaridi: flo>azione su animali giovani, entro 6 mesi o animali che vivono in canili/gaOli. Uova con peso specifico di 1,09. Uovo di toxascaris è ondulato dentro, la morula non raggiunge mai la parete dell’uovo ed esternamente (strato proteico) è liscio mentre in canis e ca& la morula raggiunge la parete, esternamente è mammellonato. Kit di diagnosi precoce che ci perme>ono di fare diagnosi anche prima dell’eliminazione dello stadio diagnos&co ricercando an&geni elimina& tramite le feci durante il periodo prepatente (anche per strongili gastrointes&nali di cane e ga>o): toxocara 14-21 gg per transplacentare e 30-40 gg per le altre vie, in ca& 6-8 se> mentre leonina 8 se>. Periodo patente tu>e 4.6 mesi. Uovo di toxocara canis misura 85 x 75 è rotondeggiante e morula occupa tu>o uova, ca& 65 x 75 mentre leonina è 75 - 85 x 60-75 facilmente confondibile con ciste di cistoisospora canis che è molto grande. In caso si posi&vità di un cane si consiglia di ripetere gli esami copromicroscopici per valutare le dimensioni o usare PCR per essere sicuri corre>a diagnosi. Più a rischio i cani da caccia e da campagna che entrano in conta>o con ospi& paratenici o cani alimenta& con carni crudi e poco co>e. Animali da reddito flo>azione ma voglio anche la quan&ta&va come MC master, flotac e mini-flotac anche se il rischio è alto in ogni caso, lo fai solo se ci sono adul& nell’intes&no in animali giovani sempre so>o i 6 mesi d’età. Suino: coproparassitologica nelle macroascaridiosi e sierologica nelle microascaridiosi con Test ELISA. Sierologia perché ascaris sum è simile ad ascaris lumbricoides (uomo) dal punto di vista an&genico. Livello superiore a 1000 UPG è correlato a sintomatologia clinica ma posso avere casi gravi anche con basse UPG. Forma più ovalare, parete spessa Equino: come tu>e le altre, flo>azione e quan&ta&va come MC master, flotac e mini-flotac. Controllare puledri da 3-4 mesi a 1,5 anno di età. Le specie sono parascaris univalens (sembra nuova) e parascaris equorum, possono accoppiarsi tra di loro e differiscono solo per il numero di geni. Polli: flo>azione ma difficile diagnosi differenziale tra ascaridi ed Heterakis in quanto le uova sono molto simili solo che quelle di acaridi sono leggermente più grandi 78 x 48. Strongiloidosi: S. papillosus entro i 6 mesi per i bovini e i 9 mesi per gli ovini, 1-3 seOmane per trasmissione trans-la>ea. S. westeri equini meno di 6 mesi, da 1-2 seOmane in caso di trans-la>ea. S. ransomi è nel suino con trasmissione trans-placentare. Negli animali da reddito flo>azione con soluzione a bassa densità e uova trasparen:, pare: soano o se flo>ano le larve si rompono e non sono riconoscibili. Nelle feci di animali parassita& ci possono essere sia L1 rabditoidi che L3 strongiloidi: - L1 200-380 micron con esofago bulbare, una corta cavità buccale ed evidente primordio genitale con coda corta - L3 500-700 micron con esofago filariforme e coda dentellata (arancioni se colorate con Lugol) Per i test in vivo si u&lizzano anche sierologici basa& su test elisa e immunofluorescenza indire>a. Strongilosi: uova con parete soOle e contenuto morulato ne>o e dis&nto in feci fresche. - A.caninum 55-75 x 35-50 µm. - A. tubaeforme 65-70 µm - U. stenocephala 65-80x40-50 µm cane e ga>o la diagnosi con flo>azione con soluzioni a bassa densità. Se le feci non sono fresche si inizia a sviluppare la larva che u&lizzerò per la differenziazione tra specie. Equidi: tu>e l’età, spesso la diagnosi è clinica perché di solito le lesioni più gravi sono date dalle larve e quindi sono copronega&vi perché non ho ancora lo stadio diagnos&co. Nell’infestazione cronica, invece, faccio flo>azione con soluzione satura di cloruro di sodio, mc master e mini flotac, >1000 UPG infestazione marcata/grave, 500-600 UPG infestazione media, ono la dis&nzione di generi, si procede per questo alla coprocoltura determinando la morfologia delle L3. Posso fare anche PCR mul&plex che consente di accertare contemporaneamente la presenza e l’iden&ficazione delle specie più comuni. In UK c’è un test elisa che misura i livelli sierici di Igg verso 3 an&geni ricombinan& delle specie più diffuse di ciatostomini a livello mondiale, cut off 14,37 se ho tra>ato animali nei 4 mesi preceden& posso avere ancora an&geni presen&. Importante fare la FEC (Fecal Egg Count) prima del tra>amento e 10-14 giorni dopo il tra>amento per la diagnosi di an&-elmin&co resistenza. Suini: uova di Hystostrongylus rubidus indis&nguibili da quelle di Oesophagostomum. Valutare scrofe a metà del primo periodo di gestazione e dopo circa 15 gg dal parto e in primavera e autunno. SuineO svezza: dopo 15-20 giorni. Dove c’è allevamento a ciclo completo anche magroni a metà ingrasso e scrofe>e prima di entrare in produzione. Importante campionare le madri. Si effe>ua esame quan&ta&vo tramite mc master, flotac o mini flotac u&lizzando soluzioni flo>an& con peso specifico che va da 1,2 a 1,3 e posso fare anche flo>azione. Rischio zootecnico con + di 200 UPG, infestazioni gravi 1000 UPG. Leprodi: direi anche no Ruminan&: molto diffusa al pascolo, sopra>u>o animali giovani al primo pascolo, gli adul& sono serbatoi. Sopra>u>o in primavera ed autunno, nei piccoli ruminan& + infesta& in parto e la>azione. Per diagnosi coprologica qualita&va con flo>azione con soluzione a bassa densità. Usare anche quan&ta&ve per decidere se tra>are o no come McMaster, Flotac e mini-flotac, in un campione fecale fresco si può trovare L3 che si dis&ngue da strongyloides per la presenza della doppia cu&cola. Uovo di Nematodirus 180-200 µm, pochi blastomeri e quasi tuO centrali, ai poli c’è spazio. Forma a palla di rugby. Per gli altri non si dis&ngue morfologia uova quindi si col:vano fino a L3. Servirebbe PCR mul&plex ma non c’è per ques&, e PCR normale ne evidenzia solo 1 &po. In caso di ostertagiosi si può valutare anche pepsinogeno ema&co, nelle specie ematofaghe si fa esame del sangue per valutare anemia, valore di proteine sieriche, rapporto albumine/globuline. Trichinellosi Controllare cavallo, maiale, cinghiale e cervi. In vivo fare sierologica con test Elisa (+ u&le in uomo, in animale per valutare presenza o meno in aree o allevamen&) oppure esame biop&co gastrocnemico per cercare larve endomuscolari. L1 matura è 0,6-1,2 mm e 30 micron. Negli animali macella: o decedu: fare: - Esame trichinelloscopico (in passato) si osservano al microscopio frammen& di muscolo compressi tra due vetrini avvita& e controluce si vedeva la presenza delle larve, se livello d’infestazione è basso può non essere presente in sede soma&ca. Ha bassa sensibilità e se la  specie è acapsulata più difficile definire la presenza. Se capsulata e calcifica si può confondere con sarcosporidiosi, cis&cercosi ed echinococcosi. - Esame istologico e con diges&one in vitro dei campioni muscolari con soluzioni a base di HCl e pepsina alla temperatura di 37-40 gradi, filtrate e centrifugate, ed esame microscopico del sedimento con isolamento delle larve che devono poi essere iden&ficate mediante PCR perché possono esserci larve ipobio&che di altri parassi& (ascaridi o strongili). Siccome difficile iden&ficare trichinella si manda all’is&tuto superiore di sanità per esame molecolare. Suino 1 g prendo pilastri del diaframma perché molto parassita& e sono scar& della macellazione mentre nell’equino 5 g di muscolo scheletrico di massetere o lingua. Su pool di animali. Trichuris Uova a limone con due tappi prominen& ai poli e di colore giallo brunastro con superficie liscia e uovo pieno 72,8 x 46,8. Frequente in cane e suino meno in ruminan&. Diagnosi copromicroscopica quan&ta&va con soluzioni a bassa densità (NaCl o Solfato di zinco al 33%). Nei suini UPG >= di 500 è grave mentre nei ruminan& 100-200 UPG danno zootecnico, isolamento dei parassi& all’esame necroscopico in base anatomica (grosso intes&no) e sono a frusta con estremità craniale più soOle che infilano nella mucosa. Capillariosi Uova quasi incolore (giallo chiaro chiaro) con tappi polari meno sporgen& di trichuris e che possono essere sulla stessa linea o sullo stesso lato, guscio disegnato e non completamente pieno. - Uccelli (esofagea): diagnosi nell’animale vivo esame copromicroscopico per flo>azione con soluzioni a bassa densità. Nell’animale morto isolare con del raschiato della muscosa intes&nale o esofagea. - Respiratoria cane e ga>o: flo>azione con soluzioni a bassa densità. Si può usare PCR o C. Aerophila: 60-75 µm x 25-40 µm, forma a bo>e con l’embrione che riempie completamente l’interno dell’uovo, poli spesso asimmetrici con assenza di anelli e la parete è striata con fi>a rete di creste e anastomosi. Si trova nei bronchi. o C. Boehmi: 56 x 30 micron, punteggiata sulla superficie dell’uovo, i poli rimangono vuo: e all’interno si può vedere la larva in formazione quindi le uova non sono tu>e piene perché ci me>ono meno a diventare mature. Si trova in vie nasali e seni nasali. - Urinaria: Pearsonema Plica 60-68x24-30 micron (vescica, ureteri e bacine>o renale) esame del sedimento urinario per evidenziare uova, larve o frammen& di adul& (nei casi gravi). Uova associate ad ematuria lieve con cell. epiteliali. Sedimento o>enuto per cistocentesi e si fa flo>azione, flotac o mini-flotac con soluzioni a bassa densità. Si può fare anche ecografia addominale e cistoscopia. Fare diagnosi differenziale da Dioctophyma renale che ha uova di colore giallo o marone con guscio spesso, dimensioni 60-84 x 39-52 micron e da contaminazioni fecali. Malassezia: citologica (rapido e specifico ma con bassa sensibilità) tramite tampone sterile in caso di o&te esterna, per impressione sulle aree con maggior produzioni di sebo in caso di derma&& e scotch test con derma&& furfuracee, importante perché essendo un patogeno opportunista è normalmente presente nel padiglione auricolare è importante sapere quanta ce n’è. Valore soglia 9-10 blastomeri a 40x, i blastomeri hanno forma di cacio cavallo. Questo test ha rapida a>uazione ed elevata specificità ma bassa sensibilità. Coccidiosi Ruminan&: prevalentemente animali giovani, rara negli adul&. CapreO e agnelli tra 4-7 seOmane, bovini tra 3 seOmane e 6 mesi fino a 1 anno. Sopra>u>o nel periodo dello svezzamento. Importante la diagnosi precoce se ci sono casi di mortalità. Si fa flo>azione e McMaster ma anche PCR. Suini: diagnosi a volte difficoltosa, sintomi precedono emissione oocis&. Cavallo: diagnosi difficoltosa per l’elevato peso specifico delle oocis& che richiede sedimentazione e flo>azione con soluzioni ad alta densità. Cane e ga>o: oocis& all’esame copromicroscopico per flo>azione. Oocis& hanno molto basso peso specifico, si usano soluzioni flo>an& a bassa densità come soluzione satura di NaCl (1,2). Sintomatologia può comparire anche nel periodo prepatente. Oocis& cistoisospora > 30 µm, felis e canis invece < 30 µm Metastrongili Nematomi cardiopolmonari ga>o - Aleurostrongilus abstrusus: è un metastrongilo, Baermann. L1 360-400 µm con apertura buccale centrale ed estremità terminale a S provvista di due incisure, una dorsale e una ventrale con una breve appendice spinosa. - Troglostrongilus brevior: è una metastrongilo, Baermann. L1 300-360 µm con apertura buccale decentrata ed estremità terminale affusolata con 2 incisure, una dorsale e una ventrale ma meno profonde. Consigliabile fase esame di feci da almeno 3 campioni di feci raccol& consecu&vamente o nell’arco di una seOmana per aumentare la sensibilità del test. le L1 si possono trovare anche nel liquido prelevato tramite lavaggio tracheo-bronchiale o bronco-alveolare, spesso come riscontro accidentale durante la ricerca di altri agen& patogeni. Possono essere concomitan& nello stesso animale e si possono dis&nguere anche con PCR. Aleuro sta in alveoli e bronchioli, adulto 5-6 mm Troglo sta in bronchi e bronchioli, adulto Nematodi polmonari cane - Crenosoma vulpis: adulto a trivella. Per la diagnosi u&lizzare la tecnica di Baermann. L1 è 240- 310 µm, coda dri>a e appun:ta con esofago molto meno consistente, quasi non si vede. Diagnosi differenziale con strongiloides e larve di ancilostoma&di che sono larve rabditoidi con esofago bulbare. Sta in trachea, bronchi e bronchioli. - Oslerus (genere) osleri è la specie che dà la patologia oslerosi. L1 finisce con restringimento lunga 230-265 µm e si ritrovano arrotolate, estremità posteriore a forma di S con aspe>o leggermente ripiegato a causa di una costrizione anteriore all’estremità terminale - Filaroides (genere) hir& è la specie. In generale arrotolate a spirale, lunghe 250 µm con estremità terminale ad ago No Baermann perché le larve sono poco mobili, meglio strisci fecali a fresco. Non si può fare diagnosi clinica. Fare più strisci per diagnosi perché l’espulsione delle uova è intermi>ente. Flo>azione con soluzioni a bassa densità ma va le>a velocemente perché le larve a conta>o con la soluzione flo>ante si disidratano e diventano difficilmente riconoscibili. Si differenziano dalle alte larve L1 per la forma ad S e l’assenza di spine (angiostrongilus vasorum). Nematode cardiaco cane e ga>o Angiostrongylus vasorum: si localizza nel cuore destro e arteria polmonare. Iden&ficazioni L1 nelle feci con Baermann, no flo>azione e striscio fecale a causa di modificazioni delle larve a causa delle soluzioni pesan&. Si può fare anche tamponi, lavaggi bronco-alveolari o aspira& polmonari per recuperare L1 dall’albero respiratorio ma sono metodi invasivi, laboriosi che richiedono anestesia e con scarsa sensibilità. L1 misurano 310-400 µm e sono larghe 14-16 µm, presentano un bo>one cefalico anteriore e un’estremità caudale appun&ta con andamento ricurvo e spina dorsale. Bisogna fare differenziazione da altri nematodi respiratori e dalle larve di Strongyloides stercoralis e degli ancilostomidi che possono essere presen& quando il campione ha più di 12-24 ore. In commercio è disponibile un kit rapido che rileva an&geni circolan& di A. vasorum nel siero o nel plasma dei cani infesta&. È facile da usare, fornisce risulta: a>endibili in pochi minu: con buona sensibilità ed elevata specificità. Se il kit rapido è nega&vo usare Baermann perché non si può escludere che risul&no nega&vi. L’impiego della PCR è u&le nel caso di feci in cui le larve non siano più vitali e le cara>eris&che morfologiche e morfometriche siano alterate (es per larve congelate) o in generale in caso di iden:ficazione dubbia. Nematodi cardiorespiratori animali da reddito Piccoli strongili broncopolmonari ovicaprini Nell’animale vivo isolamento L1 300-400 micron con Baermann, flotac e mini flotac e possibile iden&ficazione microscopica delle specie in base alla morfologia dell’estremità caudale: - Protostrongylus rufescens: coda appun&ta e lunga - Muellerius capillaris: coda ondulata sormontata dorsalmente da una piccola spina - Cystocaulus nigrescens: coda suddivisa in due par&, una più grossa con una spina dorsale ed una terminale con spina dorsale e ventrale. - Neostrongylus linearis: coda molto simile a Cystocaulus ma più dri>a Anche in base a sintomatologia clinica e necroscopica con isolamento dei parassi&. Grandi strongili broncopolmonari ovicaprini - Dictyocalus filaria: sospe>o clinico ed analisi coprologica con Baermann, Flotac e Mini-flotac su soggeO sintoma&ci e sulle rimonte (compra&). Ricordarsi che i sintomi compaiono nel periodo prepatente e sono tosse e fame d’aria. Larve più grandi e meno numerose dei piccoli strongili, coda a forma di dito e bo>one craniale. Dic&ocaulosi respiratoria bovina Dictyocaulus viviparus: esame coprologico con Baermann, PCR ed ELISA. Si autorisolve non riesce a completare il ciclo ambientale in Italia ad eccezione delle zone appenniniche. Dic&ocaulosi respiratoris equina Dictyocaulus arnfieldi: si possono trovare sia uova larvate che L1 quindi fare flo>azione che Baermann. Asini non mostrano segni clinici solitamente tranne quelli più a rischio come anziani e immunocompromessi anche a causa di terapie prolungate con cor&costeroidi. Cavalli più probabilità di sviluppare forme cliniche molto gravi. In trachea e grossi bronchi. Inserirli sempre in diagnosi differenziale dei parassi& respiratori degli equidi. Nematodi polmonari suino Ciclo indire>o con lombrichi mentre in cane e ga>o ci sono i gasteropodi. Si localizzano in medi e piccoli bronchi. Rilasciano uova larvate con guscio spesso e rugoso nelle feci, si fanno 3 sedimentazioni in consecu&vo e poi si fa flo>azione con soluzioni ad alta densità (soluzione satura di magnesio o di zinco). Minor frequenza anche con cloruro di sodio ma probabilmente ha una sensibilità più bassa in quanto le uova hanno un peso specifico medio. Nematodi polmonari uccelli Syngamus trachea: uova 90x50 micron, elliazione. Esame necroscopico nei soggeO decedu&. Rosso perché ematofago. Nematodi cane e ga>o Thelazia callipaeda: adul& evidenzia& facilmente con visita ovalmologica somministrando alcune gocce di aneste&co locale (lidocaina) e ribaltando la terza palpebra. Forme giovanili più corte e soOli possono sfuggire e si fa esame microscopico delle secrezioni oculari. Nematodi della superfamiglia degli spiruridea - Abronema à muscae e microstoma (specie) - Draschia à megastoma (specie) Non facile perché coesiste la presenza delle lesioni causate dalle larve e gli adul: che completano il ciclo rilasciando lo stadio diagnos&co. Essendo pesan& normale flo>azione non le me>e in evidenza (se non con soluzioni a molta alta densità) ed essendo poco mobili non funziona nemmeno il Baermann, messa a punto una PCR (dall’amico/collega di Bari) sia per le feci che per le biopsie delle lesioni che perme>ono diagnosi con più elevata sensibilità. In generale diagnosi difficile e spesso si ferma al sospe>o clinico sulla base delle lesioni cara>eris&che. Prima si faceva diagnosi istologica sulle biopsie cutanee ricercando la larva (non si fa più). Uova larvate con guscio soa per muoversi aOvamente. Posso trovare come stadio diagnos&co sia uovo che larva. Parassi& zoono&ci nei prodoO iOci Anisakidi (famiglia) con 3 generi che sono Anisakis, Pseudoterranova, Contraceacum. Diagnosi solo a livello di genere in quanto non sono dis:nguibili a livello di specie basandosi solo sulla morfologia dello stadio larvale. Si possono iden&ficare le specie con PCR, la dis&nzione di generi sulla morfologia: - Anisakis larva: 1,5-3 cm x 1 mm sono bianco giallastre, arrotolate o a spirale, molto mobili e hanno il white spot all’estremità craniale - Pseudoterranova larve: 2,5-4 cm x 2 mm, facili da vedere perché il colore va dal bianco giallastro al bruno-arancio, arrotolate su loro stesse con spirale larga e meno compa>a rispe>o ad Anisakis, molto mobili con movimen& molto eviden&. - Contracecum larve: 1-3 cm x 1 mm, cara>eris&ca forma ad uncino ed affusolate all’estremità