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Questions and Answers

Comparez l'électrode de référence et l'électrode indicatrice et donnez un exemple pour chacune d’elles.

Électrode de référence : potentiel constant, exemple : Électrode au calomel saturé. Électrode indicatrice : potentiel varie en fonction de la concentration, exemple : électrodes spécifiques comme H+.

De quel type de test ELISA s’agit-il?

ELISA sandwich (méthode directe)

Donnez le nom des éléments numérotés dans le schéma ELISA.

1 = Anticorps de capture 2 = Antigène FeLV 3 = Anticorps de révélation 4 = Enzyme

Expliquez brièvement en quoi consiste chaque étape du protocole ELISA.

<ol> <li>Mise en contact de l’Ag et de l’Ac. 2) Ajout de l’Ac de révélation. 3) Lavage pour éliminer l’excès d’Ac de révélation. 4) Ajout du substrat de l’enzyme pour formation d’un produit coloré.</li> </ol> Signup and view all the answers

Quelle est la valeur de l'absorbance de la solution initiale avec une transmittance de 3%?

<p>1.52</p> Signup and view all the answers

Quelles sont les valeurs de transmittance et d’absorbance pour la solution diluée après dilution 5 fois?

<p>Absorbance = 0.305, Transmittance = 49.5%</p> Signup and view all the answers

Citez les trois conditions de validité pour la loi de Beer-Lambert.

<p>Solution diluée, solution homogène, rayonnement monochromatique.</p> Signup and view all the answers

Quelle est la concentration en taurine ajoutée dans le ballon avec ajout?

<p>0.453 g/L</p> Signup and view all the answers

Quelle est la pente de la droite d’étalonnage?

<p>565,1 uas.(g/L)-1</p> Signup and view all the answers

Quelle est l’ordonnée à l’origine de la droite d’étalonnage?

<p>17 uas</p> Signup and view all the answers

Quelle est la masse de taurine extraite de l'échantillon de croquettes?

<p>7.52 x 10^-3 g</p> Signup and view all the answers

Quelle est la teneur en taurine des croquettes (exprimée en g/100g)?

<p>0.244 g/100 g</p> Signup and view all the answers

De quel type de chromatographie s’agit-il dans la 1ère expérience avec Séphadex G-200?

<p>Exclusion de taille (ou tamis moléculaire)</p> Signup and view all the answers

Quel sera l’ordre d’élution des trois protéines dans la 1ère expérience?

<ol> <li>Uréase ; 2) Sérumalbumine ; 3) Chymotrypsinogène</li> </ol> Signup and view all the answers

Quel type de chromatographie est utilisé dans la 2ème expérience avec DEAE-cellulose?

<p>Échangeuse d’ions (anions)</p> Signup and view all the answers

Quelle(s) protéine(s) sera(seront) retenue(s) par la résine à pH 7?

<p>Uréase et sérumalbumine</p> Signup and view all the answers

Comment éluer les protéines retenues par la résine?

<p>En diminuant le pH ou en ajoutant un sel.</p> Signup and view all the answers

Quelle masse de chlorure de potassium faut-il peser pour obtenir 500 mL de la solution mère?

<p>0.477 g</p> Signup and view all the answers

Quel est le rôle joué par le lithium dans les étalons?

<p>Standard interne</p> Signup and view all the answers

Pourquoi le lithium est-il ajouté aux étalons et à l'inconnue?

<p>Pour s’affranchir des erreurs commises.</p> Signup and view all the answers

Détaillez le calcul de X et de Y pour l’étalon n° 1.

<p>X = 0.1 ppm, Y = 1.28 x 10^-3</p> Signup and view all the answers

Déterminez la concentration en potassium dans le sérum sanguin.

<p>35.5 ppm</p> Signup and view all the answers

En chromatographie en phase gazeuse, quelles affirmations sont correctes? (Sélectionnez tout ce qui s'applique)

<p>Les conditions de travail optimum correspondent à un débit de gaz minimum.</p> Signup and view all the answers

En fluorimétrie, quelles affirmations sont correctes? (Sélectionnez tout ce qui s'applique)

<p>L’intensité de fluorescence est toujours proportionnelle à la concentration du fluorophore.</p> Signup and view all the answers

En chromatographie en phase inverse, quelles affirmations sont correctes? (Sélectionnez tout ce qui s'applique)

<p>Une granulométrie plus fine de la phase stationnaire permet une meilleure séparation.</p> Signup and view all the answers

En HPLC, quelles affirmations sont correctes? (Sélectionnez tout ce qui s'applique)

<p>Les colonnes capillaires nécessitent un injecteur de type « split/splitless ».</p> Signup and view all the answers

Un spectre de bandes peut-il être: ? (Sélectionnez tout ce qui s'applique)

<p>Être un spectre d’émission</p> Signup and view all the answers

En chromatographie, le temps de rétention dépend de: ? (Sélectionnez tout ce qui s'applique)

<p>La nature du soluté</p> Signup and view all the answers

Study Notes

Électrodes en Chimie Analytique

  • Électrode de référence : Potentiel constant et connu à température donnée.
  • Exemples : Électrode au calomel saturé (ESC), Électrode standard à H2 (ESH), Électrode Ag/AgCl saturé.
  • Électrode indicatrice : Potentiel variant en fonction de la concentration des espèces en solution.
  • Exemples : Électrodes métalliques, électrodes spécifiques (H+, F-, etc.).

Leucose Féline et Test ELISA

  • Leucose féline : Maladie causée par le virus FeLV, diagnostic confirmé par prise de sang.
  • Test ELISA : Utilisé pour dosage de l'antigène FeLV.
  • Type de test : ELISA sandwich (méthode directe).
  • Étapes du test :
    • Réaction spécifique Ag-Ac lors de la mise en contact.
    • Liens formés par anticorps de révélation.
    • Lavage pour éliminer les anticorps non liés.
    • Formation d'un produit coloré révélant la liaison Ac-Ag.

Spectrophotométrie et Loi de Beer-Lambert

  • Solution colorée avec transmittance de 3%, diluée par 5.
  • Valeur d’absorbance de la solution initiale : A = 1.52.
  • Valeurs pour la solution diluée : A = 0.305, T = 49.5%.
  • Conditions de validité : solution diluée, solution homogène, rayonnement monochromatique.

Détermination de Taurine

  • Extraction de taurine d’échantillon de croquettes (3,08 g) dans 100 mL.
  • Suivi de la transformation de taurine en composé coloré pour la spectrophotométrie.
  • Concentration de taurine ajoutée : 0.453 g/L.
  • Pente de la courbe d’étalonnage : 565,1 uas.(g/L)-1, ordonnée à l'origine : 17 uas.
  • Masse de taurine extraite : 7,52 × 10^-3 g.
  • Teneur en taurine : 0,244 g/100 g de croquettes.

Chromatographie des Protéines

  • Séparation de sérumalbumine, uréase, chymotrypsinogène par chromatographie.
  • Utilisation de résine Séphadex G-200 (exclusion de taille). Uréase sort en premier, suivie de sérumalbumine et chymotrypsinogène.
  • Résine DEAE-cellulose à pH 7 : échangeuse d’ions anionique.
  • Protéines chargées négativement (uréase, sérumalbumine) retenues par résine chargée positivement.

Dosage du Potassium par Spectroscopie

  • Préparation d’une solution mère à 500 ppm de KCl, dissolution : 0.477 g.
  • Lithium utilisé comme standard interne pour corriger les erreurs expérimentales.
  • Étalonnage du photomètre de flamme avec solutions de différents volumes.
  • Calcul de la concentration en potassium de 35,5 ppm dans le sérum sanguin.

Diversité des Méthodes Analytiques

  • Chromatographie en phase gazeuse : débuts de séparation des alcanes avec colonnes apolaires.
  • En fluorimétrie, l'intensité de fluorescence est proportionnelle à la concentration.
  • En chromatographie en phase inverse, composés polaires ont un temps de rétention plus long.
  • HPLC : techniques adaptées pour des volumes d’échantillons précis et méthodes de gradient.

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