Microbiologia da Cárie Dental Slides PDF

12/05/2016 Cárie dentária Doença crônica, multifatorial e de...

12/05/2016 Cárie dentária Doença crônica, multifatorial e de Microbiota associada ocorrência cosmopolita caracterizada à cárie dentária pela perda mineral de tecidos duros intra-bucais Cárie dentária Determinantes da multifatoriedade: a) presença do tecido mineralizado; b) ingestão de dieta hipercalórica; c) colonização por bactérias acidogênicas; d) tempo. cárie dentária cárie dentária microrganismos sem sem Tecidos mineralizados: cáries cáries tecido duro cáries substrato a) esmalte; sem sem cáries cáries b) cemento; c) dentina. tempo Tétrade de Heyes 1  12/05/2016 cárie dentária cárie dentária Dieta cariogênica: Bactérias acidogênicas: sacarose; estreptococos do grupo mutans; glicose; lactobacilos; frutose; actinomicetos. lactose; etc. cárie dentária microrganismos sem cáries sem cáries Características da microbiota tecido duro cáries substrato associada à cárie dentária sem sem cáries cáries tempo “tétrade de Heyes” Bactérias acidogênicas microbiota cariogênica Teoria do arranjo espacial Atividade acidogênica intensa Aderência ou retenção à superfície dental Produção de polissacarídeos de reserva sem cáries possibilidade com cáries Acidofilia de cáries bactéria cariogênica bactéria não cariogênica 2  12/05/2016 cárie dentária Alteração do pH 7.0 6.5 Queda do pH da placa  interação entre 6.0 espécies acidogênicas 5.5 pH 5.0 Microrganismos acidogênicos  Placa 4.5 cariogênica 4.0 0 5 10 15 20 25 30 35 40 minutos Curva de Stephan Principais mo. associados à cárie Estreptococos do grupo mutans Estreptococos Lactobacilos do grupo mutans Actinomices Estreptococos do grupo mutans Streptococcus mutans Streptococcus sobrinus Streptococcus rattus Streptococcus cricetus Streptococcus ferus Streptococcus macacae Streptococcus downeii 3  12/05/2016 Estreptococos do grupo mutans Hemólise Estreptococos do grupo mutans Organismos -hemolíticos e capnofílicos; Membros da microbiota suplementar; -hemólise Produzem ácidos e polissacarídeos a partir de açúcares simples; Organismos acidófilos; Produzem bacteriocinas; -hemólise -hemólise Relacionados às cáries de fissuras, superfícies lisas, raíz e dentina. Estrutura molecular da sacarose Streptococcus do grupo mutans CH2OH Podem reduzir o pH de 7,0 para 4,0 em até O HOH2C O 20 minutos, pela produção de ácido láctico Resistem aos desafios ácidos com manutenção HO OH O HO CH OH 2 do pH intracelular em 7,5 OH HO cárie dentária pili com lectinas nas extremidades mecanismo de aderência sacarose-dependente I Gtf sacarose I I II mutano (13) I II 4  12/05/2016 cárie dentária Isolamento de Streptococcus grupo mutans Estreptococos do grupo mutans (mutacina) 1mL 1mL 1mL 1mL 1mL amostra teste amostra padrão (+) NaCl 0,9% 9mL amostra padrão (-) saliva 0,1mL 0,1mL 0,1mL 0,1mL 0,1mL diluições: 1:10 1:100 1:1000 1:10000 1:100000 10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 Isolamento de Streptococcus grupo mutans Isolamento de Streptococcus grupo mutans valores altos:  106 UFC/mL saliva valores baixos:  105 UFC/mL saliva Incubação: pCO2 10% Contagem: 37ºC, 24-48H 30-300 colônias média das 2 placas Provas de virulência de Streptococcus grupo Provas de virulência de Streptococcus grupo mutans mutans 0,1mL pH 6,40 medida do pH medida da aderência colônias típicas caldo caldo + 5% sacarose medida da absorbância de polissacarídeos álcali-solúveis 5  12/05/2016 Lactobacilos Lactobacilos Lactobacilos Lactobacillus acidophilus; Organismos anaeróbios aerotolerantes; Lactobacillus salivarius; Crescem em pCO2 5-10%; Lactobacillus plantarium; Membros da microbiota suplementar; Lactobacillus brevis; Fermentadores homo/heterolácticos; Lactobacillus casei; Organismos acidogênicos e acidófilos; Lactobacillus grasseri; Presentes em cáries de fissuras,raíz e dentina; Lactobacillus oris. Não produzem polissacarídeos extra-celulares cárie dentária lesão de fissura Isolamento de Lactobacillus sp. Lactobacilos lactobacilos fatores de virulência 1mL 1mL 1mL 1mL 1mL NaCl 0,9% 9mL saliva 0,1mL 0,1mL 0,1mL 0,1mL 0,1mL lesão inicial lesão avançada diluições: 1:10 1:100 1:1000 1:10000 1:100000 estreptococos estreptococos + lactobacilos 10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 6  12/05/2016 Isolamento de Lactobacillus sp. Isolamento de Lactobacillus sp. 35°C valores altos:  105 UFC/mL saliva valores baixos:  103 UFC/mL saliva Contagem: Incubação: 24H 30-300 colônias média das 2 placas Provas de virulência de Lactobacillus sp. Provas de virulência de Lactobacillus sp. Teste de Snyder Teste de Snyder 35°C 0,2mL 42°C 4,7  pH  4,6 saliva Ágar Snyder Incubação: 4,5  pH  4,2 estimulada (pH 4,8) 24H/48H/72H L D pH  4,1 Provas de virulência de Lactobacillus sp. Teste de Snyder atividade resultado de cárie 0-24 horas 25-48 horas 49-72 horas acentuada positivo - - Actinomicetos moderada negativo positivo - pequena negativo negativo positivo negativa negativo negativo negativo 7  12/05/2016 Actinomicetos Actinomyces naeslundii anaeróbio facultativo; coloniza língua e mucosas; coloniza a cavidade bucal antes da erupção dentária; induz cárie de raiz e doença periodontal em animais; adere à mucosa e aos estreptococos. Actinomicetos Actinomicetos Actinomyces viscosus Fatores de virulência: anaeróbio facultativo; coloniza preferencialmente os dentes; Produção de ácidos (láctico, acético, succínico) a coloniza a cavidade bucal após a erupção dentária; partir da fermentação de açúcares; induz cárie de raiz e doença periodontal em animais; prevalente nas lesões de cárie de raiz; Armazenamento de polissacarídeos intracelulares. adere à película adquirida; adere às mucosas e estreptococos. cárie dentária Actinomicetos Actinomicetos fatores de virulência Fatores de virulência: Cepas de lesões cariosas radiculares  mais virulentas Cepas de superfícies não-cariosas  menos virulentas “O ambiente da lesão cariosa radicular parece selecionar cepas mais cariogênicas” lesão inicial lesão avançada estreptococos estreptococos + actinomicetos 8  12/05/2016 Outros microrganismos Candida albicans Veillonela spp 9