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Questions and Answers
Was ist die Funktion von Lysozym im Zusammenhang mit der bakteriellen Zellwand?
Was ist die Funktion von Lysozym im Zusammenhang mit der bakteriellen Zellwand?
- Lysozym synthetisiert neue Murein-Moleküle in der Zellwand.
- Lysozym spaltet die β-1,4-glykosidischen Bindungen zwischen N-Acetylglucosamin und N-Acetylmuraminsäure. (correct)
- Lysozym ist ein Bestandteil der bakteriellen Zellwand und sorgt für deren Stabilität.
- Lysozym baut die Peptidbrücken zwischen den Murein-Ketten ab.
Welche Temperatur zeigt die höchste Wachstumsrate für E. coli an?
Welche Temperatur zeigt die höchste Wachstumsrate für E. coli an?
- 37°C (correct)
- 28°C
- 32°C
- 44°C
Was geschieht bei Temperaturen über 40°C für E. coli?
Was geschieht bei Temperaturen über 40°C für E. coli?
- Die Enzymreaktionen laufen optimal.
- Es tritt Hitzestress auf. (correct)
- Die Zellmembran wird stabiler.
- Das Wachstum wird stark beschleunigt.
Welcher Faktor hat bei einer Temperatur < 37°C einen Einfluss auf die Wachstumsrate von E. coli?
Welcher Faktor hat bei einer Temperatur < 37°C einen Einfluss auf die Wachstumsrate von E. coli?
Was ist die Verdopplungszeit von E. coli bei 28°C?
Was ist die Verdopplungszeit von E. coli bei 28°C?
Wie verhält sich die Wachstumsrate von E. coli bei 37°C im Vergleich zu 32°C?
Wie verhält sich die Wachstumsrate von E. coli bei 37°C im Vergleich zu 32°C?
Welche Funktion hat Lysozym in Bezug auf die Zellwand?
Welche Funktion hat Lysozym in Bezug auf die Zellwand?
Was sind Protoplasten?
Was sind Protoplasten?
Warum sind Protoplasten osmotisch empfindlich?
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In welchen Medien sind Protoplasten stabil?
In welchen Medien sind Protoplasten stabil?
Was geschieht, wenn die Zellwand einer Zelle enzymatisch aufgelöst wird?
Was geschieht, wenn die Zellwand einer Zelle enzymatisch aufgelöst wird?
Wofür werden pflanzliche Protoplasten häufig verwendet?
Wofür werden pflanzliche Protoplasten häufig verwendet?
Was passiert mit Bakterienzellen, die noch Zellwandreste haben?
Was passiert mit Bakterienzellen, die noch Zellwandreste haben?
Welche Rolle spielt die Ca2+ Bindung in der Membranstruktur?
Welche Rolle spielt die Ca2+ Bindung in der Membranstruktur?
Was bedeutet der Begriff 'steril' in einem wissenschaftlichen Kontext?
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Welche Säuren entstehen durch die Fermentation von Pyruvat nach 2-5 Tagen?
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Welche Eigenschaften sind charakteristisch für Gram-positive Bakterien?
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Was ist ein wesentlicher technischer Parameter bei Sterilisationstechniken?
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Welche pH-Werte sind mit den positiven und negativen Ergebnissen der Methylrot-Reaktion verbunden?
Welche pH-Werte sind mit den positiven und negativen Ergebnissen der Methylrot-Reaktion verbunden?
Welches Färbetechniken wird in der Mikroskopie verwendet, um den Kontrast zu erhöhen?
Welches Färbetechniken wird in der Mikroskopie verwendet, um den Kontrast zu erhöhen?
Was ist das Hauptprodukt der Butandiolgärung?
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Welches der folgenden Antibiotikumgruppen wirkt auf zellulären Zielstrukturen?
Welches der folgenden Antibiotikumgruppen wirkt auf zellulären Zielstrukturen?
Welches Bakterium zeigt ein positives Ergebnis in der Voges-Proskauer-Reaktion?
Welches Bakterium zeigt ein positives Ergebnis in der Voges-Proskauer-Reaktion?
Wie unterscheiden sich Gram-negative Bakterien von Gram-positiven?
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Welches der folgenden Produkte ist nicht ein neutrales Endprodukt der Fermentation?
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Welches Enzym ist erforderlich für die Verwertung von Citrat in Bakterien?
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Welche Technik wird verwendet, um Mikroorganismen zu isolieren?
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Was sind Phasenkontrastmikroskope besonders geeignet für?
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Was passiert mit Acetoin in der Voges-Proskauer-Reaktion?
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Was zeigt ein negatives Ergebnis in der Methylrot-Reaktion an?
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Wie hoch ist die Enzymkonzentration in der reinen Eiklarlösung laut dem Text?
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Welche Einheit wird im Text für die Enzymaktivität verwendet?
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Was ist die Aktivität von 1 mg Lysozym?
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Was bedeutet der Wert "∆OD600/min" im Kontext des Textes?
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Welchen Einfluss hat der Verdünnungsfaktor auf die gemessene Enzymaktivität?
Welchen Einfluss hat der Verdünnungsfaktor auf die gemessene Enzymaktivität?
Welche der folgenden Aussagen über die Beziehung zwischen Konzentration und Aktivität des Lysozyms ist korrekt?
Welche der folgenden Aussagen über die Beziehung zwischen Konzentration und Aktivität des Lysozyms ist korrekt?
Wie wird die Lysozymkonzentration in einer unbekannten Probe bestimmt, basierend auf dem Text?
Wie wird die Lysozymkonzentration in einer unbekannten Probe bestimmt, basierend auf dem Text?
Flashcards
Was ist Lysozym?
Was ist Lysozym?
Lysozym ist ein Enzym, das die Zellwand von Bakterien angreift und sie auflöst. Es spaltet die β-1,4-glykosidische Bindung zwischen N-Acetylmuraminsäure (NAM) und N-Acetylglucosamin (NAG) im Murein-Netzwerk.
Was ist Murein?
Was ist Murein?
Das Murein, auch Peptidoglycan genannt, ist ein komplexes Netzwerk aus Zucker und Aminosäuren, welches die Form und Struktur bakterieller Zellwände verleiht. Es ist aufgebaut aus Ketten von abwechselnden N-Acetylglucosamin (G) und N-Acetylmuraminsäure (M) -Molekülen, die durch Peptidbrücken miteinander verbunden sind.
Was sind Protoplasten?
Was sind Protoplasten?
Protoplasten entstehen, wenn die Zellwand von Bakterien durch Enzyme wie Lysozym abgebaut wird. Der verbliebene Zellinhalt, einschließlich der Zellmembran und dem Cytoplasma, bildet den Protoplasten.
Wie wird bakterielles Wachstum gemessen?
Wie wird bakterielles Wachstum gemessen?
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Was ist eine Wachstumskurve?
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Lysozym: Wirkung
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Sphäroplasten
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Kultivierung von Protoplasten
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Protoplasten: Vektoren für Transformation?
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Lysozym: Wirkung auf Membran
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Protoplasten: Osmotischer Druck
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Protoplasten: Form?
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Wachstumsrate (µ)
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Verdopplungszeit (td)
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Optimale Wachstumstemperatur
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Thermophile Bakterien
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Chaperone
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Steigung der Messkurve
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Units (U)
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Eichkurve
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Lysozymaktivität
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Lysozymkonzentration
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Referenzwert
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∆OD600 /min
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Verdünnungsfaktor
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Methylrot-Reaktion (positiv)
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Methylrot-Reaktion (negativ)
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Voges-Proskauer-Reaktion (positiv)
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Voges-Proskauer-Reaktion (negativ)
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Citrat-Verwertung (positiv)
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Citrat-Verwertung (negativ)
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IMViC-Tests
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IMViC-Tests (Zweck)
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Was bedeutet Sterilisation?
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Was sind Antibiotika?
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Welche Sterilisationstechniken gibt es?
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Was sind Kulturmedien?
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Was sind Gram-positive Bakterien?
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Was sind Gram-negative Bakterien?
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Was ist Mikroskopie?
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Wie wirken Antibiotika?
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Study Notes
Allgemeine Mikrobiologie WS24/25 (Bios) - Seminar #6
- Das Seminar behandelt das Thema Lysozym.
- Es wird ein Testat (8 Minuten) abgehalten.
- Alle Teilnehmer müssen während des Testats vom Sitznachbar/in entfernt sein.
- Die Skripte müssen umgedreht werden.
Themen
- Wiederholung der bakteriellen Zellwand-Struktur
- Eigenschaften und Wirkung von Lysozym
- Exkurs: Bildung von Protoplasten
- Bakterielles und virales Lysozym
- Versuch 8: Wachstumskurven (bakterielles Wachstum)
- Auswertung von OD-Werten und Erstellung von Wachstumskurven
Aufbau der bakteriellen Zellwand
- Besteht aus Murein (Peptidoglycan)
- Heteropolymer, gebildet aus N-Acetylglucosamin (G) und N-Acetylmuraminsäure (M)
- Alternierend ẞ-1,4 glykosidisch verknüpft
- Ketten sind durch Peptidbrücken querverbunden (Netzwerk)
Was ist Lysozym?
- Sammelbegriff für eine Familie bakterizider Enzyme
- Benannt von Alexander Fleming (1922)
- Enzym aus Eiklar
- Muramidase
Eigenschaften von Lysozym
- Molekulargewicht ca. 14,4 kDa
- 129 Aminosäuren, 4 Disulfidbrücken (R-S-S-R)
- Hydrolysiert die ẞ-1,4-glykosidische Bindung zwischen N-Acetylmuraminsäure und N-Acetylglucosamin
- Charakteristische tiefe „Furche“ zum Binden des Mureins
- Minimale Länge des Substrates: 6 Zuckerreste
- Wichtige Aminosäuren im aktiven Zentrum: Glutamat35 und Aspartat52
Wirkungsweise von Lysozym
- Hydrolyse der glykosidischen Bindungen zwischen C1 von (M) und C4 von (G)
- Abbau zu Disacchariden (G-M)
- N-Acetylglucosamin (G) und N-Acetylmuraminsäure (M)
- Bei hoher Lysozym-Konzentration kommt es zu einer reduzierten Hydrolyse (Warum?)
Wirkung auf Gram-positive und Gram-negative Zellwände
- Einfluss von EDTA: komplexiert zweiwertige Metallionen, bindet Ca2+ Ionen der äußeren Membran → Destabilisierung
- Lysozym kann äußere Membran passieren → Abbau der Mureinschicht
Bildung von Protoplasten
- Zellwandabbau durch Lysozym
- "Auslaufen" der Zelle
- Herstellung von Protoplasten im Labor (Anwendung)
Was sind Protoplasten?
- Bezeichnung für den stoffwechselaktiven Zellkörper.
- Nach Auflösung der Zellwand
- Sphären in vitro kultivierbar (bei Gram-Bakterien schwer möglich)
- Beispiel: pflanzliche Protoplasten → Fremd-DNA-Eingliederung (Transformation)
- Bei Bakterien mit Zellwandresten: Sphäroplasten
- Osmotisch empfindlich
Natürliche Vorkommen von Lysozym
- Hühnereiweiß
- Milch
- Pflanzensäfte
- Diverse Pilze
- Nasensekret
- Speichel
- Schweiß
- Blutplasma
- Tränenflüssigkeit
- Eukaryontische Lysozyme (Teil der unspezifischen Immunabwehr)
- Mehrere Typen (c-, g-, i-Typ)
- Einige (z.B. pflanzliche) können Chitin abbauen
Bakterielle Lysozyme
- Peptidoglykan-Hydrolasen, Lytische Transglycosylasen, Autolysine u.a.
- Ubiquitär in Eubakterien (Ausnahme: Mykoplasmen)
- Verschiedene Familien mit unterschiedlichen Funktionen
- Exoaktivität
- Lokaler Abbau des Mureins, beteiligt am Zellwachstum und an der Zellteilung
- Beispiele: Streptomyces-Lysozym, lytische Transglykosylase "Slt35" von E. coli, N-Acetylglucosaminidasen von Enterococcus hirae und Listeria monocytogenes
Virales Lysozym
- V-Typ: verteilt bei Phagen, infizieren Gram-positive und Gram-negative Bakterien
- G-Typ: Sequenz ähnlich tierischer g-Typ Lysozyme (z.B. Vögeln)
- λ-Typ: benannt nach dem λ-Phagen, lytische Transglykosase
- Funktion der Lysozyme bei Bakteriophagen:
- Lokaler Abbau des Peptidoglycans ermöglicht Infektion
- Globaler Abbau der Zellwand zur Freisetzung von Phagenpartikeln (lytischer Zyklus)
Versuch 8: Wachstumskurven
- OD 600 = 0,04 eingestellt
- OD600 (to) bestimmt (Referenzwert LB-Medium)
- Schüttler synchron eingeschaltet und Zeitmessung gestartet
- Alle 20 min eine weitere Messung vorgenommen
- Messwerte in die Tabelle eintragen und mit anderen Gruppen vergleichen
- Graphische Bestimmung der Verdopplungszeiten (halblogarithmisches Papier)
- Berechnung der spezifischen Wachstumsraten (µ = ln(2) / td)
Versuch 8: Ablauf
- Jede Bankreihe hat einen eigenen Erlenmeyerkolben.
- Berechnung des Volumens, Animpfen und to-Messung gemeinsam
- Start des Experimentes gleichzeitig
- Gruppenweise t = 20 min Probenahme
Weitere Themen des Seminars (Versuch 8)
- Indirekte Bestimmung der Zellzahl-Zunahme (optische Dichte)
- Diskussion und Bedeutung der „Batch"-Kultur im Praktikum
Weitere Themen (nach Versuch 8)
- Natürliche Vorkommen von Lysozym
- Abschließende Zusammenfassung
Zusammenfassung
- Das Seminar behandelt den enzymatischen Prozess des Lysozyms.
- Es gibt verschiedene Abschnitte zum Aufbau von Zellwänden, Enzymen und deren Funktion.
- Wachstumskurven von Bakterien und ihre Berechnung.
- Vergleich von Gram-positiven und Gram-negativen Bakterien und deren Reaktionen auf Lysozym sowie Vergleich der Lysegeschwindigkeit.
- Details zu verschiedenen Tests und Verfahren (z.B. IMVIC, KOH, Oxidase, Katalase, Citrat usw.).
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Erforschen Sie die Funktionen von Lysozym in Bezug auf die bakterielle Zellwand sowie die Wachstumsbedingungen von E. coli. Dieses Quiz behandelt wichtige Temperaturgrenzen und Wachstumsraten von E. coli und hilft Ihnen, die mikrobiologischen Grundlagen besser zu verstehen.