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Bacter 12 de agosto Medios de cultivo -Selectivos: -No selectivos: -Diferenciales -Enriquecimiento Agar sangre: la sangre lo enriquece. 5% la sangre. **Agar sangre:** Medio nutritivo, no selectivo, enriquecido, de uso general para el aislamiento y el cultivo de todos los microorganismos de i...

Bacter 12 de agosto Medios de cultivo -Selectivos: -No selectivos: -Diferenciales -Enriquecimiento Agar sangre: la sangre lo enriquece. 5% la sangre. **Agar sangre:** Medio nutritivo, no selectivo, enriquecido, de uso general para el aislamiento y el cultivo de todos los microorganismos de importancia clínica (excepto los más exigentes) La sangre permite visualizar reacciones de hemolisis. Alfa hemólisis (verdoso) por la lisis de los eritrocitos ya que contienen bilirrubina, beta hemolisis (alo transparente) amarillo es el medio, pero no el alo, gamma hemolisis no produce hemolisinas. **Agar sangre con azida:** Medio selectivo para el aislamiento de especies de moos Gram positivos (*Staphylococcus y Streptococcus)* Se compone de azida de sódio(inhibe el crecimiento de gram negativos por un determinado tiempo) y sangre (reacciones de hemolisis) **Agar Sal-Manitol** Medio selectivo para el aislamiento de especies de *staphylococcus* y detección de *Staph. aureus* (tolera altas cantidades de sal, fermenta el manitol ). Selectivo y no diferencial. Composición: Cloruro de sodio 7.5% ,(Inhibición total o parcial de otros moos) Manitol (carbohidrato) y Rojo fenol (Indicador de la fermentación). S. aureus: cambio a color amarillo. S. epidermidis: no cambia de color. **GENERO *STAPHYLOCOCCUS*** **Características morfológicas** - - Cocos - Gram positivos - 0.5-1.5µm de diámetro - Inmóviles - Halotolerantes (resistencia a altas concentraciones de sal) **Hábitat** **-**Colonizan piel y la superficie de mucosas (microbiota natural) - *Staphylococcus aureus* coloniza las narinas anteriores (mucosas) ocasiona problemas cuando dicho portador trabaja en industria de alimentos o los manipula, o un puesto del área de la salud. - *Staphylococcus capitis* regiones con glándulas sebáceas (como la frente) - *Staphylococcus haemolyticus y Staphylococcus hominis* se hallan en zonas dotadas de glándulas apocrinas (como la axila). **Infecciones** Endógenas: Ocasionan problema cuando llegan a un sitio estéril (pulmones, sangre etc). Exógenas: se da la transmisión del agente causal. Cuando se tiene un portador con altas concentraciones y se expone la población. -[Supurativas:] en piel, heridas, abscesos. [- Sistémicas ] [-Intoxicaciones] **Patógenos más frecuentes** S. aureus Epidermidis Haemolyticus *Staphylococcus aureus* Es la especie más virulenta del género. Infección sistémica y supurativa Microbiota normal de la nasofaringe (15% de portadores permanentes) Agente causal de: - Inf. en la piel, heridas y tejidos profundos. - Infecciones nosocomiales - Intoxicación alimentaria (enterotoxinas). **Factores de virulencia** [Casi todas las cepas producen] - Nucleasa - Proteasas - Fosfolipasas - Hialuonidasa - Colagenasa - Hemolisinas **TODAS LAS CEPAS PRODUCEN COAGULASA** **Enfermedades mediadas por toxina** **[Síndrome de piel escalada]** Toxina exfoliativa: Dos toxinas con antigenicidad ETA: termoestalbe ETB: termolabil Destruye las proteínas que mantienen unidas las células en la epidermis. Afecta a neonatos **[Síndrome de choque tóxico estafilocócico.]** Enfermedad multiorgánica. Fiebre, hipotensión y exantema eritematoso macular difuso. Toxina de shock tóxico (TSS-1) Un superantígeno tiene la capacidad de mantener unidos los receptores de una célula presentadora y otra que va a reaccionar. Se une a una proteína de forma externa, no requiere procesamiento. Genera una reacción exacerbada. **[Intoxicación alimentaria]** -Transmitida por alimentos -Producida por toxinas termoestables. -Portador humano y gastroenteritis. **[Infecciones supurativas]** **[-]**Impétido, foliculitis, heridas quirúrgicas mal tratadas. **[Infecciones sistémicas]** Si S.aureus se disemina y sobreciene bacteriemia, es posible que se presente. **CULTVO DE S. auerus** [Medios de cultivo] Agar sangre [Incubación] 18-24 hrs Aerobiosis [Colonias] B-hemolíticas la mayoría Blancas o ligeramente amarillas 2-3mm de diámetro. [Medios de cultivo] Sal y manitol fermentador de manitol (no es la única especie que fermenta manitol, tiene utilidad limitada) [Incubación] 18-24 hrs Aerobiosis [Colonias] **Identificación de S.aureus** [Prueba de catalasa] Peróxido de hidrógeno al 3% catalasa 2h2o2\-\-\-\-\-\-\-\-\-\-\--2h2o + o2 (burbujas) [Prueba de coagulasa en tubo] **En tubo** Detección de coagulasa libre Reacciona inmediato con el fibrinógeno para formar un coagulo de fibrina, **En porta** Detección de coagulasa ligada (factor de aglutinación) Reacciona directamente con el **INTERPRETACIÓN PRUEBA COAGULASA EN TUBO** Plasma inoculado se incuba a 35°C 4 horas sin presencia de coagulo- incubar a t ambiente toda la noche Sin presencia de coagulo negativo formación de coagulo- positivo **INTERPRETACIÓN PRUEBA COAGULASA EN PORTA** Suspensión bacteriana densa en solución salina (una gota) Añadir asada de plasma Esperar 5-20 seg Aglutinaciónpositiva Sin aglutinación negativa Confirmar con la prueba en tubo **ESTAFILOCOCOS COAGULASA NEGATIVOS (ECN)** Conformado por 47 especies y 23 subespecies. Parte de la microbiota normal de piel y superficies mucosas. Patógenos oportunistas asociados a infecciones por dispositivos médicos insertados Especies más frecuentes Staphylococcus epidermidis Staphylococcus haemolyticus Staphylococcus saprophyticus Staphylococcus hominis Staphylococcus lugdunensis ***Staphylococcus epidermidis*** Usualmente no hemolítico Forma parte de al microbiota normal de la piel Representa del 50-80% de los ECN aislados Infecciones: Dispositivos protésicos y catéteres, heridas quirúrgicas, vías urinarias. Diferencias fenotípicas de una misma cepa. Convexas y grandes o muy pequeñas. Grisáceas. ***Staphylococcus lugdunensis*** Especie más virulenta entre ECN Coloniza área inguinal Infecciones asociadas a abscesos prótesis y valvular meningitis, vías urinarias **Identificación** Coagulasa en tubo negativo Coagulasa en portaobjetos positivo Apariencia húmeda de colonias convexas. No hemolítica. Mismas condiciones de incubación. Sensible a novobiocina. ***Staphylococcus saprophyticus*** No es parte de la microbiota e infecta a mujeres sanas sexualmente activas en vías urinarias. 2° agente causal más común **Identificación** Agar sangre: blanquecinas, no hemolíticas, prueba de coagulasa negativa en tubo y porta. Resistente a novobiocina. Sensible: halo de inhibición \>=22mm Resistente: halo de inhibición \= 14 mm de diámetro** **solubilidad en bilis:** se usa una sal biliar desoxicolato de sodio, a la cual las células de s pneumoniae son susceptibles y se lisan. Suspensión de cepa + sales biliares incubar a 35° C 30 minutos. Positivo es claro negativo es turbio. ***Faecalis***