PANC-1 Cell Line: Total Protein Extraction

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¿Cuál es el origen del tejido del que se obtuvo la línea celular PANC-1?

De un carcinoma de células del estómago

De un adenocarcinoma de células del páncreas (correct)

De un linfoma de células T

De un melanoma de células del piel

¿Cuántos cromosomas tienen las células PANC-1?

70 cromosomas

63 cromosomas (correct)

46 cromosomas

50 cromosomas

¿Cuál es el medio de cultivo utilizado para cultivar las células PANC-1?

Ham’s F-12

L-15 de Leibovitz

RPMI 1640

Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM) (correct)

¿Cuál es el tiempo de ciclo celular aproximado de las células PANC-1?

52 horas Signup and view all the answers

¿Cuál es el nombre del suero utilizado para suplementar el medio de cultivo de las células PANC-1?

Suero bovino fetal (FBS) Signup and view all the answers

¿Cuál es el tipo de cáncer que se relaciona con la línea celular PANC-1?

Adenocarcinoma de células del conducto pancreático Signup and view all the answers

¿Cuál es el propósito del buffer de fosfato de Dulbecco 1X en el proceso de lavado de células?

Para remover residuos del medio de cultivo Signup and view all the answers

¿Cuál es la temperatura a la que se debe centrifugar la suspensión celular?

4°C Signup and view all the answers

¿Cuál es la temperatura y atmósfera necesarias para incubar las células?

37°C y atmósfera húmeda con un 5% de CO2 Signup and view all the answers

¿Cuál es el propósito del Dithiothreitol (DTT) en este protocolo?

Actúa como estabilizador de proteínas Signup and view all the answers

¿Cuántos mL de células PANC-1 se transfieren a un tubo de centrífuga de 15 mL?

4.5 mL Signup and view all the answers

¿Cuál es la concentración final del DTT en la solución preparada?

0.1M Signup and view all the answers

¿Qué es lo que se debe mantener en hielo durante el procedimiento?

Todos los reactivos, incluyendo el buffer de extracción de citoplasma, Dithiothreitol, Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline e Inhibidores de proteasas Signup and view all the answers

¿Cuál es el propósito del Nonidet P-40 en este protocolo?

Actúa como detergente para lisar células Signup and view all the answers

¿Cuál es el paso inicial en la preparación de la solución BEC 1X/DTT 0.1M/Inhibidores de Proteasas?

Añadir 980 µL de BEC 1X Signup and view all the answers

¿Qué es lo que se debe realizar antes de iniciar el procedimiento?

Encender la centrífuga y ajustar la temperatura a 4°C Signup and view all the answers

¿Qué se debe hacer con la pipeta serológica después de usarla?

Enjuagarla con cloro al 10% y descartarla en el envase asignado Signup and view all the answers

¿Cuál es el propósito de la Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline (PBS) en este protocolo?

Actúa como solución tampón para mantener el pH estable Signup and view all the answers

¿Cuál es el propósito principal de la centrifugación en el paso 1?

Eliminar el DPBS del sobrenadante Signup and view all the answers

¿Cuál es el tiempo de incubación recomendado para las células en hielo según el paso 4?

15 minutos Signup and view all the answers

¿Qué es la proporción recomendada de NP-40 al 10% para cada 100 µL de volumen de extracción?

6 µL Signup and view all the answers

¿Cuál es la velocidad de centrifugación recomendada para las células en el paso 8?

8900 rpm Signup and view all the answers

¿Dónde se debe almacenar finalmente las muestras de proteínas totales?

A -80°C Signup and view all the answers

¿Qué es el objetivo principal de la adición de la solución de Nonidet P-40 (NP-40)?

Romper la membrana celular Signup and view all the answers