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Questions and Answers
Perché la reazione di condensazione del nucleotide non è favorita energeticamente?
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Qual è il ruolo del pirofosfato nella condensazione dei nucleotidi?
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Quale struttura sostituisce la timina nell'RNA?
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Qual è il legame che unisce un nucleotide all'altro?
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Qual è la direzione della polarizzazione del legame fosfodiesterico?
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Cosa rappresenta il termine 'genoma'?
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Quali componenti sono necessari per la struttura di un nucleotide?
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Cosa si intende con DNA non codificante?
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Qual è la principale differenza tra la trascrizione negli eucarioti e nei procarioti?
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Qual è la teoria che spiega l'origine della cellula eucariotica?
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Quali sono i due tipi di DNA presenti nella cellula eucariotica secondo la teoria endosimbiotica?
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Cosa caratterizza gli archei rispetto ai batteri?
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Quale affermazione sui virus è corretta?
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Cosa accade alla traduzione e trascizione nei procarioti?
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Qual è la principale caratteristica delle cellule eucariotiche?
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Qual è il ruolo del rRNA 16S nel sequenziamento molecolare?
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Qual è la distanza verticale di una coppia di basi nella forma A rispetto alla forma B?
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In quale condizione il DNA assume la forma A?
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Qual è il numero esatto di coppie di basi per giro di elica nella forma B?
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Che tipo di sequenze di basi provocano la forma Z del DNA?
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Qual è una caratteristica distintiva della forma Z rispetto ad altre forme di DNA?
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Cosa provoca la distorsione zig-zag dei legami zucchero-fosfato nel DNA?
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Dove si trovano comunemente le 'G C island'?
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Quale dichiarazione è vera riguardo alla forma A del DNA?
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Qual è il significato del solco maggiore e minore nella struttura del DNA?
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Chi ha introdotto il vero concetto di complementarietà nel DNA?
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Qual è la componente di un Hairpin che corrisponde alle regioni di non complementarità?
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Quale delle seguenti affermazioni è corretta riguardo ai gruppi funzionali nel solco maggiore del DNA?
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Quale affermazione descrive correttamente la struttura tridimensionale del tRNA?
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Qual è la geometria delle basi azotate nella molecola di DNA?
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Cosa sono le sequenze palindromiche nel contesto delle strutture cruciformi?
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Quale parte del tRNA corrisponde alla regione del codone dell'mRNA?
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Qual è la firma associata alla coppia guanina-citosina nel solco maggiore?
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Che tipo di interazioni possono avvenire tra DNA e proteine?
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Cosa genera la formazione di strutture cruciformi nei filamenti di DNA?
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Qual è la rotazione delle basi rispetto alla loro impilazione nella struttura del DNA?
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Cosa accade all'amminoacido legato al terminale 3' del tRNA?
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Cosa rappresentano i solchi del DNA?
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Qual è il ruolo del tRNA nelle cellule?
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Cosa rappresenta il termine 'stelo' in un Hairpin?
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Cosa si intende per Tm in relazione al DNA?
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Quale coppia di basi forma più legami ad idrogeno?
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Qual è il principale fattore che determina la variazione della Tm?
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In un grafico che mette in relazione la Tm con la percentuale di G-C, quale tipo di relazione si osserva?
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Quale tecnica utilizza la denaturazione dei filamenti di DNA?
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Cosa determina la variazione di energia libera (ΔG) in relazione alla Tm?
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Quando un filamento di DNA ha una maggiore Tm?
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Quale dichiarazione riguardo ai legami ad idrogeno tra basi è corretta?
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Study Notes
Introduzione
- La lezione parte dall'esempio della pecora Dolly, evidenziando le difficoltà iniziali della clonazione e i progressi attuali.
- Si introducono le varie tecniche di sequenziamento del DNA, con particolare attenzione al metodo di Sanger e alle tecniche di Next Generation Sequencing, che hanno aumentato l'efficienza e ridotto i costi.
- Le applicazioni del sequenziamento del genoma sono ampie, con un'enfasi sulle analisi dei tumori e sulla resistenza ai farmaci.
- Vengono presentati i primi genomi batterici e eucariotici sequenziati, con un'importanza data alla conoscenza dei modelli sperimentali.
La Cellula
- Le cellule sono elementi fondamentali degli organismi viventi, e presentano tutte delle caratteristiche comuni, e differiscono morfologicamente per adattarsi alle specifiche funzioni.
- Tutte le cellule contengono informazioni necessarie per la riproduzione e per il funzionamento dei propri macchinari.
- Le cellule vengono distinte in procariotiche ed eucariotiche, ed in seguito si sono individuate le cellule archeti, considerate più arcaiche geograficamente (basse pressioni).
- La teoria endosimbiotica spiega l'origine delle cellule eucariotiche come risultato di fusioni.
Dogma Centrale
- Crick, nel 1958, ha enunciato il dogma centrale della biologia molecolare, definendo un flusso unidirezionale di informazione genetica: DNA → RNA → proteine.
- La proteina non può determinare la sequenza di DNA
- Anche se il flusso è unidirezionale, in alcuni casi l'informazione in generale può provenire dall'RNA e può essere trasferita al DNA (retrotrascrizione, presente nei retrovirus).
- Il DNA fornisce le informazioni per la sintesi di proteine; l'RNA svolge un ruolo intermedio tra le informazioni genetiche (DNA) e la conversione in proteine.
Il DNA
- La molecola di DNA è strutturata in una doppia elica, con i gruppi fosfato che si legano zuccheri e le basi azotate (adenina, guanina, citosina e timina negli eucarioti o uracile) che formano i legami a idrogeno.
- L'informazione genetica è contenuta nella sequenza di basi.
- I cromosomi sono unità organizzate di DNA contenute nel nucleo delle cellule eucariotiche, organizzate da proteine.
- I geni sono porzioni di DNA che contengono le istruzioni per produrre una specifica proteina.
Il Ciclo Cellulare
- Le cellule si dividono secondo preciso ciclo cellulare con le fasi: G1, S, G2, M.
- Il ciclo è controllato da fattori intrinseci ed estrinseci.
- Vi sono punti di controllo che verificano l'integrità del DNA per avviare o bloccare la divisione cellulare.
La Replicazione del DNA
- Il DNA si replica in modo semiconservativo.
- Due filamenti parentali vengono separati e usati come stampo per la sintesi di due nuovi filamenti.
- I frammenti di DNA vengono uniti dalle DNA ligasi per formare una doppia elica completa di DNA.
- Il processo è catalizzato da enzimi tra cui DNA polimerasi, primasi, elicasi e topoisomerasi.
La Trascrizione del DNA
- La trascrizione converte le informazioni da una sequenza di DNA in una molecola di mRNA.
- Le RNA polimerasi utilizzano un filamento di DNA come stampo per produrre un nuovo filamento di RNA.
- L'inizio della trascrizione richiede l'aggancio della RNA polimerasi ai promotori del gene.
- La trascrizione ha tre fasi: inizio, allungamento e terminazione.
- Negli eucarioti esistono tre tipi di RNA polimerasi (I, II e III), aventi diverse funzioni.
La Traduzione
- La traduzione converte I'informazione contenuta nell'mRNA in una sequenza di amminoacidi.
- Il ribosoma è l'apparato molecolare che lega I'mRNA e il tRNA e catalizza la formazione dei legami peptidici.
- I tRNA trasportano gli amminoacidi al ribosoma, e sono complementari ai codoni sull'mRNA.
- La sintesi delle proteine avviene secondo tre fasi: inizio (inizio catena), allungamento e terminazione.
Regolatoria Epigenetica
- Istiniche e non istiniche sono le due classi di proteine implicate nella regolazione della trascrizione nel nucleo.
- La modifica di queste proteine è un meccanismo epigenetico.
- La metilazione del DNA, è un altro meccanismo per regolare l'espressione genica, può spegnere un gene.
- Gli ormoni giocano un ruolo fondamentale nell'espressione genica modificando la cromatina.
Danni e Mutazioni
- I danni al DNA possono indurre mutazioni, se non riparati, alterando la sequenza del DNA.
- Le mutazioni possono derivare da errori di replicazione, da agenti chimici o da radiazioni.
- Esistono sistemi di riparo del DNA, per intervenire sui danni prima che diventino mutazioni.
I sistemi di riparo
- I sistemi di riparo del DNA intervengono in modo diverso, a seconda del tipo di danno riconosciuto.
- I principali sistemi sono BER (Base Excision Repair) e NER (Nucleotide Excision Repair).
- Il mismatch repair (MMR) interviene sugli errori di appaiamento delle basi durante la replicazione
- Il sistema NHEJ interviene nelle rotture a doppio filamento del DNA
- I sistemi di riparo del DNA sono critici per mantenere I'integrità del genoma e prevenire malattie genetiche.
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