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Questions and Answers
La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es una técnica de laboratorio común
utilizada para:
La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es una técnica de laboratorio común utilizada para:
Qué es un primer:
Qué es un primer:
Taq polimerasa, cebadores, ADN molde y nucleótidos, son los ingredientes principales de
la reacción PCR pero ¿se requiere algo más?:
Taq polimerasa, cebadores, ADN molde y nucleótidos, son los ingredientes principales de la reacción PCR pero ¿se requiere algo más?:
En la etapa de desnaturalización que Tª se debe alcanzar:
En la etapa de desnaturalización que Tª se debe alcanzar:
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En la etapa de extensión que Tª en º C se debe alcanzar:
En la etapa de extensión que Tª en º C se debe alcanzar:
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. Los cebadores para PCR son pedazos cortos de ADN de cadena sencilla, generalmente de
unos … nucleótidos de longitud:
. Los cebadores para PCR son pedazos cortos de ADN de cadena sencilla, generalmente de unos … nucleótidos de longitud:
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La Taq polimerasa realmente es:
La Taq polimerasa realmente es:
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Qué cinetica sigue la PCR:
Qué cinetica sigue la PCR:
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En la fase de anillado o annealing …:
En la fase de anillado o annealing …:
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La Taq polimerasa se aisla de:
La Taq polimerasa se aisla de:
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Qué componente incluyen los tampones de reacción en PCR:
Qué componente incluyen los tampones de reacción en PCR:
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Una característica buscada en un cebador es que:
Una característica buscada en un cebador es que:
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El equipo empleado para la técnica es:
El equipo empleado para la técnica es:
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Qué material no se emplea para visualizar en electroforesis los productos de PCR:
Qué material no se emplea para visualizar en electroforesis los productos de PCR:
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La RT-PCR emplea…:
La RT-PCR emplea…:
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El objetivo de la anterior técnica es:
El objetivo de la anterior técnica es:
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Se realiza sobre preparaciones fijadas de tejidos en un porta:
Se realiza sobre preparaciones fijadas de tejidos en un porta:
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Se trabaja con 4 cebadores aumentando la sensibilidad:
Se trabaja con 4 cebadores aumentando la sensibilidad:
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Se trabaja con 2 ó más pares de cebadores en:
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El objetivo de la anterior es:
El objetivo de la anterior es:
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Un gen muy empleado como diana molecular en identificación de bacterias es:
Un gen muy empleado como diana molecular en identificación de bacterias es:
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Una forma de incrementar la especificidad en la técnica de PCR es mediante:
Una forma de incrementar la especificidad en la técnica de PCR es mediante:
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Entre las características técnicas más importantes de las polimerasas de alta
fidelidad no se encuentran:
Entre las características técnicas más importantes de las polimerasas de alta fidelidad no se encuentran:
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Las curvas de desnaturalización pueden utilizarse cuando ...:
Las curvas de desnaturalización pueden utilizarse cuando ...:
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La síntesis de ADN termina cuando se añade ...:
La síntesis de ADN termina cuando se añade ...:
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En medicina forense, se puede amplificar un ADN desde:
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La amplificación con arranque en caliente ...:
La amplificación con arranque en caliente ...:
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En qué consiste la técnica de amplificación denominada Touch down ...:
En qué consiste la técnica de amplificación denominada Touch down ...:
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En qué consiste la técnica de amplificación denominada amplificación asimétrica ...: (p6
paper)
En qué consiste la técnica de amplificación denominada amplificación asimétrica ...: (p6 paper)
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"La PCR clásica amplifica una secuencia de DNA cuyos extremos (donde se unen los
cebadores) son conocidos. No obstante, actualmente ya es posible amplificar en otras
circunstancias menos favorables. Por ejemplo ... : d (p8 paper)
"La PCR clásica amplifica una secuencia de DNA cuyos extremos (donde se unen los cebadores) son conocidos. No obstante, actualmente ya es posible amplificar en otras circunstancias menos favorables. Por ejemplo ... : d (p8 paper)
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Una forma de incrementar la especificidad en la técnica de PCR, es ...:
Una forma de incrementar la especificidad en la técnica de PCR, es ...:
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Las técnicas actuales empleadas en la PCR permiten realizar la amplificación a partir de
.
......................... ng de ADN genómico, y de menos cantidad en el caso de ADNc o ADN
proveniente de genes clonados en vectores:
Las técnicas actuales empleadas en la PCR permiten realizar la amplificación a partir de . ......................... ng de ADN genómico, y de menos cantidad en el caso de ADNc o ADN proveniente de genes clonados en vectores:
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. Los desoxinucleótidos trifosfatados deben adicionarse en una concentración óptima de
entre ............................. µM:
. Los desoxinucleótidos trifosfatados deben adicionarse en una concentración óptima de entre ............................. µM:
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Señale la correcta ...:
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En la RT-PCR es recomendable ...:
En la RT-PCR es recomendable ...:
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Existen muchos métodos para calcular la Tm de los iniciadores, pero todos toman en
consideración el contenido de nucleótidos, ...:
Existen muchos métodos para calcular la Tm de los iniciadores, pero todos toman en consideración el contenido de nucleótidos, ...:
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Señale la falsa ...:
Señale la falsa ...:
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Esto es, primero se realiza una PCR con un par de iniciadores externos para amplificar
una región de ADN extensa, que contiene el segmento diana que se desea amplificar. Después,
este producto de amplificación sirve de molde para una segunda PCR con otro par de
iniciadores internos (primers anidados) para amplificar una región más pequeña (interna)
corresponde a PCR...:
Esto es, primero se realiza una PCR con un par de iniciadores externos para amplificar una región de ADN extensa, que contiene el segmento diana que se desea amplificar. Después, este producto de amplificación sirve de molde para una segunda PCR con otro par de iniciadores internos (primers anidados) para amplificar una región más pequeña (interna) corresponde a PCR...:
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. Se realiza en una muestra de tejido embebida en parafina (laminilla) o congelada y
cortada en criostato. No requiere extracción del ADN del tejido. En la laminilla se añaden los
reactivos necesarios para la PCR y se colocan en un termociclador especial, ya que en lugar de
tener orificios para colocar tubos contiene ranuras para colocar las laminillas, corresponde a
PCR ...:
. Se realiza en una muestra de tejido embebida en parafina (laminilla) o congelada y cortada en criostato. No requiere extracción del ADN del tejido. En la laminilla se añaden los reactivos necesarios para la PCR y se colocan en un termociclador especial, ya que en lugar de tener orificios para colocar tubos contiene ranuras para colocar las laminillas, corresponde a PCR ...:
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Para la PCR ................................. se diseñan primers capaces de hibridar solamente en
secuencias con presencia de una mutación, por lo que, en caso de estar ausente, no se produce
un producto de PCR. Como control se produce una PCR con primers diseñados para la
amplificación de la forma silvestre del gen, cuyos resultados deben coincidir con los obtenidos
con los primers que amplifican la mutación...:
Para la PCR ................................. se diseñan primers capaces de hibridar solamente en secuencias con presencia de una mutación, por lo que, en caso de estar ausente, no se produce un producto de PCR. Como control se produce una PCR con primers diseñados para la amplificación de la forma silvestre del gen, cuyos resultados deben coincidir con los obtenidos con los primers que amplifican la mutación...:
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Es aquella en la que el producto de PCR se analiza después de 25 a 35 ciclos en el punto
previo a la saturación de la reacción, mediante un gel de electroforesis ...:
Es aquella en la que el producto de PCR se analiza después de 25 a 35 ciclos en el punto previo a la saturación de la reacción, mediante un gel de electroforesis ...:
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Esta modalidad de PCR permite detectar la presencia o ausencia de un fragmento de
ADN determinado. Es decir, sólo reporta si una muestra es positiva o negativa ante la
presencia de un determinado ADN. Se emplea para el diagnóstico de enfermedades infecciosas
y sólo permite confirmar la presencia o ausencia de un determinado agente patógeno, esto es,
si una persona está o no infectada...:
Esta modalidad de PCR permite detectar la presencia o ausencia de un fragmento de ADN determinado. Es decir, sólo reporta si una muestra es positiva o negativa ante la presencia de un determinado ADN. Se emplea para el diagnóstico de enfermedades infecciosas y sólo permite confirmar la presencia o ausencia de un determinado agente patógeno, esto es, si una persona está o no infectada...:
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Los sistemas de detección por fluorescencia empleados en la PCR en tiempo real pueden
ser ...:
Los sistemas de detección por fluorescencia empleados en la PCR en tiempo real pueden ser ...:
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El uso de SYBERGreen implica un diseño muy cuidadoso de los primers con el fin de
evitar la formación de dímeros, se emplea en...:
El uso de SYBERGreen implica un diseño muy cuidadoso de los primers con el fin de evitar la formación de dímeros, se emplea en...:
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Las sondas TaqMan se basan en el método...:
Las sondas TaqMan se basan en el método...:
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Señale la incorrecta acerca de PCR en tiempo real con primers LUX ...:
Señale la incorrecta acerca de PCR en tiempo real con primers LUX ...:
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. Señale la incorrecta acerca de PCR Semicuantificación en tiempo real con el método
DDCt ...:
. Señale la incorrecta acerca de PCR Semicuantificación en tiempo real con el método DDCt ...:
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Una PCR de 15 ciclos, partiendo de 12 copias de ADN molde, producirá la cantidad de P
...:
Una PCR de 15 ciclos, partiendo de 12 copias de ADN molde, producirá la cantidad de P ...:
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Señale la falsa ...:
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Señale la falsa...:
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Study Notes
PCR Technique
- PCR (Polymerase Chain Reaction) is a common laboratory technique used to amplify specific DNA sequences.
- The main components of PCR include Taq polymerase, primers, DNA template, and nucleotides.
Primers
- Primers are short, single-stranded DNA fragments (usually 15-30 nucleotides long) used to initiate PCR amplification.
Taq Polymerase
- Taq polymerase is an enzyme isolated from the thermophilic bacterium Thermus aquaticus, used in PCR to amplify DNA sequences.
PCR Process
- Denaturation occurs at high temperatures (around 94°C) to separate the DNA strands.
- Annealing occurs at a specific temperature (around 50-65°C) for primer binding.
- Extension occurs at a temperature optimal for Taq polymerase activity (around 72°C).
PCR Variations
- RT-PCR (Reverse Transcription PCR) is used to amplify RNA sequences.
- Touchdown PCR involves gradually decreasing the annealing temperature to increase specificity.
- Asymmetric PCR involves using unequal primer concentrations to amplify one strand of DNA.
- Nested PCR involves a second PCR amplification using internal primers to increase specificity.
PCR Optimization
- Increasing specificity in PCR can be achieved by optimizing primer design, annealing temperature, and Mg²⁺ concentration.
PCR Applications
- PCR can be used in forensic medicine to amplify DNA from small samples.
- PCR can be used for in situ PCR, where the PCR reaction is performed on fixed tissue samples.
- Real-time PCR allows for simultaneous amplification and quantification of DNA sequences.
Real-Time PCR
- Real-time PCR detects the amplification process in real-time, allowing for quantitative analysis.
- SYBR Green is a fluorescent dye used in real-time PCR to detect amplified DNA.
- TaqMan probes are used in real-time PCR to detect specific DNA sequences.
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Description
Proba os teus coñecementos sobre a reacción en cadea da polimerase (PCR) e os primers utilizados nesta técnica de laboratorio común.
