Inmunología: Técnicas de Hemólisis y Separación

<p>Inhibir la acción del complemento y detener la reacción. (A)</p> Signup and view all the answers

<p>Una alta concentración de complemento activo en la muestra. (B)</p> Signup and view all the answers

<p>Separar los linfocitos basándose en su tamaño y densidad. (B)</p> Signup and view all the answers

<p>Añadir la sangre diluida cuidadosamente sobre el medio, no mezclar. (D)</p> Signup and view all the answers

<p>La fuerza g y el tipo de rotor. (C)</p> Signup and view all the answers

<p>Porque las membranas de las células vivas impiden el paso del colorante. (C)</p> Signup and view all the answers

<p>Inmunodeficiencias y enfermedades autoinmunes. (D)</p> Signup and view all the answers

<p>Separación celular inmunomagnética. (C)</p> Signup and view all the answers

<p>Pruebas funcionales y pruebas inmunoquímicas. (D)</p> Signup and view all the answers

<p>Su baja eficiencia en el rendimiento de linfocitos T. (C)</p> Signup and view all the answers

<p>Técnicas de inmunotoxicidad (A)</p> Signup and view all the answers

<p>Las fracciones C3 y C4 del complemento. (D)</p> Signup and view all the answers

<p>Panning para linfocitos. (C)</p> Signup and view all the answers

<p>Miden tanto los componentes funcionales como los inactivados y sus fragmentos. (D)</p> Signup and view all the answers

<p>La actividad de la vía clásica del complemento. (B)</p> Signup and view all the answers

<p>El volumen de suero que lisa el 50% de los eritrocitos. (A)</p> Signup and view all the answers

<p>Anticuerpos específicos contra antígenos de eritrocitos. (A)</p> Signup and view all the answers

<p>Un linfocito con al menos 3 eritrocitos adheridos. (D)</p> Signup and view all the answers

<p>Lavarlos con PBS y resuspenderlos con tampón para CH50. (B)</p> Signup and view all the answers

<p>Para teñir las células muertas y poder contarlas. (B)</p> Signup and view all the answers

<p>La capacidad de los linfocitos CD8+ para inducir la lisis de células diana que expresan un antígeno. (A)</p> Signup and view all the answers

<p>Cromo-51 (D)</p> Signup and view all the answers

<p>Microesferas de látex o microorganismos como Staphylococcus o Candida. (B)</p> Signup and view all the answers

<p>La incapacidad para distinguir partículas fagocitadas de moléculas adheridas a la superficie celular. (B)</p> Signup and view all the answers

<p>La generación de anión superóxido durante el estallido respiratorio. (C)</p> Signup and view all the answers

<p>Una baja o nula precipitación de formazán en los fagocitos. (C)</p> Signup and view all the answers

<p>La eliminación de microorganismos por la acción de los fagocitos. (D)</p> Signup and view all the answers

<p>Evaluar la capacidad de locomoción direccional de los neutrófilos ante estímulos. (A)</p> Signup and view all the answers

<p>Cámara de Boyden. (C)</p> Signup and view all the answers

<p>En la parte superior, en medio sin suero. (B)</p> Signup and view all the answers

<p>Células (neutrófilos) retenidas y teñidas. (A)</p> Signup and view all the answers

<p>Producción de interferón por células infectadas. (C)</p> Signup and view all the answers

<p>Vía clásica. (C)</p> Signup and view all the answers

<p>Vía alternativa. (B)</p> Signup and view all the answers

<p>La proliferación de linfoblastos y síntesis de ADN. (D)</p> Signup and view all the answers

<p>Separar los linfocitos por centrifugación. (B)</p> Signup and view all the answers

<p>Separar los linfocitos de otros componentes celulares. (C)</p> Signup and view all the answers

<p>72 horas. (B)</p> Signup and view all the answers

<p>La intensida de la señal de fluorescencia. (C)</p> Signup and view all the answers

<p>Cuantificar la cantidad de citoquinas específicas presentes en la muestra. (A)</p> Signup and view all the answers

<p>La concentración de la citoquina de interés. (D)</p> Signup and view all the answers

<p>Tapizar con 1Ac, añadir muestra, incubar con 2Ac, añadir conjugado, sustrato. (D)</p> Signup and view all the answers

Los linfocitos T sensibilizados frente a un antígeno se transforman en linfoblastos que se dividen activamente en presencia del antígeno o un mitógeno. Es un método para estudiar la funcionalidad de los linfocitos T.

La proliferación de linfoblastos implica la síntesis de ADN.

Separar los linfocitos por centrifugación para estudiar su proliferación.

Se añaden antígenos o mitógenos a los linfocitos para estimular su proliferación.

Se utiliza un marcador para medir la intensidad de la fluorescencia y estudiar la actividad mitógena.

Se utilizan anticuerpos para detectar citoquinas en los sobrenadantes de cultivos.

Un anticuerpo monoclonal que se une a la citoquina que se va a determinar.

Un anticuerpo monoclonal marcado con biotina que se une a la citoquina.

Prueba que mide la actividad del complemento en el suero, utilizando la capacidad del complemento para lisar eritrocitos sensibilizados.

Diluir la muestra de suero fresco a 1/20 para determinar su actividad hemolítica.

Utilizar una serie de tubos con cantidades graduales de agua destilada para determinar la lisis del 100% de los eritrocitos. La última dosis de agua debería causar la lisis total.

Técnica que determina la actividad del complemento utilizando eritrocitos sensibilizados en agarosa. El complemento difunde radialmente desde el pocillo, creando un halo de lisis.

Concentración del complemento en la muestra que provoca la lisis del 50% de los eritrocitos.

La cuantificación de los componentes C3 y C4 (proteínas que activan los fagocitos) se realiza mediante diferentes técnicas, como la inmunodifusión radial y la inmunonefelometría.

La unidad CH50 se define como la cantidad de suero que lisa el 50% de los eritrocitos en una muestra.

El procedimiento de la técnica CH50 incluye la preparación de eritrocitos de carnero y su sensibilización con anticuerpos.

En el procedimiento de la técnica CH50, los eritrocitos de carnero necesitan ser lavados, resuspendidos y luego lisados para obtener una lectura de absorbancia.

Los eritrocitos se sensibilizan con anticuerpos en una mezcla con una hemolisina (un antisuero frente a antígenos de eritrocitos de carnero).

Se mezcla los eritrocitos sensibilizados con el suero problema y se evalúa la lisis de los eritrocitos para determinar la actividad del complemento.

Las alteraciones del complemento se pueden evaluar mediante pruebas funcionales y pruebas inmunoquímicas.

Se utiliza para identificar fagocitos con deficiencias en la producción de radicales libres, como el superóxido. Estos fagocitos son incapaces de reducir el NBT (nitroblue tetrazolium) después de ser estimulados con lipopolisacáridos bacterianos u otros agentes.

Evalúa la capacidad de los fagocitos para ingerir y destruir microorganismos. Los fagocitos se incuban con una cantidad conocida de bacterias o levaduras. Después de la incubación, se cuenta la viabilidad residual de los microorganismos.

Mide la capacidad de los neutrófilos de moverse en dirección a un estímulo químico.

Es un dispositivo que se utiliza para evaluar la quimiotaxis de los neutrófilos. Dos cámaras separadas por un filtro se utilizan para observar el movimiento direccional de los neutrófilos hacia un agente quimiotáctico.

La activación del sistema del complemento puede iniciarse por varias vías, cada una con un iniciador específico.

Esta vía de activación del sistema del complemento se inicia por la unión de anticuerpos (IgM e IgG) a la superficie de los patógenos.

Esta vía de activación del sistema del complemento se inicia por la unión de moléculas presentes en la superficie de los patógenos.

Esta vía de activación del sistema del complemento se inicia por la unión de residuos de manosa, un tipo de azúcar, presentes en la superficie bacteriana.

TÉCNICA PARA SEPARAR LINFOCITOS Y OTRAS CÉLULAS SANGUÍNEAS QUE SE BASA EN LA DENSIDAD DE LAS CÉLULAS. LAS CÉLULAS MÁS DENSAS (COMO LOS ERITROCITOS) SE DEPOSITAN EN EL FONDO DEL TUBO, MIENTRAS QUE LAS MENOS DENSAS (COMO LOS LINFOCITOS) QUEDAN EN LA PARTE SUPERIOR.

EL PROCEDIMIENTO DE SEPARACIÓN CELULAR UTILIZA GRADIENTE DE FICOLL PARA AISLAMIENTO DE LINFOCITOS. SE SEPARAN EN 3 FASES. LA SUPERIOR (SE DESECHA), LA INTERMEDIA (CONTIENE LOS LINFOCITOS Y SE RECUPERA) Y LA INFERIOR (SE DESECHA).

MÉTODO QUE SE BASA EN LA UTILIZACIÓN DE ANTICUERPOS QUE SE ADHIEREN ESPECÍFICAMENTE A LOS LINFOCITOS. SE UTILIZAN PARTÍCULAS MAGNÉTICAS RECUBIERTAS CON ANTICUERPOS QUE SE ADHIEREN A LOS LINFOCITOS DESEADOS.

SE BASA EN LA UTILIZACIÓN DE ANTICUERPOS Y PROTEÍNAS DEL COMPLEMENTO PARA LISAR LAS CÉLULAS QUE NO SON DE INTERÉS.

MÉTODO QUE SE BASA EN LA ADHESIÓN DE LOS LINFOCITOS B A UN MATERIAL ESPECÍFICO.

SE BASA EN LA UTILIZACIÓN DE UN FLUJO DE FLUIDO PARA SELECCIONAR Y SEPARAR LAS CÉLULAS DE INTERÉS.

TÉCNICA DE SEPARACIÓN QUE SE BASA EN LA ADHESIÓN DE LAS CÉLULAS A UN MATERIAL DE LANAS.

Método para evaluar la capacidad de los linfocitos T para reaccionar con células diana que expresan el antígeno. Se basa en la unión de linfocitos T a células diana (glóbulos rojos modificados) que expresan el antígeno. El número de linfocitos T unidos a las células diana se cuenta como 'rosetas'.

EL MÉTODO DE SEPARACIÓN DE LINFOCITOS POR FILTRACIÓN CON COLUMNAS DE LANAS TIENE UN RENDIMIENTO BAJO.

Método para evaluar la capacidad de los linfocitos T para reconocer y lisar células diana que expresan un antígeno específico. Las células diana se marcan con un isótopo radiactivo (Cr), y al lisarse la célula diana, se libera el Cr al medio, lo que se mide con un contador gamma.

Método utilizado para evaluar la capacidad fagocítica de los fagocitos. Se basa en la capacidad de los fagocitos para fagocitar partículas inertes (microesferas de látex) o microorganismos (bacterias o levaduras). Las células teñidas se examinan para determinar la cantidad de partículas fagocitadas.

Método para analizar la capacidad de los fagocitos para realizar un estallido respiratorio. Se busca evaluar la producción de anión superóxido, que se genera tras la activación del fagocito y es fundamental para la eliminación de microorganismos.

Los fagocitos (neutrófilos y macrófagos) engloban los patógenos y los destruyen. Este proceso requiere la activación del fagocito que conduce a la producción de sustancias tóxicas como los radicales libres para eliminar el agente invasor.

Los linfocitos T son células del sistema inmunitario que reconocen y destruyen células infectadas por patógenos o células tumorales. Este proceso implica la activación del linfocito T, que produce la liberación de sustancias tóxicas para destruir la célula diana.

Mecanismo clave que participa en la eliminación de agentes invasores dentro del sistema inmunitario. Se produce por la activación de células como los fagocitos o las células NK (natural killer) y genera la formación de especies reactivas de oxígeno (ROS) como el anión superóxido.