UE4-Hématologie-Immunologie-Microbiologie Hémogramme PDF 2024/2025

06/09/2024 15H30-17H30 L2 Pharma Pr L Camoin-Jau 2024/2025 UE4-Hématologie-Immunologie-Microbiologie Hémogramme Rédacteurs : Victor FIORANI Ronéo n°1 Nombre de pages : 11 PLAN I. Le sang : Définition Composition II. Lecture et interpr...

06/09/2024 15H30-17H30 L2 Pharma Pr L Camoin-Jau 2024/2025 UE4-Hématologie-Immunologie-Microbiologie Hémogramme Rédacteurs : Victor FIORANI Ronéo n°1 Nombre de pages : 11 PLAN I. Le sang : Définition Composition II. Lecture et interprétation de l’hémogramme Définition Prélèvement Technique de comptage Paramètres analysés 1 1.Le sang : généralités 1.1 Définition : Le sang est un tissu mésenchymateux formé de 2 phases : - La phase liquide : le plasma - La phase cellulaire : les éléments figurés Les adultes possèdent en moyenne 5L de sang. 1. 2 Composition : La phase liquide du sang est composée d’eau, électrolytes, sels minéraux, glucides, lipides, urée, enzymes, protéines. La phase cellulaire est composée de globules rouges, de plaquettes ainsi que de globules blancs. Illustration représentant les 2 phases du sang ainsi que la composition du plasma Il existe différents tubes pour l’analyse sanguine correspondant à l’analyse biologique demandée. Les 2 couleurs principales nous intéressant ici sont le violet et le bleu. Tube violet : Contenant un anti coagulant, l’EDTA, il permet une analyse de la phase cellulaire afin d’étudier les cellules sanguines. L’EDTA agit sur le calcium de manière irréversible. Tube bleu : Contenant un anti coagulant, le citrate de sodium, il permet l’obtention de plasma, ainsi nous pouvons étudier l’hémostase car le citrate de sodium intervient sur le calcium de manière réversible. A noter qu’il existe aussi des tubes rouges sans anti coagulant permettant d’obtenir du sérum afin de pratiquer des analyses en biochimie. Nous utiliserons donc différents tubes en fonction de l’analyse voulue : Cytologie : tube violet contenant de l’EDTA (irréversible) Hémostase : tube bleu contenant du citrate de sodium (réversible) A des fins d’analyses de biochimie on utilise les tubes rouges ne contenant pas d’anti coagulant. 2  Récap des 2 grands examens biologiques en hématologie Les objectifs de ce cours sont : Savoir interpréter un hémogramme en connaissant : Les valeurs normales Le vocabulaire médical 3 2.Lecture et interprétation de l’hémogramme : 2.1 Définition : L’hémogramme est l’examen le plus prescrit, il est à la base de l’investigation médicale. Entre 1200 et 1400 hémogrammes sont effectués chaque jour à la Timone. L’hémogramme est une étude des cellules sanguines se faisant par 2 approches : Quantitative et Qualitative (la prof insiste sur ces 2 approches) L’approche quantitative vise à déterminer le nombre de cellules afin d’analyser si celui-ci est normal ou non. L’approche qualitative permet-elle une analyse des éléments sanguins afin de savoir si ceux-ci sont bons ou non. Ces deux approches sont appliquées aux globules rouges, blancs ainsi qu’aux plaquettes. 2.2 Prélèvement : Le prélèvement se fait au pli du coude, un garrot est placé, la zone de prélèvement est aseptisée à l’alcool. Le sang veineux est prélevé sur anti coagulant (EDTA-K2). Le sang capillaire est lui prélevé au bout du doigt, au lobe de l’oreille ou chez le nouveau-né au talon. Important : l’analyse doit être effectuée dans les 6h La qualité du prélèvement est un gage de fiabilité du résultat. 2.3 Techniques de comptage : On utilise un compte globules automatiques ayant plusieurs avantages : -dilution automatique -Grande fiabilité -Rapidité d’exécution -Indice distribution des cellules Les anomalies quantitatives et/ou qualitatives sont mises en évidences par l’automate. Dès lors qu’une anomalie est détectée dans l’hémogramme les biologistes pratiquent un frottis sanguin analysé par microscopie. Après avoir été prélevée la goutte de sang est colorée afin de distinguer les différents éléments constitutifs du sang : –Coloration au May-Grünwald, Giemsa May-Grünwald : éosine + bleu de méthylène Giemsa : azur + éosine L’analyse microscopique permet de déterminer la morphologie des GR, les formules leucocytaires, la taille et le contenu des plaquettes et agrégats plaquettaires. Désormais les frottis sont effectués via l’automate, celui-ci classe les cellules notamment grâce à l’intelligence artificielle. Les cellules non identifiées par l’automate sont mises de côté et classées par les biologistes. Si un doute persiste une analyse manuelle au microscope est effectuée. Sur les environs 1200 hémogrammes effectués quotidiennement à la Timone 50% présentent des anomalies. 4 2.4 Paramètres analysés : - Pour les globules rouges les paramètres analysés sont : numérisation des GR, hématocrite, dosage de l’hémoglobine, constantes érythrocytaires. - Pour les globules blancs : numération des globules blancs et formule leucocytaire - Pour les plaquettes : numération La recherche d’anomalie est qualitative et quantitative, si anomalie il y a un frottis est effectué (répétition++). 2.4.1 Valeurs spécifiques aux globules rouges (hématies) : Ces valeurs sont les seules exprimées en Téra/L, il existe une différence de valeurs entre homme et femme. Elles sont à connaitre par " $. # Numérations de GR, VN : Homme : 4,5 - 5,7 x 1012/l Femme : 4,2 -5,2 x 1012/l Hématocrite, VN : Homme : 42-54 % Femme : 37-47 % 2.4.2 Constantes érythrocytaires : Il n’existe pas de différence liée au sexe pour les constantes érythrocytaires. Elles demeurent au nombre de 3 : VGM : volume globulaire moyen en femtolitre TCH : Teneur corpusculaire moyenne en Hémoglobine, elle correspond à la concentration d’hémoglobine dans les GR exprimé en picogramme par cellule. CCMH : Concentration corpusculaire moyenne en Hémoglobine. 5 2.4.3 L’hémoglobine : Le paramètre le plus important à mesurer est l’hémoglobine, c’est une analyse réflexe, nous ne résonnons de prime abord que par celle-ci. Il existe pour les valeurs de l’hémoglobine une différence de sexe ainsi que d’âge. La mesure s’effectue par colorimétrie après lyse des hématies. Les valeurs normales sont : Femme : 120 à 160 g/l Homme : 130 à 170 g/l Le taux d’hémoglobine est un élément majeur intervenant dans le diagnostic de l’anémie, une baisse de son taux signifie une anémie, à contrario une augmentation est signe d’une polyglobulie. Tableau récap des valeurs normales selon le sexe. Il existe pour l’anémie une classification : Le VGM est un facteur important à analyser en cas d’anémie, il permet la détermination du type d’anémie. L’anémie microcytaire est la plus fréquente elle est principalement dû à une carence en Fer. Elle est la première cause de consultation, elle concerne principalement les femmes jeunes en raison de leur activité menstruelle ainsi que des grossesses. C’est pour cela qu’une complémentation en fer est apportée au cours d’une grossesse. L’anémie s’exprime physiquement chez le patient par une pâleur, de la fatigue, un essoufflement. 6 2.4.4 Morphologie du GR : Le GR est une cellule anucléée principalement constituée d’hémoglobine, il prend la forme d’un disque biconcave, rose/orange d’un diamètre de 7 à 7,5 µ. Grâce à l’analyse de la morphologie des hématies nous pouvons avoir plusieurs éléments d’orientation du diagnostic : Différence de taille : anisocytose – Microcytose – Macrocytose Différence de formes : poïkilocytose – Schizocytes – Drépanocytes – Acanthocytes – Sphérocytes Différence de coloration : annulocytes (anémies) Inclusions : – Paludisme – ARN (réticulocytes) 2.4.5 Les réticulocytes : Les réticulocytes sont des GR jeunes, venant d’être produits contenant encore de l’ARN ribosomial ainsi que des restes de mitochondries. Leur étude permet d’analyser la cause de l’anémie, si le taux de réticulocytes est bas cela traduit une cause centrale (problème dans la production) Les valeurs normales sont : 20 à 80 G/L soit 0,5% à 2% des GR Si le taux est trop important cela signifie que les nouveaux réticulocytes sont détruits par le corps. Réticulocytes diminuées = cause centrale = anémie arégénérative, 100 G/l L’étude des réticulocytes est un reflet du fonctionnement de la moëlle épinière permettant d’éviter un prélèvement de moëlle épinière qui est un geste technique. 7 2.4.6 Globules blancs : leucocytes Il existe une numération automatique de nombre total de GB. Les valeurs normales sont : 4 à10 G/l (10^9) Il existe des variations physiologiques notamment chez l’enfant le nouveau-né. Nouveau-né : 18x10^9 G/l Enfant : 9x10^9 G/l Les valeurs de leucocytes diminuent vers l’âge de 7 ans afin de se rapprocher des valeurs adultes. Le terme leucocyte inclus la somme du nombre de polynucléaires neutrophiles, éosinophiles, basophiles ainsi que du nombre de lymphocytes et monocytes. La formule leucocytaire signifie la répartition des différents types de leucocytes. Elle est réalisée sur automates avec un contrôle sur frottis, sa valeur varie en fonction de l’âge. Les différentes familles de leucocytes Tableau des VN Les éosinophiles peuvent augmenter en présence de parasites ou à la suite d’allergies, ce sont le témoin d’une réaction allergique. 8. Anomalies quantitatives selon valeurs 2.4.7 Plaquettes : Les plaquettes sont des fragments cellulaires de petites tailles, nous pouvons vulgariser en utilisant le terme de petites cellules, elles mesurent de 3 à 4 µ. Celle-ci ont un rôle central dans les mécanismes de l’hémostase, au sein de celle-ci se déroule des granulations azurophiles. Les valeurs normales sont : 150 à 450 G/l Il existe aussi des variations pathologiques : < 150 G/l : thrombopénie > 450 G/l : thrombocytose > 800 G/l: thrombocytémie L’ensemble des valeurs du cours sont à connaître par cœur. FIN :) 9