SIMULACRO TEST 3E ELECTROFORESIS
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Questions and Answers

La electroforesis (EF) es una técnica:

  • Separar biomoléculas según su tamaño y forma
  • Controlar una corriente eléctrica
  • Separar biomoléculas según su tamaño y carga eléctrica (correct)
  • Separar biomoléculas según su forma y carga eléctrica
  • La mayoría de las biomoléculas poseen una carga eléctrica, cuya magnitud depende de

  • La I eléctrica
  • interacciones polares
  • pH (correct)
  • tamaño
  • No es medio de soporte para la electroforesis:

  • Agarosa
  • Papel
  • Vidrio (correct)
  • Poliacrilamida
  • Con SDS, la movilidad electroforética de la proteína depende exclusivamente de:

    <p>masa molecular</p> Signup and view all the answers

    Un volumen de muestra aproximado en SDS-PAGE es:

    <p>5 uL</p> Signup and view all the answers

    El stacking gel tiene como función:

    <p>Concentrar la muestra en una banda estrecha</p> Signup and view all the answers

    El isoelectroenfoque se basa en que:

    <p>Al avanzar los componentes de la muestra a lo largo del gel se encuentran en entornos de pH diferente, y eventualmente alcanzan una región en la cual el pH es igual al punto isoeléctrico de la molécula muestra y, en consecuencia, ésta detiene su avance</p> Signup and view all the answers

    Tampón TAE se emplea habitualmente en electroforesis de agarosa con ADN, qué composición presenta:

    <p>Tris 40 mM, ác. acético 19 mM, EDTA 1 mM, pH=7,5</p> Signup and view all the answers

    El EDTA es de naturaleza:

    <p>anfótera</p> Signup and view all the answers

    El bromuro de etidio es un agente:

    <p>Actuar como un agente intercalante en ADN</p> Signup and view all the answers

    En la actualidad, el agente de visualización de ADN más empleado por su baja toxicidad es:

    <p>SYBR Green</p> Signup and view all the answers

    El reactivo de visualización de ADN llamado GelRed™ se basa en:

    <p>Emite fluorescencia de color rojo</p> Signup and view all the answers

    La electroforesis bidimensional es una técnica de alta resolución cuyo objetivo es:

    <p>la separación de mezclas de proteínas altamente complejas</p> Signup and view all the answers

    En electroforesis de campo pulsante se emplean:

    <p>geles de agarosa al 1%</p> Signup and view all the answers

    La movilidad electroforética µ es:

    <p>La velocidad por unidad de campo</p> Signup and view all the answers

    La fórmula de la movilidad electroforética es:

    <p>v/E = µ</p> Signup and view all the answers

    El movimiento de las moléculas en el seno de un E dentro de una matriz como un gel, esta gobernado también por dos fuerzas…:

    <p>la fricción con el solvente y, por otro lado, las moléculas tienen que moverse en forma aleatoria o movimiento browniano debido a que poseen energía cinética propia denominada difusión</p> Signup and view all the answers

    . La Agarosa es un:

    <p>Es un polisacárido, producto purificado de algas (composición similar al agar-agar). Se disuelve en caliente (aprox. 95 °C) y al enfriar solidifica formando un gel, de alta porosidad</p> Signup and view all the answers

    Es un detergente aniónico empleado en EF que se une a las proteínas, desnaturalizándolas en una conformación extendida recubierta de moléculas del detergente …:

    <p>SDS</p> Signup and view all the answers

    En EF de proteínas, para reducir los enlaces S-S se suele emplear comúnmente el :

    <p>β-mercaptoetanol</p> Signup and view all the answers

    Indique un agente iniciador de la polimerización del gel de acrilamida:

    <p>Persulfato amónico en baja concentración</p> Signup and view all the answers

    Indique un agente catalizador de la polimerización del gel de acrilamida:

    <p>TEMED</p> Signup and view all the answers

    Para controlar el avance del frente de electroforesis, se añade a la muestra un colorante marcador (“tracking dye”), molécula cargada y de pequeño tamaño, el más habitual es:

    <p>Azul de bromofenol</p> Signup and view all the answers

    El colorante anterior…:

    <p>Avanza más que cualquier componente de la muestra</p> Signup and view all the answers

    Señale la correcta:

    <p>todas lo son</p> Signup and view all the answers

    La Electroforesis de campo pulsante se basa en:

    <p>Alterar periódicamente la orientación del campo eléctrico aplicado, activando alternativamente dos pares de electrodos. El frecuente cambio de dirección del campo eléctrico consigue que las moléculas se desplieguen y avancen a través de los poros en conformación extendida</p> Signup and view all the answers

    Se puede obtener una estimación de la masa molecular (en kDa) de proteínas empleando SDS-PAGE, y de fragmentos de DNA (en pb) empleando electroforesis en agarosa …:

    <p>En ambos casos, en uno de los pocillos del gel se carga una mezcla de moléculas patrón de tamaño conocido, con el fin de poder trazar la curva de calibrado</p> Signup and view all the answers

    Una de las aplicaciones de la EF es la elaboración de Mapas de restricción de DNA que se basa en…:

    <p>Consiste en tratarlo con distintas enzimas de restricción, analizar mediante electroforesis en gel de agarosa los fragmentos resultantes e intentar reconstruir la secuencia de la molécula original</p> Signup and view all the answers

    El xileno-cianol …:

    <p>Es de color azul</p> Signup and view all the answers

    En la electroforesis bidimensional …:

    <p>1º las proteínas son separadas en un gel con gradiente de pH en condiciones desnaturalizantes de acuerdo con su punto isoeléctrico</p> Signup and view all the answers

    La electroforesis bidimensional:

    <p>es una técnica de alta resolución</p> Signup and view all the answers

    La electroforesis de campo pulsante se emplea para poder separar y visualizar:

    <p>Moléculas o fragmentos de DNA de longitud superior a 20-40 kb</p> Signup and view all the answers

    El fundamento de la técnica anterior es:

    <p>Se emplean geles de agarosa al 1 %, y se altera periódicamente la orientación del campo eléctrico aplicado, activando alternativamente dos pares de electrodos</p> Signup and view all the answers

    La electroforesis preparativa tiene como objetivo:

    <p>La obtención de cantidades significativas de los componentes de la muestra por separado</p> Signup and view all the answers

    Cuántas pb presenta aproximadamente la banda B en el electroferograma superior:

    <p>1960</p> Signup and view all the answers

    De qué molécula hablamos en la cuestión anterior:

    <p>ADN</p> Signup and view all the answers

    El campo eléctrico necesario para llevar a cabo una separación por electroforesis capilar es usualmente:

    <p>10-30 kV</p> Signup and view all the answers

    No es una ventaja de la electroforesis capilar:

    <p>Empleo de colorantes no tóxicos en muy pequeñas cantidades</p> Signup and view all the answers

    Qué caracteriza al flujo electroosmótico de la electroforesis capilar:

    <p>Su perfil de avance plano</p> Signup and view all the answers

    La separación en electroforesis capilar se lleva a cabo en un tubo capilar de diámetro interno:

    <p>10-75 um</p> Signup and view all the answers

    Algunos medios de soporte (“geles”, medios semisólidos o gelatinosos) están formados por polímeros que forman una malla, matriz o red tridimensional a través de la cual deben avanzar las moléculas de la muestra, que queda embebida en el medio de soporte electroforético. Como consecuencia, la fricción es notable y los factores de …………. y … ……… adquieren una alta relevancia en la separación:

    <p>forma y tamaño</p> Signup and view all the answers

    Study Notes

    Electroforesis

    • La mayoría de las biomoléculas poseen una carga eléctrica, cuya magnitud depende de la molécula en cuestión.

    Propiedades de la Electroforesis

    • El stacking gel tiene como función concentrar las muestras en una zona pequeña para mejorar la resolución.
    • El isoelectroenfoque se basa en que las moléculas se mueven hasta una zona donde su carga es cero.

    Técnicas de Electroforesis

    • La electroforesis bidimensional es una técnica de alta resolución que separa moléculas según su carga y masa molecular.
    • La electroforesis de campo pulsante se emplea para separar y visualizar moléculas de gran tamaño.

    Agentes y Medios de Soporte

    • El SDS es un detergente aniónico empleado en EF que se une a las proteínas, desnaturalizándolas en una conformación extendida recubierta de moléculas del detergente.
    • El EDTA es de naturaleza quelante y se emplea como agente quélant de iones metálicos.
    • El bromuro de etidio es un agente intercalante que se utiliza para visualizar ADN.
    • El GelRed es un reactivo de visualización de ADN que se basa en la fluorescencia.

    Separación de Moléculas

    • La movilidad electroforética µ es la velocidad a la que una molécula se mueve en un campo eléctrico.
    • La fórmula de la movilidad electroforética es µ = (E x z) / (6 x π x η x r).

    Tipos de Electroforesis

    • La electroforesis capilar se lleva a cabo en un tubo capilar de diámetro interno kleinen y se utiliza para separar moléculas pequeñas.
    • La electroforesis preparativa tiene como objetivo obtener cantidades grandes de moléculas purificadas.

    Aplicaciones de la Electroforesis

    • Una de las aplicaciones de la EF es la elaboración de Mapas de restricción de DNA que se basa en la fragmentación del ADN mediante enzimas de restricción.

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    Descubre si conoces los fundamentos de la técnica de electroforesis, utilizada para separar biomoléculas según su tamaño y carga eléctrica. Elige la opción correcta y desafía tus conocimientos en bioquímica.

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