Récepteurs Tyrosine Kinase et Voie des MAP Kinases
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Questions and Answers

Quel est le rôle principal des MAP Kinases dans la cellule ?

  • Transport des nutriments
  • Activation des facteurs de transcription et expression des gènes (correct)
  • Inhibition de la division cellulaire
  • Dégradation des protéines
  • Quelle est la première protéine activée dans la cascade de signalisation liée à EGF ?

  • SOS
  • Grb2 (correct)
  • RAF
  • MKKK
  • Qu'est-ce qui déclenche l'activation des protéines JAK lors de la dimérisation du récepteur ?

  • La liaison de RAS
  • La fixation du ligand (correct)
  • L'hydrolyse de GTP
  • La phosphorylation d'ERK1
  • Quelle est la fonction principale des protéines GTPases dans le cadre de la signalisation cellulaire ?

    <p>Médiation des cascades de phosphorylation (A)</p> Signup and view all the answers

    Qu'est-ce qui se produit lors de l'autophosphorylation des récepteurs aux cytokines ?

    <p>Les protéines médiatrices se fixent sur les phosphates (B)</p> Signup and view all the answers

    Quel processus est essentiel pour l'activation de STAT3 après la fixation de l'IL-6 ?

    <p>Dimérisation du récepteur (C)</p> Signup and view all the answers

    Quelle est l'importance de la phosphorylation par les protéines kinases dans la signalisation cellulaire ?

    <p>Elle modifie l'activité des protéines cibles (C)</p> Signup and view all the answers

    Quel est le rôle de la super famille des protéines GTPase dans le contexte donné ?

    <p>Elles régulent les signaux et le transport cellulaire (B)</p> Signup and view all the answers

    Qu'est-ce qui est nécessaire pour l'activation des récepteurs RTK?

    <p>Phosphorylation par le récepteur voisin (B)</p> Signup and view all the answers

    Quels types de processus cellulaires sont influencés par le récepteur de l'EGF?

    <p>La différenciation cellulaire (C)</p> Signup and view all the answers

    Quel est le rôle des ponts disulfure dans la structure des récepteurs d'insuline?

    <p>Stabiliser les chaînes polypeptidiques (C)</p> Signup and view all the answers

    Après la dimérisation des récepteurs RTK, quelle est la première étape d'activation?

    <p>Trans-activation de l'activité kinase (D)</p> Signup and view all the answers

    Quels types de protéines se fixent généralement sur les tyrosines phosphorylées des récepteurs RTK?

    <p>Protéines médiatrices (C)</p> Signup and view all the answers

    Quel type d'effet les récepteurs à activité kinase ont-ils généralement?

    <p>Effets à long terme (B)</p> Signup and view all the answers

    Quelle est la voie de signalisation impliquée par le récepteur de l'EGF?

    <p>Voie des MAP Kinases (D)</p> Signup and view all the answers

    Quel est le facteur de croissance qui a un récepteur formé en dimères et partagé avec l'insuline?

    <p>IGF1 (C)</p> Signup and view all the answers

    Quel type de courbe est utilisé pour passer de la cinétique de réponse à la concentration de réponse ?

    <p>Courbe de piques (B)</p> Signup and view all the answers

    Quel détergent est généralement utilisé pour charger les protéines en charge négative lors de l'analyse par Western Blot ?

    <p>SDS (C)</p> Signup and view all the answers

    Quel est le rôle de la nitrocellulose dans la méthode du Western Blot ?

    <p>Transférer les protéines (A)</p> Signup and view all the answers

    Lors d'une co-immunoprécipitation, que signifie la présence d'une autre protéine dans le culot après centrifugation ?

    <p>Une interaction entre protéines a eu lieu (D)</p> Signup and view all the answers

    Quel est l'effet de l'inhibiteur H89 sur la réponse physiologique ?

    <p>Il bloque une réponse physiologique (B)</p> Signup and view all the answers

    Quelle est la première étape de la méthode de Western Blot après la stimulation des cellules ?

    <p>Préparation de lysats cellulaires (C)</p> Signup and view all the answers

    Quel type d'anticorps est utilisé après la saturation des membranes dans le Western Blot ?

    <p>Anticorps primaire (B)</p> Signup and view all the answers

    Comment est révélée la présence de la protéine lors d'une co-immunoprécipitation ?

    <p>Par Western Blot (B)</p> Signup and view all the answers

    Quel est le rôle des protéines kinases JAK dans la voie de signalisation des facteurs Stat3 ?

    <p>Elles phosphorylent les facteurs Stat3 sur un résidu tyrosine. (B)</p> Signup and view all the answers

    Qu'est-ce qui déclenche la dégradation des récepteurs membranaires vers les lysosomes ?

    <p>L'ubiquitine. (B)</p> Signup and view all the answers

    Quel processus se produit après la phosphorylation des facteurs Stat3 ?

    <p>Ils se dimérisent et transloquent vers le noyau. (A)</p> Signup and view all the answers

    Quelle concentration de ligand peut être utilisée pour l'incubation dans l'étude des voies de signalisation ?

    <p>$10^{-12}M$ à $10^{-5}M$ (A)</p> Signup and view all the answers

    Quel type de culture cellulaire est généralement utilisé pour étudier les voies de signalisation ?

    <p>Cellules non cancéreuses. (B)</p> Signup and view all the answers

    Quelle méthode est utilisée pour mesurer la production des seconds messagers comme l'AMPc ?

    <p>Dosage Elisa. (C)</p> Signup and view all the answers

    Quel est le niveau d'activité enzymatique appelé lorsque le stimulateur n'est pas présent ?

    <p>Niveau basal. (C)</p> Signup and view all the answers

    Pourquoi est-il important de ne pas varier le temps d'incubation lors de l'expérimentation sur les concentrations de ligand ?

    <p>Pour s'assurer que les résultats sont comparables. (A)</p> Signup and view all the answers

    Quelle phase de la courbe concentration-réponse correspond à une augmentation rapide du ligand ?

    <p>Phase exponentielle (C)</p> Signup and view all the answers

    À quel moment de la courbe concentration-réponse est-ce que l'effet maximum, Emax, est atteint ?

    <p>Dans la phase plateau (D)</p> Signup and view all the answers

    Quel rôle joue l'EC50 dans l'évaluation de la réponse à un ligand ?

    <p>C'est la concentration qui donne 50% de la réponse maximum (D)</p> Signup and view all the answers

    Comment la sonde Fluo4 devient fluorescente ?

    <p>En étant excitée par une lumière de 488 nm et en fixant le calcium (C)</p> Signup and view all the answers

    Quel est le principe de l'imagerie calcique ?

    <p>Utiliser des chélateurs de calcium qui deviennent fluorescents avec le calcium (A)</p> Signup and view all the answers

    Quelle méthode permet de faire des statistiques à partir des réponses cellulaires dans un laboratoire ?

    <p>Lecteur de plaque (B)</p> Signup and view all the answers

    Quelle affirmation est correcte concernant la courbe concentration-réponse ?

    <p>Le plateau de saturation indique que l'effet maximum a été atteint (C)</p> Signup and view all the answers

    Qu'est-ce qui est observé lorsqu'on applique le Fluo4 sur les cellules et qu'on stimule les voies pour augmenter le calcium ?

    <p>La fluorescence augmente en raison de la fixation du calcium (C)</p> Signup and view all the answers

    Flashcards

    Récepteurs à activité kinase

    Famille de récepteurs cellulaires qui possèdent une activité kinase. Ils jouent un rôle crucial dans la signalisation cellulaire et contrôlent des fonctions cellulaires essentielles telles que la croissance, la différenciation et la prolifération.

    Récepteurs tyrosine kinase (RTK)

    Sous-famille de récepteurs à activité kinase. Ils possèdent un domaine tyrosine kinase qui permet la phosphorylation des tyrosines.

    Voie des MAP Kinases

    Voie de signalisation importante impliquée dans la croissance et la prolifération cellulaire. Elle est activée par les RTK et implique une cascade de phosphorylation.

    Récepteur de l'EGF

    Récepteur tyrosine kinase impliqué dans la signalisation de l'EGF, un facteur de croissance important pour la prolifération cellulaire.

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    Récepteur de l'insuline (INSR)

    Récepteur tyrosine kinase qui se trouve en dimère et est responsable de la signalisation de l'insuline, une hormone essentielle pour la régulation du glucose.

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    Dimérisation des RTK

    Étape clé dans l'activation des RTK. Les récepteurs se lient aux ligands et se dimérisent, ce qui active la transduction de signal.

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    Autophosphorylation des RTK

    Étape cruciale dans la cascade de signalisation des RTK où les domaines tyrosine kinase des récepteurs se phosphorylent mutuellement.

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    Protéines médiatrices (M1, M2...)

    Protéines qui se lient aux tyrosines phosphorylées des RTK et transmettent le signal en aval, menant à l'activation d'autres protéines et à la modulation de l'expression génique.

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    Voie MAPK

    La voie MAPK est une cascade de protéines kinases qui transmet des signaux de l'extérieur de la cellule vers l'intérieur, menant à des modifications de l'expression des gènes et de l'activité cellulaire.

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    Activation de la voie MAPK

    L'activation de la voie MAPK est déclenchée par la liaison de facteurs de croissance tels que l'EGF à leurs récepteurs membranaires.

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    Protéine RAS

    Une petite protéine, membre de la famille des protéines G. Elle agit comme un interrupteur moléculaire, transmettant le signal vers l'intérieur de la cellule.

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    Protéine RAF

    Une famille de protéines kinases qui joue un rôle clé dans la voie MAPK. Elle est activée par la protéine RAS.

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    ERK1/ERK2

    ERK1/ERK2 sont des kinases qui sont phosphorylées par MEK, activant la voie MAPK.

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    Protéines médiatrices (Grb2, SOS)

    Des protéines qui agissent comme des intermédiaires dans la voie MAPK. Elles aident à connecter les différentes kinases de la cascade.

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    Récepteurs aux cytokines

    Les récepteurs aux cytokines sont un type de récepteur sans activité kinase. Ils activent la voie JAK-STAT à travers des protéines kinases JAK.

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    Voie JAK-STAT

    La voie JAK-STAT est une cascade de signalisation impliquant les protéines kinases JAK et les facteurs de transcription STAT. Elle est activée par la liaison de cytokines à leurs récepteurs.

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    Que sont les facteurs STAT3 ?

    Les facteurs STAT3 sont des protéines qui se lient à l'ADN et régulent l'expression des gènes. Ils sont activés par la phosphorylation sur un résidu tyrosine.

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    Qu'est-ce que la translocation des facteurs STAT3 ?

    La translocation est le mouvement des facteurs STAT3 du cytoplasme vers le noyau de la cellule.

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    Comment les facteurs STAT3 sont-ils activés ?

    Les facteurs STAT3 sont activés par la phosphorylation par les kinases JAK.

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    Que se passe-t-il aux facteurs STAT3 après leur activation ?

    Les facteurs STAT3 se dimérisent, c'est-à-dire qu'ils forment des paires, après leur activation.

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    Quel est le rôle des facteurs STAT3 dans la cellule ?

    Les facteurs STAT3 régulent l'expression de gènes impliqués dans le cycle cellulaire.

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    Qu'est-ce que la désensibilisation ?

    La désensibilisation est le processus par lequel la sensibilité d'un récepteur à son ligand diminue avec le temps.

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    Qu'est-ce que l'internalisation ?

    L'internalisation est le processus par lequel un récepteur est transporté à l'intérieur de la cellule par endocytose.

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    Qu'est-ce que l'ubiquitine ?

    L'ubiquitine est une petite protéine qui marque les protéines pour leur dégradation dans les lysosomes.

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    Zone de seuil

    La partie de la courbe concentration-réponse où une faible augmentation de la concentration du ligand entraîne une faible réponse physiologique.

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    Phase exponentielle

    La partie de la courbe concentration-réponse où une augmentation de la concentration du ligand entraîne une augmentation rapide de la réponse physiologique.

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    Plateau de saturation

    La partie de la courbe concentration-réponse où une augmentation de la concentration du ligand n'entraîne plus d'augmentation significative de la réponse physiologique.

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    EC50

    La concentration du ligand qui produit 50% de la réponse maximale.

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    Sonde Fluo4

    Un chélateur de calcium qui est également fluorescent.

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    Comment rendre Fluo4 fluorescente?

    L'exciter à 488nm.

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    Microscope à fluorescence

    Un appareil utilisé pour observer et quantifier la fluorescence provenant des cellules.

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    Lecteur de plaque

    Un appareil utilisé pour mesurer la fluorescence provenant de plusieurs puits d'une plaque.

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    Cinétique de réponse

    La cinétique de réponse mesure la signalisation liée au calcium en fonction du temps.

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    Concentration réponse

    La concentration réponse est obtenue en prenant les valeurs maximales de la cinétique de réponse et en les reliant en fonction de la concentration du ligand.

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    Western Blot

    Technique qui permet de visualiser les protéines phosphorylées (actives) dans un échantillon. Les protéines sont séparées en fonction de leur poids moléculaire et détectées à l'aide d'anticorps.

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    Co-immunoprécipitation

    Méthode utilisée pour identifier les protéines qui interagissent avec une protéine d'intérêt. Les protéines sont précipitées à partir d'un lysat cellulaire et analysées par Western Blot.

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    Inhibiteur

    Inhibiteur qui bloque l'activité d'une enzyme et réduit la réponse physiologique, indiquant que cette enzyme était nécessaire à la réponse.

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    PKA

    Une famille de protéines qui jouent un rôle important dans la phosphorylation des protéines. H89 bloque l'activité de cette famille de protéines.

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    Dimérisation

    Activité qui se produit lorsque deux molécules interagissent pour créer une molécule complexe.

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    Autophosphorylation

    La phosphorylation d'une protéine par elle-même. Cette autophosphorylation active la protéine et la rend fonctionnelle.

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    Study Notes

    Récepteur avec activité kinase (Voie des MAP Kinases)

    • Les récepteurs tyrosine kinase (RTK) possèdent 14 sous-familles, avec un domaine extracellulaire N-terminal et un domaine intracellulaire C-terminal contenant une tyrosine kinase.
    • Le domaine tyrosine kinase permet la phosphorylation des tyrosines.
    • Différents types de récepteurs RTK existent, comme le récepteur de l'EGF (Facteur de Croissance Épidermique) et le récepteur INSR (Insuline).
    • Les récepteurs INSR sont des dimères stables, liés par des ponts disulfures.
    • L'activation des RTK est initiée par la liaison d'un ligand, entraînant la dimérisation du récepteur.
    • La dimérisation déclenche la trans-phosphorylation des domaines tyrosine kinase, activant l'activité kinase du récepteur.
    • L'autophosphorylation de tyrosines spécifiques sur le récepteur active des domaines SH2.
    • Ces domaines recrutement les protéines médiatrices.
    • Ces voies sont impliquées dans la multiplication et la différenciation cellulaire, la régulation de l'expression des gènes.
    • Généralement, ces voies ont une action à plus long terme que les récepteurs couplés aux protéines G.

    Activation des récepteurs RTK

    • La liaison des ligands aux récepteurs provoque leur dimérisation, activant leurs activités tyrosine kinase.
    • Les domaines catalytiques sont phosphorylés par les récepteurs voisins afin d'activer l'activité kinase, puis le récepteur s'auto-phosphoryle
    • Autophosphorylation sur des tyrosines à l'extrémité C du récepteur.
    • L'activation des voies de signalisation aboutit à la phosphorylation des protéines kinases.

    Activation des voies de signalisation

    • Des protéines médiatrices s'attachent aux tyrosines phosphorylées.
    • Des cascades de phosphorylation se mettent en place, activant successivement des protéines kinases.
    • Les cascades aboutissent à l'activation de facteurs de transcription.
    • Ces voies sont impliquées dans les mécanismes de croissance et de multiplication cellulaires et la régulation de l'expression des gènes

    Récepteur de l'EGF

    • Les récepteurs de l'EGF sont impliquées dans les voies des MAP Kinases.
    • Ces kinases interviennent dans la régulation des processus de croissance cellulaire et de multiplication cellulaire, différenciation.
    • La voie des MAP Kinases comprend des cascades de kinases kinases, incluant les MAP-3K, MAP-2K et MAPK
    • Cela aboutit à l'activation des facteurs de transcription, régulant l'expression des gènes.

    Récepteurs aux cytokines

    • Cette famille de récepteurs n'a pas d'activité kinase intrinsèque.
    • Les récepteurs se dimérisent suite à la liaison au ligand.
    • La phosphorylation se fait par des kinases associées au récepteur (JAK), par trans-phosphorylation.
    • Ces phosphorylations activent des facteurs de transcription, comme STAT3, qui régulent l'expression des gènes.

    Techniques d'études (ex. mesures de la production de 2nd messager)

    • Utilisation de la microscopie et de la fluorescence pour observer les cellules vivantes.
    • Mesure de la production de composés secondaires (ex: AMPc et IP3).
    • Courbe concentration-réponse pour déterminer l'effet maximum (Emax), la concentration efficace à 50% (EC50) et l'affinité d'une molécule.

    Partenaires protéiques phosphorylées (Western Blot)

    • Technique pour identifier les protéines phosphorylées dans un extrait cellulaire.
    • Utilisation d'anticorps dirigés vers la protéine d'intérêt et anticorps secondaires pour visualiser la protéine.
    • La technique permet de déterminer si la protéine est phosphorylée ou non en comparant le motif de phosphorylation des protéines traitées à l'absence de traitement.

    Inhibition des voies de signalisation

    • Les mécanismes d'inhibition peuvent impliquer des inhibiteurs spécifiques qui empêchent la phosphorylation de protéines clés dans le processus
    • Utilisation d'inhibiteurs pour étudier le rôle des différentes protéines dans le processus de signalisation.
    • L'inhibition de voies de signalisation permet d'étudier l'impact sur les fonctions cellulaires, notamment la division cellulaire

    Interactions protéines-protéines

    • Démonstration des interactions entre des partenaires protéiques pour déterminer leurs rôles fonctionnels.
    • Utilisation de la co-immunoprécipitation pour prédire les interactions protéines-protéines.

    Pharmacologie

    • Les ligands endogènes comme l'insuline interagissent avec les récepteurs.
    • Les molécules agonistes interagissent avec le même site que les ligands endogènes pour activer la voie de signalisation afin de stimuler une réponse cellulaire.
    • Les antagonistes sont des molécules qui se fixent sur le même site qu'un ligand endogène, mais qui n'activent pas la voie, pouvant l'inhiber.

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    Description

    Ce quiz explore les récepteurs tyrosine kinase (RTK) et leur rôle crucial dans les voies de signalisation cellulaire. Découvrez les différents types de RTK, leur mécanisme d'activation par dimérisation, ainsi que leur impact sur la multiplication et la différenciation cellulaire. Testez vos connaissances sur ces concepts fondamentaux en biologie cellulaire.

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