Fissazione dei Campioni Biologici

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Questions and Answers

Quale delle seguenti affermazioni descrive correttamente il ruolo della fissazione nei campioni biologici?

La fissazione altera definitivamente la struttura delle cellule.

La fissazione impedisce autolisi e putrefazione. (correct)

La fissazione stimola la crescita cellulare.

La fissazione rende i campioni più leggeri e facili da trasportare.

Quale tecnica di preparazione è utilizzata per immobilizzare i costituenti cellulari in uno stato vicino a quello vitale?

Prelievo.

Colorazione.

Fissazione. (correct)

Sezionamento.

Quale delle seguenti affermazioni sulla fissazione chimica è corretta?

La fissazione chimica non può essere utilizzata per il sistema vascolare.

La fissazione chimica prevede l'uso di vapori di sostanze chimiche e immersione. (correct)

La fissazione chimica utilizza solo calore per preservare i campioni.

La fissazione chimica è meno efficace rispetto alla fissazione fisica.

Quale di queste opzioni non è una fase del processo di preparazione dei campioni?

Controllo della temperatura. Signup and view all the answers

Quale metodo di fissazione fisica utilizza il calore per immobilizzare i costituenti cellulari?

Fissazione per fiamma viva. Signup and view all the answers

Quale tra i seguenti fissativi è considerato il migliore per la conservazione a lungo termine dei tessuti?

Aldeidi Signup and view all the answers

Quale sostanza è comunemente utilizzata per disidratare i campioni prima dell'inclusione?

Etanolo Signup and view all the answers

Quale delle seguenti affermazioni riguardo alle resine epossidiche è falsa?

È altamente flessibile e adattabile Signup and view all the answers

Quale miscela fissativa è famosa per la sua capacità di non interferire con gli zuccheri durante la conservazione?

Liquido di Carnoy Signup and view all the answers

Quale metodo di fissazione consente la massima conservazione della struttura molecolare ma comporta una scarsa conservazione della morfologia?

Fissazione fisica con congelamento Signup and view all the answers

Qual è il valore minimo di distanza che l'occhio umano può percepire per vedere punti distinti?

0.2 mm Signup and view all the answers

Quale tipo di ibridazione viene utilizzato per l'analisi dell'mRNA senza bisogno di anticorpi commerciali?

Fluorescence in situ hybridization Signup and view all the answers

Qual è la dimensione media di una cellula?

10-30 µm Signup and view all the answers

Cosa viene utilizzato per colorare i nuclei durante l'analisi dell'integrità dell'mRNA?

DAPI Signup and view all the answers

Qual è la distanza massima necessaria per osservare un ovocita al microscopio ottico?

100-150 µm Signup and view all the answers

Quale elemento del microscopio fa convergere i raggi luminosi sul preparato?

Condensatore Signup and view all the answers

Cosa rappresenta il potere di risoluzione in un microscopio?

La distanza minima tra due punti per essere percepiti distinti Signup and view all the answers

Qual è lo scopo primario dell'ottica specifica durante l'osservazione dei campioni?

Migliorare il contrasto dell'immagine Signup and view all the answers

Quale tra le seguenti affermazioni descrive correttamente la colorazione con ematossilina?

Si lega agli acidi nucleici colorando il nucleo di viola Signup and view all the answers

Qual è lo scopo dell'immunoistochimica?

Evidenziare specifiche molecole utilizzando anticorpi Signup and view all the answers

Qual è lo spessore delle sezioni preparate con l'ultramicrotomo?

50-100 nm Signup and view all the answers

Che cosa indica la colorazione con eosina nelle cellule?

Colore il citoplasma di rosa Signup and view all the answers

Cosa si intende per ibridazione in situ?

Evidenziare mRNA o frammenti specifici di DNA Signup and view all the answers

Qual è la funzione principale della criotecnica nel campionamento dei tessuti?

Raffreddare e conservare i campioni per sezioni Signup and view all the answers

Qual è la principale differenza tra la colorazione istochemica e quella immunoistochimica?

La prima utilizza coloranti, la seconda anticorpi Signup and view all the answers

Quali componenti rappresentano la matrice della materia organica?

Cellule e fibre Signup and view all the answers

Quale metodo di microscopia sfrutta l'interferenza della luce per creare immagini tridimensionali ad alto contrasto?

Contrasto interferenziale Signup and view all the answers

Qual è la principale differenza tra un microscopio diritto e uno rovesciato?

Il microscopio diritto utilizza vetrini Signup and view all the answers

Nella microscopia elettronica a trasmissione (TEM), quale metodo viene utilizzato per ottenere risoluzioni dell'ordine di pochi Angstrom?

Utilizzo di sezioni ultrasottili Signup and view all the answers

Quale tecnica utilizza un fascio di elettroni come fonte di illuminazione senza sezionare i campioni?

Microscopio elettronico a scansione Signup and view all the answers

Qual è la caratteristica principale del contrasto di fase rispetto ad altre tecniche di microscopia?

Non richiede coloranti Signup and view all the answers

Quale metodo è impiegato per localizzare molecole o strutture specifiche nei campioni utilizzando luce fluorescente?

Epifluorescenza Signup and view all the answers

Cosa determina la risoluzione di un microscopio?

La lunghezza d'onda della luce usata Signup and view all the answers

Qual è il vantaggio principale dell'uso dell'olio con lo stesso indice di rifrazione del vetro in un microscopio?

Riduce la perdita di luce Signup and view all the answers

Study Notes

Istologia: Preparazione e Processazione Campioni

Lo scopo dell'istologia è la preparazione e processazione di campioni biologici per l'osservazione al microscopio.
I tipi di campioni includono sezioni di organi o colture cellulari.

Fasi dell'analisi morfologica

Tipo di preparati: Sezione di campioni o cellule in coltura.
Allestimento dei preparati:
- Prelievo: Raccolta del campione. Prelievo-fissazione nel più breve tempo possibile. Eventualmente conservare a freddo fino al momento della fissazione.
- Fissazione: Impedisce autolisi e putrefazione dei tessuti. Può essere fisica (calore, fiamma, essiccazione, congelamento) o chimica (alcol, aldeidi, ecc.).
- Sezionamento: Taglio del campione in sezioni sottili (5-10µm) per l'analisi.
- Colorazione: Sostanze come l'ematossilina e l'eosina colorano in modo selettivo le diverse componenti cellulari, rendendole visibili al microscopio ottico.
Esame dei preparati:
- Microscopia ottica: Osservazione al microscopio ottico, utilizzando diverse tecniche di contrasto (Campo chiaro, Fluorescenza, ecc).
- Microscopia elettronica: Osservazione al microscopio elettronico (Trasmissione e Scansione) per ottenere dettagli ancora più elevati.

Allestimento di preparati istologici

Preparazione del campione per l'osservazione al microscopio ottico.
Sezione sottile (5-10µm):
- Fissazione: Bloccare la struttura del campione.
- Disidratazione e diafanizzazione: Rimozione di acqua e sostituzione con un solvente.
- Inclusione: Indurimento del campione, usando resine o paraffina fusa.
- Taglio: Creazione della sezione sottile.
- Montaggio: Fissaggio della sezione su un vetrino.

Sostanze per l'inclusione

Paraffina: Scelta comune per microscopia ottica, compatibile con molte colorazioni.
Resine epossidiche e metacrilati: Più rigide, adatte alla microscopia elettronica.
OCT (Otto-carbohydrate): Con congelamento, ideale per conservazione di strutture molecolari, ma con minore conservazione della morfologia.

Microscopi

Microscopio ottico: Per lo studio dei preparati istologici colorati. Include vari metodi di contrasto e ingrandimento.
Microscopio elettronico a trasmissione (TEM): Per osservazioni ad alta risoluzione, sezioni sottilissime.
Microscopio elettronico a scansione (SEM): Visualizzazione tridimensionale della superficie dei campioni.
Altri microscopi: Inclusi microscopi stereo e rovesciati, per analisi di campioni di dimensioni variabili o in coltura.

Metodi di colorazione

Ematossilina ed eosina (H&E): Colorazione standard per la microscopia ottica.
Istochimici: Colorazioni che evidenziano componenti cellulari specifici, come enzimi, carboidrati, o molecole specifiche.
Immunoistochimica: Utilizza anticorpi per localizzare specifiche molecole cellulari o proteine. Viene utilizzata per rivelare specifiche proteine in un campione.
Ibridazione in situ: (ISH) Metodi per visualizzare acidi nucleici (mRNA o DNA) in un campione. Utilizza sonde complementari al DNA, al posto degli anticorpi, per rivelare l'espressione di una specifica sequenza di acidi nucleici in una sezione.
Colorazioni speciali: Metodi per evidenziere componenti specifici.

Analisi dei risultati

I risultati ottenuti con diverse metodologie vengono interpretati per comprendere al meglio la struttura e funzionamento del campione.
I risultati sono documentati in immagini, grafici e testi.

Valutazione dell'integrità mRNA

I nuclei sono visualizzati mediante coloranti come DAPI.

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Description

Questo quiz esplora le tecniche di fissazione nei campioni biologici, inclusi metodi fisici e chimici. Scoprirai il ruolo della fissazione nella preparazione dei tessuti e quali sostanze vengono comunemente utilizzate. Testa la tua conoscenza su questo argomento importante in biologia e anatomia.