Processament de teixits i deshidratació
48 Questions
1 Views

Choose a study mode

Play Quiz
Study Flashcards
Spaced Repetition
Chat to Lesson

Podcast

Play an AI-generated podcast conversation about this lesson

Questions and Answers

Quins dels següents colorants són considerats naturals d'origen vegetal?

  • Beta-Carotè (correct)
  • Carmí
  • Safrà (correct)
  • Hematoxilina

Quina és la característica dels colorants metacromàtics?

  • Tenen una càrrega positiva
  • El color del teixit és diferent al de la solució colorant (correct)
  • Emeten llum visible quan són il·luminats amb UV
  • Tenyeixen el teixit del mateix color que la solució

Quins tipus de colorants no tenen càrrega i es dissolen en lípids?

  • Anfòters (correct)
  • Àcids
  • Neutres
  • Bàsics

Quina classificació pertanyen els colorants que s'uneixen directament al teixit?

<p>Directes (A)</p> Signup and view all the answers

Quina és la funció dels mordents en la coloració de teixits?

<p>Facilitar la unió del colorant amb el teixit (B)</p> Signup and view all the answers

Quin tipus de colorants es considera que s'uneixen a substàncies àcides com el DNA?

<p>Bàsics (C)</p> Signup and view all the answers

Quins colorants són considerats ortocromàtics?

<p>Colorants que tenyixen el teixit del mateix color que la solució (D)</p> Signup and view all the answers

Quin colorant és un exemple de colorant fluorescent?

<p>Rodamina (B)</p> Signup and view all the answers

Quina és la característica principal del col·lagen?

<p>És una família de proteïnes estretament relacionades. (D)</p> Signup and view all the answers

Quin factor afecta la penetració dels colorants en els teixits?

<p>La mida de la molècula de colorant. (D)</p> Signup and view all the answers

Com influeix la temperatura en el procés de tinció dels teixits?

<p>Intensifica la tinció. (B)</p> Signup and view all the answers

Quin és el mordent utilitzat en les hematoxilines fèrriques?

<p>Sals de ferro (A)</p> Signup and view all the answers

Quina és la millor dilució per a l'anticòs primari?

<p>La més alta que ofereixi un bon senyal específic (B)</p> Signup and view all the answers

Què fan l'àcid fosfomolíbdic (PMA) i/o fosfotúngstic (PTA) en la tinció?

<p>Actuen com a mordents negatius. (B)</p> Signup and view all the answers

Quin dels següents no és un mètode de desenmascarament antigènic?

<p>Incubació amb BSA (B)</p> Signup and view all the answers

Quin colorant s'utilitza per a la detecció de lípids?

<p>Vermell Sudan (A)</p> Signup and view all the answers

Quin tampó s'utilitza per al desenmascarament antigènic amb calor a pH 6?

<p>Tampó citrat (C)</p> Signup and view all the answers

Quina és la característica del glucogen en relació amb la tinció de PAS?

<p>És diastasa sensible (C)</p> Signup and view all the answers

Quina és la primera etapa en la metodologia de tinció per impregnació argèntica?

<p>Oxidació prèvia dels teixits. (B)</p> Signup and view all the answers

Quines substàncies es poden utilitzar per bloquejar les uniones inespecífiques?

<p>Serum i gelatina (B)</p> Signup and view all the answers

Quins materials es poden analitzar mitjançant impregnació argèntica?

<p>Membranes basals i cèl·lules de la neuroglia. (B)</p> Signup and view all the answers

Quin és el procés que s'utilitza per detectar mucopolisacàrids àcids en la tinció de Blau Alcià?

<p>Unió electrostàtica (D)</p> Signup and view all the answers

Quina és la resultat de l'actuació d'una sal de plata en la tinció?

<p>Reducció a plata metàl·lica, que precipita. (C)</p> Signup and view all the answers

Quina reacció es produeix en la tècnica de Hale?

<p>Ferrocianur fèrric (A)</p> Signup and view all the answers

Quina temperatura és recomanada per incubar l'anticòs primari per minimitzar unions inespecífiques?

<p>4ºC (A)</p> Signup and view all the answers

Quin component es pot utilitzar per al bloqueig de la peroxidasa?

<p>H2O2 (D)</p> Signup and view all the answers

Quin colorant és utilitzat per detectar glúcids a través d'una reacció química?

<p>Reactiu de Schiff (D)</p> Signup and view all the answers

Quina és la característica del pH en les solucions de colorants utilitzades?

<p>Es caracteritza per ser àcid. (A)</p> Signup and view all the answers

Quina estructura del teixit conjuntiu és àmpliament tenyida en les tincions tricròmiques?

<p>Col·lagen (C)</p> Signup and view all the answers

Quina és la millor pràctica per a la incubicació d'anticossos primaris?

<p>Incubar tota la nit a 4ºC (B)</p> Signup and view all the answers

Quin dels següents no és un detergents utilitzat en el procés de permeabilització?

<p>Etanol (A)</p> Signup and view all the answers

Quin és el primer pas en la tinció histoquímica per a glúcids?

<p>Oxidació amb àcid periòdic (A)</p> Signup and view all the answers

Quina és la funció principal del mordent en el procés de tinció?

<p>Permetre l'unió dels colorants als teixits. (B)</p> Signup and view all the answers

Quins són els components principals de la mescla fixadora Bouin?

<p>Àcid pícric, formaldehid i àcid acètic. (C)</p> Signup and view all the answers

Quina característica tenen les tincions citoplasmàtiques?

<p>Tenyeixen tant el citoplasma com l'espai intercel·lular. (D)</p> Signup and view all the answers

Quina és la diferència entre tincions progressives i regressives?

<p>Les progressives són independents del temps d'exposició. (B)</p> Signup and view all the answers

Quins colorants són considerats els més utilitzats en tincions citoplasmàtiques?

<p>Eosina i fucsina àcida. (C)</p> Signup and view all the answers

Què es necessita per a l'hematoxilina per unir-se als teixits?

<p>Mordents amb càrrega positiva. (D)</p> Signup and view all the answers

Quina és la funcionalitat de l’hematoxilina de Harris i Mayer?

<p>Tenyeixen els nuclis de color blau-morat fosc. (B)</p> Signup and view all the answers

Què caracteritza l'hematoxilina fèrrica de Heidenhain?

<p>Requereix un bany de mordent previ. (A)</p> Signup and view all the answers

Quin avantatge té el marcatge indirecte dels anticossos?

<p>Menys unions inespecífiques (C)</p> Signup and view all the answers

Quina és una característica dels anticossos secundaris?

<p>Ressen les cadenes constants dels anticossos primaris (D)</p> Signup and view all the answers

Quin mètode és considerat més senzill en la tècnica immunològica?

<p>Mètodes directes (A)</p> Signup and view all the answers

Quin d’aquests elements no és un bon fixador per IHQ?

<p>Un fixador que interfiqui en la reacció antigen-anticòs (D)</p> Signup and view all the answers

Quin pas inicial s'ha de realitzar en un protocol d'IHQ?

<p>Fixació i inclusió (A)</p> Signup and view all the answers

Quin dels següents factors NO influència en la preservació de l'Ag?

<p>Tipus de fluorocrom utilitzat (A)</p> Signup and view all the answers

Quina tècnica es fa servir per marcar els anticossos amb metalls electrodensos?

<p>Microscòpia electrònica (C)</p> Signup and view all the answers

Quin és un inconvenient dels mètodes indirectes en comparació amb els mètodes directs?

<p>Més unions inespecífiques (D)</p> Signup and view all the answers

Flashcards

Tinció indirecta en dos temps

Un procés de tinció en dos passos on primer s'aplica un mordent i després un colorant.

Mordent

Un compost químic que s'aplica a un teixit abans d'un colorant per augmentar l'afinnitat del colorant pel teixit.

Solució fixadora amb efecte mordent

Un tipus de fixador que té propietats mordents, augmentant l'afinitat dels colorants pel teixit.

Tinció nuclear

Un tipus de tinció que s'utilitza per destacar els nuclis cel·lulars.

Signup and view all the flashcards

Hematoxilina

Hematoxilina, un colorant que s'utilitza per tenyir els nuclis cel·lulars. Necessita un mordent per poder unir-se al teixit. El mordent proporciona càrrega positiva a l'hematoxilina.

Signup and view all the flashcards

El col·lagen: una família de proteïnes

El col·lagen no és una proteïna única, sinó una família de proteïnes estretament relacionades, amb més de 20 tipus diferents.

Signup and view all the flashcards

Resistència i sensibilitat del col·lagen

Les fibres de col·lagen són fortes i resistents a la tracció, però alhora també són sensibles.

Signup and view all the flashcards

Variabilitat de les fibres de col·lagen

Les fibres de col·lagen tenen diferents diàmetres i s'organitzen de maneres diferents en funció del teixit.

Signup and view all the flashcards

Permeabilitat i tinció

La permeabilitat del teixit i la mida de les molècules de colorant determinen la eficàcia de la tinció.

Signup and view all the flashcards

Temperatura i pH en la tinció

La temperatura i el pH de les solucions de tinció influeixen en la intensitat de la tinció.

Signup and view all the flashcards

Mordents negatius: PMA i PTA

Els àcids fosfomolíbdic (PMA) i fosfotúngstic (PTA) s'utilitzen per destenyir el col·lagen que s'ha pogut tenyir amb un colorant de molècula petita.

Signup and view all the flashcards

Colorants naturals

Colorants que s'obtenen de fonts naturals, com ara animals (carmí) o vegetals (beta-carotè).

Signup and view all the flashcards

Colorants sintètics

Colorants que se sintetitzen en laboratori a partir de materials químics.

Signup and view all the flashcards

Colorants àcids

Sals on l'anió és el que aporta el color i la base és incolora. S'uneixen a substàncies bàsiques del teixit.

Signup and view all the flashcards

Colorants bàsics

Sals on la base és la que aporta el color i l'anió és incolor. S'uneixen a ADN i components de la matriu extracel·lular.

Signup and view all the flashcards

Colorants anfòters

Colorants que no tenen càrrega i s'uneixen als teixits per dissoldre's en els seus lípids.

Signup and view all the flashcards

Colorants ortocromàtics

Colorants que tenyeixen el teixit del mateix color que la solució.

Signup and view all the flashcards

Colorants metacromàtics

Colorants que tenyeixen el teixit amb un color diferent al de la solució, degut a la interacció amb components cel·lulars.

Signup and view all the flashcards

Colorants fluorescents

Colorants que emeten llum visible en ser il·luminats amb llum ultraviolada. S'utilitzen en immunidetecció.

Signup and view all the flashcards

Hematoxilina fèrrica

Un mordiente que s'utilitza per a tenyir els nuclis en tincions tricròmiques. Conté sals de ferro com el clorur fèrric o l'alum fèrric.

Signup and view all the flashcards

Colorants anfòters: Vermell sudan, Sudan black, Oil red

Són colorants que, en ser anfòters, no tenen càrrega. S'uneixen als lípids presents en els teixits per disolució.

Signup and view all the flashcards

Tinció histoquímica per a glúcids

Una tinció que implica una reacció química on intervenen molècules del propi teixit. S'utilitza per a detectar glúcids.

Signup and view all the flashcards

Tinció de PAS (Periodic Acid Shiff)

Una tècnica que s'utilitza per a identificar glúcids en teixits. Implica l'oxidació amb àcid periòdic i una reacció amb el reactiu de Schiff.

Signup and view all the flashcards

Glucogen - Diastasa sensible

Un compost que és positiu en la tinció de PAS, però que deixa de ser-ho després de ser digerit amb amilasa o diastasa.

Signup and view all the flashcards

Blau de Perls (Tècnica de Hale)

Una tinció que s'utilitza per a identificar mucopolisacàrids àcids, que reaccionen amb solucions de ferro col·loidal.

Signup and view all the flashcards

Tinció de Blau Alcià

Una tinció que tenyeix mucoplisacàrids àcids per unió electrostàtica. No implica una reacció química.

Signup and view all the flashcards

Tincions tricròmiques

Una tinció que s'utilitza per a tenyir el teixit connectiu, incloent el col·lagen. Utilitza tres colorants per a destacar els nuclis, citoplasmes i les estructures de sosteniment.

Signup and view all the flashcards

Desparafinació

Procés que consisteix a eliminar la cera o parafina del teixit per permetre la penetració dels anticossos.

Signup and view all the flashcards

Permeabilització

Procés que permet que els anticossos penetrin al teixit trencant la membrana cel·lular.

Signup and view all the flashcards

Bloqueig d'unions inespecífiques

Procés que impedeix que els anticossos s'uneixin a llocs no específics del teixit.

Signup and view all the flashcards

Desenmascarament antigènic

Procés que s' utilitza per trencar les unions entrecreuades causades pel formol.

Signup and view all the flashcards

Anticòs primari

L'anticòs que s'uneix al teixit específic que s'està investigant.

Signup and view all the flashcards

Anticòs secundari

L'anticòs que s'uneix a l'anticòs primari i pot portar una marca visible.

Signup and view all the flashcards

Concentració de l'anticòs primari

Com més diluïda està la solució d'anticòs primari, menys probabilitat de donar unions inespecífiques.

Signup and view all the flashcards

Temps d'incubació

Temps d'exposició del teixit a l'anticòs primari.

Signup and view all the flashcards

Marcatge indirecte

Tècnica de tinció en què l’anticòs primari no està marcat. Un segon anticòs marcat, que reconeix l’anticòs primari, s’utilitza per visualitzar la unió Ag-Ac.

Signup and view all the flashcards

Immunohistoquímica (IHQ)

Conjunt de passos necessaris per visualitzar la unió antigen-anticòs en teixits, com ara l’obtenció de la mostra, la fixació, la tinció, la visualització i el muntatge de la preparació.

Signup and view all the flashcards

Preservació de l’antigen

La capacitat d’un fixador de preservar la integritat de l’antigen per tal de mantenir la capacitat de reacció antigen-anticòs durant el procés d’IHQ.

Signup and view all the flashcards

Fixació que forma ponts d’unió encreuats

Fixació que provoca l’aparició de ponts d’unió encreuats entre les proteïnes tissulars. Aquests ponts poden dificultar la reacció entre l’antigen i l’anticòs. Per superar aquest obstacle, cal un procés conegut com a desemmascarament antigènic.

Signup and view all the flashcards

Bloqueig d’enzims endògens

Un compost que reacciona amb un enzim endogen present en el teixit per bloquejar-lo. Això garanteix que la reacció de color no sigui causada per l’activitat de l’enzim endogen.

Signup and view all the flashcards

Study Notes

Processament de teixits

  • El processament de teixits és un procés complex que inclou diversos passos per preparar mostres de teixit per a la visualització i l'anàlisi microscòpica.
  • Els passos principals inclouen la fixació, el processament histològic, la inclusió, el tall, la tinció i el muntatge.
  • Molts passos són crítics, afectant la qualitat de la mostra i els resultats dels estudis.

Desparafinització i hidratació dels talls

  • La parafina és un material hidròfob, mentre que les solucions aquoses (com l'etanol) sí que són hidròfiles.
  • La secció de teixit es desparafinitza i s'hidrata en diversos banys d'etanol per preparar-la per a la coloració.
  • L'alcohol s'utilitza en graus creixents de concentració.
  • El grau final d'etanol és el 100%.

Generalitats de la deshidratació

  • La graduació dels alcohols ha de ser progressiva i creixent.
  • La relació mostra/volum ha de ser 1:20 (o inferior si es fa més agitació).
  • El temps d'incubació depèn de la mida de la mostra.
  • Es recomana realitzar diversos banys amb la mateixa concentració d'alcohol per evitar que a l'incorporar aigua de la mostra disminueixi la concentració d'alcohol.

Generalitats de la rehidratació

  • La graduació dels alcohols ha de ser decrescent (inversa a la deshidratació).
  • La relació mostra i volum ha de ser 1:20.
  • El temps d'incubació depèn de la mida de la mostra i s'ha de tenir en compte l'anterior incubació.
  • L'ús de banys múltiples amb la mateixa concentració d'alcohol és important per evitar qualsevol afectació a la concentració durant el procés rehidratació.

Protocols

  • Els protocols inclouen les instruccions pas a pas per a realitzar les tècniques de processament.
  • Els passos importants inclouen desparafinització, hidratació, tinció, i muntatge de la mostra.
  • El material de muntatge ha de ser hidròfob.

Talls de criostat

  • S'utilitza un criostat per obtenir talls de teixit en OCT (fresc) hidratats.
  • Pot ser seguit immediatament d'una coloració.
  • L'objectiu és evitar la deshidratació i la destrucció del material.

Fonaments generals de la coloració

  • El colorant s'uneix a la mostra per afinitat electroquímica.
  • Els components dels colorants inclouen esquelets incolors, cromòfors i auxocroms.

Tipus de colorants

  • Es classifiquen pels seus orígens (naturals o sintètics), per la natura química dels cromòfors i l'estructura dels auxocroms.
  • Per la seva funció de coloració (ortocromàtics, metacromàtics, i fluorescents).

Tincions nuclears i citoplasmàtiques

  • Hematoxilina
  • Carmí
  • Safranina
  • Fucsina bàsica
  • Eosina: És un colorant citoplasmàtic molt utilitzat en conjunció amb hematoxilina.
  • Els colorants i la seva combinació, escollits determinen el contrast i visualització dels components.
  • L'objectiu és tenir un contrast entre el nucli i el citoplasma

Tincions Histoquímiques

  • Són tècniques que utilitzen reaccions químiques per detectar substàncies específiques en els teixits, com lípids, glúcids i enzims.
  • S'utilitza per a analitzar els components del teixit en si.
  • Aquestes tincions poden identificar patologies i ajudar a l'anàlisi de processos cel·lulars.

Tincions per a detectar proteïnes

  • Són tècniques que requereixen un anticos (que es crea contra la proteïna d'interès) i un sistema de visualització (per exemple, enzims, fluorocroms o metalls electrodensos).

Tincions per a detectar glúcids

  • Les tincions per a glúcids detecten hidroxialdehids i polihidroxicetones.
  • Els glúcids poden ser monosacàrids, oligosacàrids o polisacàrids.
  • Alguns dels procediments més habituals són la tinció de PAS (Periodic Acid Schiff) i la tinció d'àcid perloric (o PAS-D).

Tincions per a detectar enzims

  • Els enzims són proteïnes que actuen com a catalitzadors de les reaccions químiques en els organismes.
  • Les tècniques d'enzimohistoquímica permeten observar la seva activitat en els teixits.
  • El mètode consisteix en detectar quantitat d'enzims mitjançant reaccions químiques que generen un producte acolorit.

Immunohistochemistry (IHQ)

  • IHQ: Detecta proteïnes específiques en talls de teixit utilitzant anticossos específics.
  • S'utilitzen anticossos i un sistema de visualització.
  • La unió antigen-anticòs ha de ser específica per minimitzar fals positius.

Immunofluorescence (IF)

  • IF: Pot ser directe o indirecte, utilitzant fluorocroms per marcar anticossos.
  • Més eficient per a la detecció d'un gran nombre d'antigens que tenen localització subcel·lular.
  • Pot ser més difícil realitzar IF si el teixit té autofluorescència.

Tincions tèxtils

  • Les tincions amb colorants es poden utilitzar per detectar les proteïnes presents en els teixits.
  • L'ús de colorants pot permetre millorar la visualització.
  • L'elecció depèn de l'objectiu de l'observació.

Visualització

  • Per a visualitzar els resultats de les tincions existeixen diversos aparells i tècniques.
  • La visualització permet una comprensió exhaustiva de la mostra.

Studying That Suits You

Use AI to generate personalized quizzes and flashcards to suit your learning preferences.

Quiz Team

Related Documents

Resum del Processament de Teixits RA4-RA5 PDF

Description

Explora els passos essencials en el processament de teixits per a la visualització microscòpica. Aprendràs sobre la desparafinització, hidratació i la importància de la graduació d'alcohols en el procés de deshidratació. Coneix els mètodes que afecten la qualitat de les mostres i els seus resultats.

More Like This

Tissue Processing in Histopathology
5 questions

Tissue Processing in Histopathology

SpeedyBauhaus avatar
SpeedyBauhaus
Tissue Processing Quiz
5 questions

Tissue Processing Quiz

SweetheartHarpsichord avatar
SweetheartHarpsichord
Tissue Processing Techniques
36 questions

Tissue Processing Techniques

TruthfulMusicalSaw avatar
TruthfulMusicalSaw
Histology Tissue Processing Quiz
20 questions

Histology Tissue Processing Quiz

TruthfulMusicalSaw avatar
TruthfulMusicalSaw
Use Quizgecko on...
Browser
Open
Browser
Browser