Questions and Answers
Las células PANC-1 son no adherentes
False
El ciclo celular de las células PANC-1 es aproximadamente de 24 horas
False
Las células PANC-1 se cultivan en un medio de cultivo llamado RPMI
False
Las células PANC-1 se obtuvieron de un hombre de 40 años caucásico
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El adenocarcinoma de células del conducto pancreático es un tipo de cáncer que siempre presenta síntomas en sus etapas iniciales
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Las células PANC-1 se cultivan en un medio de cultivo suplementado con un 5% de suero bovino fetal
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Las células PANC-1 se incuban a una temperatura de 40oC.
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El buffer de extracción de citoplasma se utiliza en una concentración de 1X.
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Los inhibidores de proteasas se almacenan a temperatura ambiente.
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Los microtubos estériles se utilizan para almacenar los reactivos químicos.
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El Dithiothreitol (DTT) se utiliza en una concentración de 5M.
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El procedimiento de extracción de células PANC-1 requiere un ambiente seco y caliente.
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Se deben agregar 1000 µL de BEC (10X) al microtubo para preparar la dilución del DTT.
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El paso 8 del protocolo de extracción de proteínas totales implica centrifugar a 12,000 rpm durante 30 segundos a 4°C.
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El DPBS sobrenadante debe ser añadido a las células PANC-1 antes de la extracción de proteínas totales.
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Las alícuotas de inhibidores de proteasas deben ser mantenidas a temperatura ambiente.
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Se debe agregar 3 µL de DTT a 27 µL de dH2O fría para preparar la dilución del DTT.
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La solución hipotónica BEC 1X/DTT 0.1M/Inhibidores de proteasas se utiliza para centrifugar las células.
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La proporción de Nonidet P-40 al 10% y el volumen de extracción es de 3 µL de NP-40 por cada 100 µL de volumen de extracción.
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El buffer Dulbecco’s Phosphate Buffer Saline 1X (DPBS) se utiliza para agregar nutrientes a las células PANC-1.
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La muestra se debe incubar a 37°C durante 30 minutos antes de la extracción de proteínas totales.
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Se debe centrifugar cada tubo con la suspensión celular a 500 rpm durante 5 minutos.
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Se debe agregar 20 µL de la solución de inhibidores de proteasas a 980 µL de BEC 1X para preparar la solución BEC 1X/DTT 0.1M/Inhibidores de Proteasas.
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Las proteínas totales se almacenan a -20°C después de la extracción.
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