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Questions and Answers
Pourquoi retire-t-on le parafilm lors de la centrifugation des tubes ?
Quel est l'objectif de la réalisation d'une gamme étalon ?
Pourquoi fait-on plusieurs dilutions d'un même échantillon ?
Pourquoi l'équation de la droite lors du traçage des GE doit-elle être du style y=ax avec b = 0 ?
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Est-il possible de mesurer les Do des tubes de la courbe étalon séparément de celles des tubes des échantillons ?
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Quel est le rôle de la centrifugation dans la préparation des échantillons ?
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Pourquoi l'ajout du réactif dans les tubes n'est-il pas considéré comme un facteur de dilution lors du calcul des concentrations?
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Quelle est la couleur normale du plasma obtenu après centrifugation du sang?
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Quel est le rôle du lavage délicat des globules rouges par la solution de MgCl2?
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Pourquoi faut-il lyser les globules rouges dans l'eau?
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Quelle est la particularité de la solution de MgCl2 utilisée pour le lavage des globules rouges?
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Quel est le coefficient directeur utilisé pour trouver les concentrations de protéines et d'ions dans les échantillons?
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Study Notes
Tubes à hémolyses et centrifugation
- Les tubes à hémolyses sont bouchés avec du parafilm pour les mélanger par inversion, mais il faut le retirer lors de la centrifugation pour éviter de déséquilibrer la centrifugeuse.
- Il n'est pas nécessaire de boucher systématiquement les tubes lors d'une centrifugation car la centrifugeuse ramène le liquide vers le fond du tube, sauf si le tube est trop plein ou que c'est une centrifugeuse à angle libre, ultra-centrifugeuse ou qui nécessite un couvercle.
Gamme étalon
- La gamme étalon est réalisée pour déterminer la concentration de nos échantillons, en utilisant la loi de Beer-Lambert (A = εlC).
- La droite de la gamme étalon doit passer par zéro (b = 0) pour montrer la proportionnalité entre la densité optique (Do) et la concentration.
Dilutions
- Les dilutions sont réalisées pour rester dans la zone de linéarité et maintenir la proportionnalité entre la densité optique et la concentration.
- Les réactifs enzymatiques sont dépendants du temps, il est donc important de mesurer les échantillons et la gamme étalon dans les mêmes conditions.
Mesure des échantillons
- Il est possible de mesurer les échantillons séparément de la gamme étalon, mais il est important de maintenir les mêmes conditions d'incubation et de mesure pour tous les échantillons.
Ajout de réactif
- L'ajout de réactif n'est pas considéré comme un facteur de dilution car la même procédure est réalisée pour la gamme étalon et les échantillons.
Caractérisation de la composition ionique et protéique du plasma et des globules rouges (GR)
Centrifugation du sang
- Le plasma est normalement jaunâtre, mais peut être rougeâtre si hémolysé.
- Les éléments figurés comprennent les globules rouges, les globules blancs et les plaquettes.
Lavage des GR
- Le lavage délicat des GR par la solution de MgCl2 permet d'éliminer le plasma restant et les ions extracellulaires.
- La solution de MgCl2 ne contient pas de potassium (K+) ni de sodium (Na+), mais du glucose.
Lysation des GR
- La lysation des GR dans l'eau permet d'accéder au contenu intracellulaire.
- La lysation est nécessaire pour mesurer les ions et les protéines intracellulaires.
Résultats
- La gamme étalon est utilisée pour déterminer les concentrations des échantillons.
- Il est important de prendre en compte les facteurs de dilution lors de la mesure des concentrations.
- Les résultats doivent être présentés avec un titre, une légende d'axe, une échelle et une équation.
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Description
Découvrez pourquoi il est important de retirer le parafilm lors de la centrifugation des tubes à hémolyses et pourquoi il n'est pas nécessaire de boucher systématiquement les tubes.
