Disolución de Medicamentos - PDF

Disolución de medicamentos Por Luis García 01 Cinéticas de disolución 03 Tipos de disolución Orden cero Disolución puntual Orden uno Disolución aparente 02 Aparatos de disolución 04 Comparativo de perfiles Aparatos 1 al 7 USP...

Disolución de medicamentos Por Luis García 01 Cinéticas de disolución 03 Tipos de disolución Orden cero Disolución puntual Orden uno Disolución aparente 02 Aparatos de disolución 04 Comparativo de perfiles Aparatos 1 al 7 USP de disolución Características y usos Manejo de datos Factor de similitud  01 Cinéticas de disolución  Disolución Es el proceso por medio del cual una substancia sólida (soluto), se dispersa en el disolvente para dar una solución (dispersión molecular homogénea) ¿Pero entonces cuál es la diferencia de concepto con solubilidad? ¿Por qué disolución aparente? ¿Diferencia entre disolución puntual vs. perfil de disolución? ¿Qué factores afectan la disolución? Es el proceso por medio del cual una substancia sólida (soluto), se dispersa en el disolvente para dar una solución (dispersión molecular homogénea). DISOLUCIÓN Solubilidad vs. Disolución Propiedad fisicoquímica Inherente al fármaco Solubilidad Depende de la temperatura Relacionada con un producto farmacéutico Depende de los excipientes y fabricación Disolución Condiciones estandarizadas de temperatura, medio, equipo y agitación  VELOCIDAD DE DISOLUCIÓN Cantidad de ingrediente activo en una forma de dosificación sólida disuelta por unidad de tiempo, bajo condiciones estandarizadas de interfase sólido-líquido, temperatura y composición de medio: ! Velocidad de disolución intrínseca ! Velocidad de disolución aparente  TEORÍA DE LA CAPA ESTACIONARIA (GRADIENTE DE CONCENTRACIÓN) Factores que afectan la disolución Tamaño de partícula Estructura cristalina Propiedades Grado de hidratación del cristal fisicoquímicas del fármaco Coeficiente de partición pKa Tipo de sal o ester Factores que afectan la disolución Cantidad de desintegrante Variables de formulación y Cantidad de lubricante manufactura Recubrimientos especiales Naturaleza de diluentes Fuerza de compresión Excipientes Los excipientes son cualquier sustancia diferente al ingrediente activo, cuya seguridad ha sido evaluada apropiadamente y que son incluidos en un sistema de liberación para ayudar en su procesamiento durante su manufactura, protección, apoyo ó incremento de la estabilidad, biodisponibilidad, o aceptabilidad del paciente, identificación del producto, o resaltar cualquier otro atributo de la efectividad y seguridad global del sistema de liberación del fármaco durante su almacenamiento o uso.  Excipientes Los medicamentos están constituidos de ingredientes farmacéuticos activos y excipientes. Los excipientes tienen una o mas de las siguientes funciones en una formulación: Disolvente desintegrante amortiguador emulsificante lubricante Formador de gel anti-espumante secante recubierta aglutinante colorante humectante diluente saborizante solubilizador preservativo antioxidante  Excipientes Diferencias en la calidad: Distribución tamaño de partícula Propiedades de superficie Impurezas Alteran las propiedades físicas, químicas y biofarmacéuticas de las formas farmacéuticas Funcionalidad de los excipientes Factores que afectan la disolución Biodisponibilidad Soluciones mas rápida Suspensiones Cápsulas Formas de dosificación Tabletas Tabletas recubiertas Formulaciones de liberación Biodisponibilidad controlada mas lenta ECUACIÓN DE NOYES-WHITNEY Y PRIMERA LEY DE DIFUSIÓN DE FICK 15 Orden de un proceso Orden de un proceso O Orden de un proceso O Orden de un proceso O Orden de un proceso O CINÉTICA DE DISOLUCIÓN CINÉTICA DE DISOLUCIÓN DE ORDEN UNO Problema 1 Cinética de disolución Problema 2 Cinética de disolución 02 Aparatos de disolución Aparatos de disolución I. Canastillas II. Paletas III. Cilindros reciprocantes IV. Celda de flujo continuo V. Paleta sobre disco VI. Cilindros rotantes VII. Disco / Soporte reciprocante  Aparato de disolución 1 Descripción Usos El equipo de disolución USP 1 es un Se utiliza principalmente para determinar sistema de canasta rotatoria que simula la velocidad de disolución de formas la disolución de una forma farmacéutica farmacéuticas sólidas, como tabletas y sólida en el tracto gastrointestinal. La cápsulas, gránulos/perlas que se canasta contiene la forma farmacéutica administran por vía oral. sólida y gira a una velocidad constante en un medio de disolución.  Variaciones permisibles para el método I USP Cubierta de oro: hasta 2.5 µm espesor Algunas determinaciones fluorometricas son sensibles a los iones níquel y cromo y el acero inoxidable tipo 316 contiene trazas de ambos Ni y Cr. Las canastillas se deterioran con HCL 1N en 3 - 5 semanas y la cubierta de oro prolonga su vida media hasta por varios meses. Malla de la canastilla: a menos que se especifique otra cosa, la malla-40 es la que se requiere Una malla-20 puede ser permisible. Variaciones permisibles para el método I USP Una canastilla malla 40 estándar: 0.01 pulgadas de diametro resulta en una apertura del cuadro de 0.381 mm. Tolerancia permitida: 0.37 a 0.391 mm lo cual es ± 2.6% de variación. La JP especifica 0.011pulgadas de diametro, lo que resulta en una apertura del cuadro de 0.425 mm: malla 36. Una diferencia del 24% en USP?. AMBAS CANASTILLAS NO SON INTERCAMBIABLES USOS NO OFICIALES: supositorios, particulas microencapsuladas: canastillas con malla 80. Aparato de disolución USP 2 1 Descripción 2 Usos El equipo de disolución USP 2 es un sistema de pala rotatoria. Este equipo es ideal para determinar la velocidad de La pala se utiliza para agitar el medio de disolución, disolución de formas farmacéuticas sólidas con una superficie permitiendo una mayor homogeneidad y una mayor de disolución limitada, como comprimidos con recubrimiento exposición de la forma farmacéutica sólida al medio de entérico, tabletas, cápsulas, perlas y gránulos. disolución.  Aparato de disolución USP 3 Cilindros reciprocantes Usos (rotatorios) Basado en el equipo de desintegración. Se puede programar para la disolución en Es un conjunto de recipientes varios medios durante varios tiempos, los exteriores de vidrio cilíndricos de fondo medios se pueden cambiar fácilmente, plano; un conjunto de cilindros puede comenzar a pH 1 y luego a pH 4,5 y interiores de vidrio que se mueven luego a pH 6,8 y iv) intenta reflejar los alternativamente; y accesorios y rejillas cambios de pH y los tiempos de tránsito en de acero inoxidable que están hechos el tracto gastrointestinal. Útil para de material adecuado y que están formulaciones de liberación modificada, diseñados para ajustarse a las partes pero no es adecuado para formas de superior e inferior de los cilindros que dosificación desintegrables,, los se mueven alternativamente. surfactantes causan espuma y iel volumen del medio de disolución es demasiado pequeño.. Equipo de disolución USP 4 1 2 Descripción Usos El equipo de disolución USP 4 utiliza un sistema de La diversidad de celdas disponibles permite su uso flujo continuo. Este sistema introduce el medio de para tabletas, polvos, supositorios, cápsulas de disolución de manera continua en el recipiente de gelatina dura y blanda, liberación extendida y disolución, lo que ayuda a mantener un medio de productos con solubilidad pobre disolución fresco y constante. Equipos de disolución USP 5, 6 y 7 USP 5 USP 6 USP 7 Aparato de paleta sobre disco, la paleta y Se trata de una modificación del aparato de El aparato de disco reciprocante, se introdujo en recipiente del Aparato 2 con la adición de un canasta (Aparato 1 de la USP). Utiliza el la USP como una opción de pequeño volumen disco de acero inoxidable diseñado para conjunto de recipientes del Aparato 1, para parches transdérmicos pequeños, luego se sostener un sistema transdérmico en el excepto que reemplaza la canasta y el eje renombró como aparato de soporte reciprocante fondo del recipiente. La temperatura se por un elemento agitador cilíndrico de acero con la adopción de cuatro soportes adicionales mantiene a 32 °C ± 0,5 °C. inoxidable. El aparato de cilidros rotantes se para sistemas transdérmicos, bombas osmóticas utiliza para probar parches transdérmicos. y otros sistemas de administración de dosis bajas. El aparato se utiliza para parches transdérmicos.  03 Tipos de disolución 03 Tipos de prueba de disolución Disolución Perfil de puntual disolución Control de Calidad Prueba de intercambiabilidad  Prueba de disolución puntual vs. perfil de disolución Prueba de disolución puntual Perfil de disolución Muestra a tiempos específicos Cuantificación del Fármaco con establecidos en farmacopea respecto al tiempo Usualmente un solo tiempo de Al menos 5 tiempos de muestreo muestreo Prueba rutinaria de control de calidad Prueba de intercambiabilidad Evaluación de materia prima Desarrollo de formulaciones y relación con la biodisponibilidad del fármaco Medicamentos en estudio Verificación del equipo de disolución  Inspección visual del equipo de disolución El Analista debe verificar los siguientes aspectos operativos del aparato de disolución y registrarlos en la bitácora de trabajo A. Instalación B. Almacenamiento C. Identificación de dispositivos D. Vasos E. Dispositivos de agitación F. Baño G. Jeringas H. Cánulas de muestreo I. Filtros Preparación del medio de disolución  Preparación del medio de disolución (ejemplo tabletas de AAS) 1. Pesar con exactitud el equivalente a 3.0 g de acetato de sodio trihidratado y transferirlo cuantitativamente a un matraz volumétrico de 1 L 2. Adicionar aproximadamente 30 mL de agua destilada y agitar hasta disolver por completo 3. Añadir lentamente 1.5 mL de ácido acético glacial grado reactivo analítico, agitar 4. Ajustar a volumen con agua destilada 5. Verificar pH, ajustar a pH 4.5 con solución hidróxido de sodio 0.1 N o solución ácido acético 0.1 N 6. Desgasificar el medio de disolución Realizar los ajustes del volumen de medio de disolución requerido de acuerdo al número de unidades de dosificación a evaluar  Desgasificación del medio de disolución Es el proceso que implica la eliminación de aire en el medio de disolución  Desgasificación del medio de disolución Las burbujas formadas en la forma de dosificación pueden proporcionar una barrera para la humectación y reducir los resultados de la disolución, o pueden hacer que la forma de dosificación se vuelva flotante, lo que puede cambiar las características de dispersión de partículas y agregados En este caso, los gases disueltos deben ser removidos previamente al inicio de la prueba  Importancia de la desgasificación En un estudio de la USP, no desgasificar de manera eficaz los medios de disolución fue la principal causa de variabilidad en el porcentaje medio de prednisona disuelta 52.3 % en el promedio del porcentaje disuelto 11.8 % en la desviación estándar Eaton, J. Deng, G. W. Hauck, Walter W. Brown, W. Manning, R. G. Wahab, S. Perturbation Study of Dissolution Apparatus Variables – A Design of Experiment Approach. Dissolution Technologies. 2007; 14: 20-26  Desgasificación del medio de disolución 1. Calentar el medio de disolución a 45º C 2. Filtrar al vacío inmediatamente con un filtro de 0.45 µm de porosidad o menor con agitación vigorosa 3. Continuar la agitación por 5 minutos más 4. Emplear el medio de disolución inmediatamente después de desgasificar o proteger para evitar formación de burbujas 5. Evitar la formación de burbujas o turbulencia durante su manipulación Se pueden emplear otras técnicas eficientes y validadas Método FEUM 11 Ed. MGA 0291. Disolución Ejecución del Estudio  Condiciones de la prueba de disolución Aparato de disolución Canastillas Medio de disolución SA acetatos 0.05 M pH 4.5 ± 0.05 M Volumen del medio 500 mL ± 5 mL Temperatura del medio de disolución 37º C ± 0.5 ºC Velocidad de agitación 50 rpm ± 1 rpm Tiempos de muestreo 10, 15, 20, 30 y 45 minutos Volumen de la muestra 5 mL Forma de muestreo manual Número de unidades 12 unidades Colocación de las unidades simultánea  Procedimiento 1. Colocar los vasos de disolución de acuerdo al esquema establecido 2. Colocar el elemento de agitación (canastilla) según el orden establecido 3. Ajustar la altura del elemento de agitación respecto al fondo del vaso de disolución 4. Adicionar el medio de disolución (500 mL) teniendo cuidado de no generar turbulencia 5. Permitir que se alcance el equilibrio de la temperatura de trabajo en todos los vasos; verificar temperatura  Procedimiento 6. Ajustar y verificar la velocidad de agitación a 50 rpm 7. Depositar 1 tableta en cada una de las canastillas del equipo, verificar que este en el centro y en forma horizontal 8. Iniciar la agitación de los dispositivo de agitación 9. Bajar el cabezal con los dispositivos de agitación hasta el tope 10. Cronometrar inicio de la prueba al momento en el que las canastillas tocan la superficie del medio de disolución 11. Tomar las muestras del estudio de acuerdo a los tiempos de muestreo establecido en el protocolo NOTA. La prueba se realiza sin reposición de volumen, verificar que el volumen total retirado no exceda el 10% del volumen inicial  Procedimiento 12. Colocar las muestras en una gradilla con tubos de ensaye organizados de la siguiente forma Tiempos de muestreo 10, 15, 20, 30 y 45 min  Procedimiento 13. Filtrar la muestra inmediatamente después para evitar la disolución de partículas suspendidas Verificación de las variables funcionales  Variables funcionales del equipo de disolución Variable Especificación Observación Unidades evaluadas A. Medicamento de prueba o Realizar todos los Perfiles de Medicamento de referencia disolución bajo las mismas B. Unidades 1-6 ó unidades 7-12 condiciones Aparato de disolución A. Aparato1 (canastillas) B. Aparato 2 (paletas) Instalación del equipo El equipo se encuentra colocado en una superficie sólida, plana y aislada de fuentes de vibración Almacenamiento Todos los aditamentos se conserven en lugares bajo condiciones que permitan su perfecta conservación física  Variables funcionales del equipo de disolución Variable Especificación Observación Identificación Los vasos y dispositivos de Verificar la disponibilidad del agitación (canastillas y paletas) esquema de ubicación de los cuentan con código aditamentos en el equipo para garantizar que siempre ocupen la misma posición Vasos Ausencia de rayones, superficie Ver esquema de identificación interior rugosa, suciedad u otra y ubicación colocada en el variación equipo de disolución Canastillas Ausencia rupturas en la malla, Ver esquema de identificación deformaciones, suciedad u otra y ubicación colocada en el variación equipo de disolución Paletas Ausencia de rayones, fracturas, Ver esquema de identificación deformaciones, suciedad u otra y ubicación colocada en el variación equipo de disolución  Variables funcionales del equipo de disolución Variable Especificación Observación Vástagos Linealidad de los vástagos, ausencia Ver esquema de identificación y de rayones, deformaciones, ubicación colocada en el equipo de suciedad u otra variación disolución Baño A. El recipiente del baño de agua debe estar transparente, con la finalidad de que los procesos de desintegración y disgregación al interior de los vasos puedan ser monitoreados visualmente B. El nivel de agua del baño del equipo de disolución debe estar por arriba del nivel del medio de disolución de los vasos  Variables funcionales del equipo de disolución Variable Especificación Observación Jeringas A. Limpias Ver esquema de identificación B. Graduación, funcional para y ubicación colocada en el la toma de muestra equipo de disolución C. Cantidad suficiente para contar con sistemas independientes para cada vaso Cánulas A. Limpias Ver esquema de identificación B. Funcionales para su y ubicación colocada en el operación equipo de disolución C. Cantidad suficiente para contar con sistemas independientes para cada vaso  Variables funcionales del equipo de disolución Variable Especificación Observación Filtros A. Aquellos que cumplieron con Ver esquema de identificación y los criterios de la validación del ubicación colocada en el equipo de método analítico disolución B. Cantidad suficiente para contar con sistemas independientes para cada vaso Dispositivos de hundimiento A. Funcionales para su operación Ver esquema de identificación y “sinker” B. Cantidad suficiente para contar ubicación colocada en el equipo de con sistemas independientes disolución para cada vaso Altura del elemento de agitación A. 25 ± 2 mm Fijar la distancia entre el fondo (canastilla o paleta) interior de cada vaso y la parte inferior del elemento de agitación  Variables funcionales del equipo de disolución Variable Especificación Observación Preparación del medio de A. contenido de sales De acuerdo a lo indicado en el disolución B. Molaridad protocolo C. Concentración D. pH ± 0.5 unidades Desgasificación del medio de Apreciar visualmente ausencia Emplear método farmacopéico disolución o presencia de burbujas de aire Volumen del medio disolución ± 1% A. Medir a temperatura ambiente B. Emplear material calibrado Velocidad de agitación ± 2 rpm o ± 4% Medir para cada uno de los lo que resulte mayor elementos de agitación Temperatura 37 ºC ± 0.5 ºC La diferencia de temperatura en cada vaso no debe variar 0.2º C entre dos lecturas sucesivas en un periodo de 3 minutos  Variables funcionales del equipo de disolución Variable Especificación Observación Colocación de unidades A. Simultánea o, En caso de adición secuencial, B. Secuencial registrar orden e intervalo de tiempo Tiempos de muestreo ± 2 % respecto al valor nominal A. Expresada en segundos (s) o minutos (min) B. Considerar si las unidades fueron colocadas de forma simultánea o secuencial Volumen de alícuota Verificar que se tome el volumen indicado en el protocolo Punto de muestreo Verificar que se tome en la parte central entre la superficie del medio de disolución y la parte superior de la canastilla o la paleta, y no menos de 1 cm de la pared del vaso  Variables funcionales del equipo de disolución Variable Especificación Observación Tipo de muestreo A. Manual o, Toma de muestra automática B. Automática requiere validación previa Reposición del medio de A. Con reposición del medio Si se efectúa reposición del disolución B. Sin reposición del medio medio, este se debe restituir a 37 ± 0.5 ºC con el mínimo de turbulencia Dispositivos de hundimiento De acuerdo al protocolo Uso de dispositivos de hundimiento requiere validación previa Tipo de filtro De acuerdo al protocolo Uso de filtros requiere validación previa Evidencia “Todo lo que no se escribe, no existe” “La organización que no escribe, no reflexiona y por tanto no transciende lo que hace” Los instrumentos empleados deben estar vigentes dentro del programa anual de mantenimiento y de calificación de desempeño Preparación de las muestras  Preparación de muestras 1. Respetar el esquema de organización de las muestras para evitar la confusion de muestras 2. Medir con pipeta automatica 0.5 mL de la muestra del estudio 3. Trasferir cuantitativamente a un tubo de centrífuga 4. Adicionar con el dispensador automatico 4.5 mL de medio de disolución 5. Agitar vigorosamente por 30 s en agitador tipo vortex Análisis de las muestras  Condiciones analíticas Las condiciones del método analítico para el análisis de las muestras del estudio deben ser las mismas que demostraron cumplimiento a los criterios de la validación Condición Especificación Método Espectrofotometría UV Longitud de onda 265 nm Celda Cuarzo de 1 cm de espesor Blanco de ajuste Medio de disolución: SA acetatos 0.05 M pH 4.5 ± 0.05 M  Corrida analítica Condición Especificación Especificación Verificación del Obtener al menos por sextuplicado y de CV £ 2.0 % sistema manera consecutiva la respuesta analítica de la solución de verificación (30 µg/mL) Blanco de correción A. Remover cuidadosamente la cubierta Obtener valor promedio de la de 6 unidades mediante un método respuesta analítica y sustraer a la Si las tabletas adecuado respuesta analítica de la curva de cuentan con B. disolver las cubiertas en el mismo calibración y muestras del estudio recubrimiento volumen del medio de disolución a la misma temperatura C. Proceder como se indica en la preparación de la muestra Curva de calibración Al menos 5 niveles de concentracion de r ³ 0.99 acuerdo al protocolo ERR ³ 2.0 Revisar cumplimiento a los criterios de aceptación antes de continuar con la lectura de las muestras del estudio  Curva de calibración Solución stock de AAS de 1,000 µg/mL A. Pesar con exactitud el equivalente a 50 mg de sustancia de referencia de AAS B. Transferir cuantitativamente a un matraz volumétrico de 50 mL, adicionar aproximadamente 5 mL etanol grado reactivo analítico , agitar vigorosamente en agitador tipo vortex C. Llevar a volumen con medio de disolución de SA acetatos 0.05 M pH 4.5 ± 0.05 M Nivel Concentración Alícuota Sol stock Volumen final (µg/mL) (mL) (mL) 1 20 1 50 2 40 2 50 3 100 5 50 4 200 2 10 5 300 3 10  Reanálisis de muestras Se sugiere almacenar las muestras (si la estabilidad lo permite) hasta que los datos sean procesados 04 Comparativo de perfiles de disolución Cálculos  Evaluación de la curva de calibración 1. Determinar la respuesta analítica de los estándares de cada nivel de concentración 2. Graficar la respuesta analítica respecto a la concentración nominal de cada uno de los estándares 3. Con los valores de la respuesta analítica de la curva de calibración realizar un análisis de regresión lineal; donde la variable independiente “X” es la concentración del fármaco (ug/mL) y la variable dependiente “Y” es la respuesta analítica 4. Calcular la ordenada al origen (b), pendiente (m), coeficiente de correlación (r) y error relativo debido a la regresión (ERR) Parámetro Criterio de aceptación r ≥ 0.99 ERR ≤ 2.0%  Ajuste lineal por mínimos cuadrados Ecuación linea recta y = mx + b Parámetro Ecuación pendiente 𝑛 ∑ 𝑥𝑦 − ∑ 𝑥 ∑ 𝑦 𝑚= 𝑛 ∑ 𝑥! − ∑ 𝑥 ! intersección ∑ 𝑦 ∑ 𝑥 ! − ∑ 𝑥 ∑ 𝑥𝑦 (ordenada) 𝑏= 𝑛 ∑ 𝑥! − ∑ 𝑥 ! coeficiente de correlación 𝑛 ∑ 𝑥𝑦 − ∑ 𝑥 ∑ 𝑦 𝑟= 𝑛 ∑ 𝑥! − ∑ 𝑥! 𝑛 ∑ 𝑦! − ∑ 𝑦 ! error relativo a la relación 𝑆#" $ 𝐸𝑅𝑅 = 100 𝑦- desviación estándar de la ∑ 𝑦 ! − 𝑚 ∗ ∑ 𝑦𝑥 − 𝑏 ∗ ∑ 𝑦 regresión 𝑆#" = $ 𝑛−2  Herramientas de Excel Función en excel Sintaxis Ordenada al origen (b) =INTERSECCION.EJE(conocido_y;conocido_x) Pendiente (m) =PENDIENTE(conocido_y;conocido_x) Coeficiente de correlación (r2) =COEF.DE.CORREL(matriz1;matriz2) Desviación estándar de la regresión =ERROR.TIPICO.XY(conocido_y;conocido_x) (𝑆%⁄& ) 𝑆#" $ 𝐸𝑙 𝑒𝑟𝑟𝑜𝑟 𝑟𝑒𝑙𝑎𝑡𝑖𝑣𝑜 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑟𝑒𝑔𝑟𝑒𝑠𝑖ó𝑛 𝑠𝑒 𝑐𝑎𝑙𝑐𝑢𝑙𝑎 𝑐𝑜𝑛 𝑙𝑎 𝑠𝑖𝑔𝑢𝑖𝑒𝑛𝑡𝑒 𝑒𝑐𝑢𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝐸𝑅𝑅 = 100 𝑦4  Cálculos de porciento disuelto sin reposición Vol final 3 mL 5 mL Respuesta analítica 0.5 mL 500 mL Dilución: 0.5 mL en 5 mL Fd = 5 mL/0.5 mL = 10 absorbancia Di Ei Xi 1. Determinar la concentración del fármaco (Xi) en la muestra diluida en el i-ésimo tiempo 2. Calcular la cantidad de fármaco disuelto (Ei) en la muestra tomada al i-ésimo tiempo de muestreo 3. Obtener la cantidad de fármaco disuelto (Di) en el volumen del medio en el vaso al i-ésimo tiempo de muestreo 4. Obtener el % disuelto de fármaco disuelto (%Di) al i-ésimo tiempo de muestreo  Concentración de fármaco disuelto (Xi) Interpolar la respuesta analítica de la muestra en la ecuación de la curva de calibración (𝑌𝑖 − 𝑏) 𝑋𝑖 = 𝑚 Xi Concentración del fármaco (µg/mL) en el i-ésimo tiempo de muestreo Yi Respuesta analítica (absorbancia) del fármaco en la muestra diluida el i-ésimo tiempo de muestreo b Ordenada al origen (intersección) de la curva de calibración m Pendiente de la curva de calibración  Cantidad de fármaco disuelto en la muestra (Ei) 𝐸𝑖 = 𝑋𝑖 𝐹𝑑 𝑣 (𝐹𝑐) Ei cantidad de fármaco disuelto en la muestra tomada al i-ésimo tiempo de muestreo Xi Concentración del fármaco (µg/mL) en el i-ésimo tiempo de muestreo Fd Factor de dilución de la muestra Fd = 10 v Volumen de la muestra tomada V = 3 mL Fc Factor de conversión de unidades de concentración de µg/mL a mg/mL Fc = 10-3  Cantidad de fármaco disuelto en el vaso (Di) &'( 𝐷! = 𝑋! 𝐹" 𝑉! + 1 𝐸! #$% Di cantidad de fármaco disuelto en la muestra tomada al i-ésimo tiempo de muestreo Xi Concentración del fármaco (µg/mL) en el i-ésimo tiempo de muestreo Fd Factor de dilución de la muestra Fd = 10 Vi Volumen del medio de disolución en el i-ésimo tiempo de muestreo; Vi = Vo - [(N-1)v] Vi = Vo - [(N-1)v] Vt=5 min 500 mL - [(1-1)3 mL] = 500 mL Vo = volumen inicial del medio = 900 mL Vt=10 min 500 mL - [(2-1)3 mL] = 497 mL N = número de muestras extraídas Vt=15 min 500 mL - [(3-1)3 mL] = 494 mL v = volumen de muestra extraída Vt=20 min 500 mL - [(4-1)3 mL] = 491 mL Vt=30 min 500 mL - [(5-1)3 mL] = 488 mL $%& Vt=45 min 500 mL - [(6-1)3 mL] = 485 mL ' 𝐸' Suma de la cantidad de fármaco disuelto en la muestra extraída desde tiempo cero hasta !"# tiempo n-1  ()* Sumatoria de la cantidad de fármaco disuelto 8𝐸 + en la muestra extraída %&' Et0+Et1+Et2+Et3 Et0+Et1+Et2 $%& +Et4 hasta Suma de la cantidad de fármaco disuelto en la muestra extraída desde tiempo cero +Et3+ Et4 , 𝐸' +Et5 tiempo n-1 !"# Et0 Cantidad disuelta en la muestra extraída al tiempo 0 minutos E1 Cantidad disuelta en la muestra extraída al tiempo 1 = 5 minutos E2 Cantidad disuelta en la muestra extraída al tiempo 2 = 10 minutos E3 Cantidad disuelta en la muestra extraída al tiempo 3 = 15 minutos E4 Cantidad disuelta en la muestra extraída al tiempo 4 = 30 minutos E5 Cantidad disuelta en la muestra extraída al tiempo 5 = 45 minutos  Porciento de fármaco disuelto (%Di) 𝐷! % 𝐷! = ∗ 100 𝑑𝑜𝑠𝑖𝑠 % Di porciento de fármaco disuelto en el i-ésimo tiempo de muestreo Di cantidad de fármaco disuelto en la muestra tomada al i-ésimo tiempo de muestreo dosis cantidad de fármaco indicado en el marbete del producto  Cálculos de porciento disuelto sin reposición Vol final 3 mL 5 mL Respuesta analítica 0.5 mL 500 mL Dilución: 0.5 mL en 5 mL Di Ei Fd = 5 mL/0.5 mL = 10 Xi absorbancia $%& Tiempo A Xi Ei Di % Dis (minutos) (µg/mL) , 𝐸' (mg) (mg) (mg) (mg) !"# 5 A1 X1 10 x 3 x 10-3 E0 10 x 500 x 10-3 % Dist= 5 min 10 A2 X2 10 x 3 x 10-3 E0+E1 10 x 497 x 10-3 % Dist=10 min 15 A3 X3 10 x 3 x 10-3 E0+E1+E2 10 x 494 x 10-3 % Dist= 15 min 20 A4 X4 10 x 3 x 10-3 E0+E1+E2+E3 10 x 491 x 10-3 % Dist= 20 min 30 A5 X5 10 x 3 x 10-3 E0+E1+E2+E3+E4 10 x 488 x 10-3 % Dist= 530min 45 A6 X6 10 x 3 x 10-3 E0+E1+E2+E3+E4+E5 10 x 485 x 10-3 % Dist= 45 min  Ejemplo cálculos unidad 1 medicamento de referencia Vol final 3 mL 5 mL Respuesta analítica 0.5 mL 500 mL Dilución: 0.5 mL en 5 mL Di Ei Fd = 5 mL/0.5 mL = 10 Xi absorbancia $%& Tiempo A Xi Ei Di % Dis , 𝐸' (minutos) (µg/mL) (mg) (mg) (mg) !"# (mg) 5 0.274 41.2 1.2 0 0 205.8 205.8 41.2 10 0.417 59.9 1.8 1.2 1.2 297.9 299.1 59.8 15 0.548 92.3 2.8 1.2+1.8 3.0 455.9 458.9 91.8 20 0.635 91.6 2.7 1.2+1.8+2.8 5.8 449.7 455.5 91.1 30 0.732 93.3 2.8 1.2+1.8+2.8+2.7 8.5 455.4 494.7 98.9 45 0.779 1.2+1.8+2.8+2.7+ 11.3 94.7 2.8 459.4 501.5 100.3 Análisis de datos  Estadística descriptiva 1. Generar por separado 1 tabla para el medicamento de referencia y medicamento de prueba con la siguiente información: A. Porciento disuelto para cada una de las unidades de dosificación en el i-ésimo tiempo de muestreo B. Porciento disuelto promedio en el i-ésimo tiempo de muestreo C. Valor mínimo de porciento disuelto en el i-ésimo tiempo de muestreo D. Valor de la mediana de porciento disuelto en el i-ésimo tiempo de muestreo E. Valor máximo de porciento disuelto en el i-ésimo tiempo de muestreo F. Desviación estándar en el i-ésimo tiempo de muestreo G. Coeficiente de variación en el i-ésimo tiempo de muestreo  Cantidad disuelta (%) Medicamento de prueba Medicamento de referencia No Tiempo de muestreo (min) No Tiempo de muestreo (min) Unidad 10 15 30 45 60 Unidad 10 15 30 45 60 1 55.1 77.5 90.6 94.8 95.6 1 56.7 79.6 110.6 100.7 99.5 2 56.1 76.4 90.9 94.9 94.6 2 55.0 81.0 98.4 99.9 99.8 3 55.5 77.0 90.5 95.2 93.9 3 58.9 82.4 96.5 100.6 100.6 4 55.0 77.8 89.4 94.7 93.7 4 59.5 82.1 98.8 99.2 101.3 5 55.5 77.2 91.4 97.0 94.7 5 53.8 78.1 98.8 100.4 100.8 6 41.5 75.7 90.7 95.7 95.2 6 54.5 81.5 98.7 100.9 99.9 7 41.8 70.1 82.9 93.1 94.0 7 44.4 74.3 96.2 97.2 98.1 8 42.5 61.0 83.1 95.6 94.9 8 44.4 72.4 96.2 96.2 97.8 9 41.1 61.8 83.8 96.1 94.4 9 43.9 73.2 95.7 96.0 98.2 10 41.6 66.2 84.8 95.7 95.8 10 45.0 72.9 96.8 97.6 98.6 11 41.6 67.3 84.3 95.5 94.9 11 45.5 75.1 96.7 96.6 98.6 12 41.6 69.1 86.4 95.6 95.5 12 44.2 75.1 95.2 97.3 97.1 Promedio 47.4 71.4 87.4 95.4 94.8 Promedio 50.5 77.3 98.2 98.4 99.2 Mínimo 41.1 61 82.9 93.1 93.7 Mínimo 43.9 72.4 95.2 96 97.1 Mediana 42.2 72.9 87.9 95.6 94.8 Mediana 49.7 76.6 96.8 97.6 99.1 Máximo 56.1 77.8 91.4 97.0 95.8 Máximo 59.5 82.4 110.6 100.9 101.3 DE 7.1 6.3 3.5 1.0 0.7 DE 6.4 3.9 4.1 1.9 1.3 CV 15.0 8.8 4.0 1.0 0.7 CV 12.7 5.0 4.2 1.9 1.3  Estadística descriptiva 2. Gráfica del porciento disuelto respecto al tiempo de todas unidades del medicamento de referencia 3. Gráfica del porciento disuelto respecto al tiempo de todas unidades del medicamento de prueba 4. Gráfica comparativa del porciento disuelto promedio respecto al tiempo del medicamento de prueba vs medicamento de referencia; incluir las barras correspondiente a su desviación estándar  Perfil de disolución Perfil de disolución medicamento de Perfil de disolución medicamento de 150 150 prueba referencia % Disuelto % Disuelto 100 100 50 50 0 0 0 10 20 30 40 50 60 0 10 20 30 40 50 60 1 2 Tiempo 3 (min) 4 5 6 1 2 Tiempo 3 (min) 4 5 6  Perfil de disolución comparativo de los medicamentos del estudio Perfilde disolución 150.0 Metronidazol tabletas 500 mg % DisueltoTítulo del eje Prueba Referencia 100.0 50.0 0.0 0 10 20 30 40 50 60 Tiempo (min) Prueba de disolución  Prueba de disolución AAS, Tabletas Disolución. MGA 0291 Aparato I FEUM 11 Ed Cantidad del ingrediente activo disuelto (Q) expresado en % respecto a la cantidad indicada en marbete Criterio de aceptación; Q = 80 % a los 30 minutos No Total Criterio de aceptación Valor Etapa unidades unidades S1 6 6 A. Cada unidad no es menor que Q + 5 % A. cada unidad > 85 % A. Promedio de las 12 unidades (S1+S2) ³ A. ³ 80% S2 6 12 Q, y B. Ninguna < 65% B. Ninguna unidad < Q - 15 % A. Promedio de las 24 unidades A. ³ 80% (S1+S2+S3) ³ Q, y B. No más 2 < 65% S3 12 24 B. No más de 2 unidades < Q - 15 % C. Ninguna < 55% C. Ninguna unidad < Q - 25%  Ejemplo de tabla de resultados Medicamento de prueba Medicamento de referencia No Tiempo de muestreo (min) No Tiempo de muestreo (min) Unidad 10 15 30 45 60 Unidad 10 15 30 45 60 1 55.1 77.5 90.6 94.8 95.6 1 56.7 79.6 110.6 100.7 99.5 2 56.1 76.4 90.9 94.9 94.6 2 55.0 81.0 98.4 99.9 99.8 3 55.5 77.0 90.5 95.2 93.9 3 58.9 82.4 96.5 100.6 100.6 4 55.0 77.8 89.4 94.7 93.7 4 59.5 82.1 98.8 99.2 101.3 5 55.5 77.2 91.4 97.0 94.7 5 53.8 78.1 98.8 100.4 100.8 6 41.5 75.7 90.7 95.7 95.2 6 54.5 81.5 98.7 100.9 99.9 7 41.8 70.1 82.9 93.1 94.0 7 44.4 74.3 96.2 97.2 98.1 8 42.5 61.0 83.1 95.6 94.9 8 44.4 72.4 96.2 96.2 97.8 9 41.1 61.8 83.8 96.1 94.4 9 43.9 73.2 95.7 96.0 98.2 10 41.6 66.2 84.8 95.7 95.8 10 45.0 72.9 96.8 97.6 98.6 11 41.6 67.3 84.3 95.5 94.9 11 45.5 75.1 96.7 96.6 98.6 12 41.6 69.1 86.4 95.6 95.5 12 44.2 75.1 95.2 97.3 97.1 Promedio 47.4 71.4 87.4 95.4 94.8 Promedio 50.5 77.3 98.2 98.4 99.2 Mínimo 41.1 61 82.9 93.1 93.7 Mínimo 43.9 72.4 95.2 96 97.1 Mediana 42.2 72.9 87.9 95.6 94.8 Mediana 49.7 76.6 96.8 97.6 99.1 Máximo 56.1 77.8 91.4 97.0 95.8 Máximo 59.5 82.4 110.6 100.9 101.3 DE 7.1 6.3 3.5 1.0 0.7 DE 6.4 3.9 4.1 1.9 1.3 CV 15.0 8.8 4.0 1.0 0.7 CV 12.7 5.0 4.2 1.9 1.3 Factor de similitud  Árbol de decisión aplicar factor de similitud SI NO APLICA f2 los medicamentos se consideran de MUY RÁPIDA DISOLUCIÓN ¿el fármaco se calcular los % disuelve 85% disueltos de ambos o más a los 15 medicamentos minutos o antes? verificar valores de NO coeficiente de variación  Árbol de decisión aplicar factor de similitud SI Calcular f2 CV £ 20% tiempo 1 verificar valores de coeficiente de variación CV £ 10% tiempo subsecuentes Aplicar otra prueba estadística NO  Árbol de decisión aplicar factor de similitud SI Perfiles de Disolución SIMILARES Valor de f2 Calcular f2 entre 50-100 Perfiles de Disolución NO DIFERENTES  Medicamento de prueba Medicamento de referencia No Tiempo de muestreo (min) No Tiempo de muestreo (min) Unidad 10 15 30 45 60 Unidad 10 15 30 45 60 1 55.1 77.5 90.6 94.8 95.6 1 56.7 79.6 110.6 100.7 99.5 2 56.1 76.4 90.9 94.9 94.6 2 55.0 81.0 98.4 99.9 99.8 3 55.5 77.0 90.5 95.2 93.9 3 58.9 82.4 96.5 100.6 100.6 4 55.0 77.8 89.4 94.7 93.7 4 59.5 82.1 98.8 99.2 101.3 5 55.5 77.2 91.4 97.0 94.7 5 53.8 78.1 98.8 100.4 100.8 6 41.5 75.7 90.7 95.7 95.2 6 54.5 81.5 98.7 100.9 99.9 7 41.8 70.1 82.9 93.1 94.0 7 44.4 74.3 96.2 97.2 98.1 8 42.5 61.0 83.1 95.6 94.9 8 44.4 72.4 96.2 96.2 97.8 9 41.1 61.8 83.8 96.1 94.4 9 43.9 73.2 95.7 96.0 98.2 10 41.6 66.2 84.8 95.7 95.8 10 45.0 72.9 96.8 97.6 98.6 11 41.6 67.3 84.3 95.5 94.9 11 45.5 75.1 96.7 96.6 98.6 12 41.6 69.1 86.4 95.6 95.5 12 44.2 75.1 95.2 97.3 97.1 Promedio 47.4 71.4 87.4 95.4 94.8 Promedio 50.5 77.3 98.2 98.4 99.2 Mínimo 41.1 61 82.9 93.1 93.7 Mínimo 43.9 72.4 95.2 96 97.1 Mediana 42.2 72.9 87.9 95.6 94.8 Mediana 49.7 76.6 96.8 97.6 99.1 Máximo 56.1 77.8 91.4 97.0 95.8 Máximo 59.5 82.4 110.6 100.9 101.3 DE 7.1 6.3 3.5 1.0 0.7 DE 6.4 3.9 4.1 1.9 1.3 CV 15.0 8.8 4.0 1.0 0.7 CV 12.7 5.0 4.2 1.9 1.3  Factor de similitud (f2) 1 𝑓) = 50 ∗ 𝑙𝑜𝑔 ∗ 100 1 1 + ∑+*$( R * − T* ) n n Tiempos de muestreo considerados en el cálculo Rt Media del porciento disuelto del medicamento de referencia en el i´ésimo tiempo de muestreo Tt Media del porciento disuelto del medicamento de prueba en el i´ésimo tiempo de muestreo  1 Tiempo (min) 10 15 30 45 60 𝑓. = 50 ∗ 𝑙𝑜𝑔 ∗ 100 1 Referencia (R) 50.5 77.3 98.2 98.4 99.2 1 + ∑0/&* R / − T/. n Prueba (T) 47.4 71.4 87.4 95.4 94.8 Calcular la diferencia del % disuelto Mref - % disuelto Mpba Rt-Tt 3.1 5.9 10.8 3.0 4.4 Obtener el cuadrado de la diferencia del % disuelto (Rt-Tt)2 9.61 34.81 116.64 9.00 19.36 $ Determinar la sumatoria de la diferencia al cuadrado ( ' 𝑇! − 𝑅! 161.06 !"& $ Dividir la sumatoria entre el número de tiempos de 1 ( muestreo 𝑛 ' 𝑇! − 𝑅! 53.69 !"& $ 1 ( Sumar + 1 1 + ' 𝑇! − 𝑅! 54.69 𝑛 !"& 1 Obtener la raíz cuadrada 1+ 𝑛 ∑$ ( 7.39 !"& 𝑇! − 𝑅! 1 Calcular la inversa del valor 1 0.1352 1 + ∑*)"& R ) − T) ( n 1 Multiplicar por 100 1+ ( ∗ 100 13.52 𝑛 ∑$ !"& 𝑇! − 𝑅! 1 Obtener el logaritmo base 10 𝑙𝑜𝑔 1+ 𝑛 ∑$ ( ∗ 100 1.13 !"& ! − 𝑅! 𝑇 1 50 ∗ 𝑙𝑜𝑔 1+ ( ∗ 100 Multiplicar por 50 𝑛 ∑$ !"& 𝑇! − 𝑅! 56.6 a 1 𝑓. = 50 ∗ 𝑙𝑜𝑔 ∗ 100 1 1 + n ∑0/&* R / − T/. Si 50 > f2 £ 100 los Perfiles de Disolución son similares  Guidance for Industry Dissolution Testing of Immediate Release Solid Oral Dosage Forms V. Dissolution Profile comparisons. A. Model Independent Approach Using a Similarity Factor. Pag. 9  Guideline on the Investigation on Bioequivalence Appendix I. Dissolution testing and Similarity of Dissolution Profiles. Pag. 21/27  WHO Technical Reports Series No. 992, 2015 Annex 7 Multisource (generic) pharmaceutical products: guidelines on registration requirements to establish interchangeability Appendix 1. Recommendattions for conducting and assesing comparative dissolution profiles. Pag. 183- 184 Problema perfil de disolución  Relación entre el factor de similitud y la diferencia promedio de los perfiles de disolución 100 El factor de similitud tiene alta sensibilidad f2 para detectar 50 diferencias f2 entre 50 y 100 f2 = 100 curvas iguales f2 = 82.5 ¹ 2% 0 10 100 f2 = 65 ¹ 5% % disuelto f2 = 50 ¹ 10%  Conclusiones § Dos perfiles (prueba y referencia) son considerados similares cuando f2 es ³ 50 en el medio único o los 3 medios de prueba considerados (según aplique) § Cuando la disolución es > 85 % en < 15 minutos, la comparación de los perfiles no es necesaria y se declara una muy rápida disolución. Ref: VP Shah, Y Tsong, P Sathe and JP Liu. In vitro disolución profile comparison - statistics and analysis of similarity factor, f2. Pharm Res., 15: 889-896, 1999.  Informe final Conforme a la NOM-177-SSA1-2013 1. Descripción de los medicamentos 2. Equipos, instrumentos, materiales, sustancias de referencia y reactivos que fueron utilizados durante el estudio 3. Pruebas de valoración y Uniformidad de contenido 4. Método Analítico 5. Validación del método analítico 6. Prueba de perfil de disolución 7. Resultados 8. Conclusiones