Fermentatie, Metabolisme & Chromatografie Theorie 2de leerjaar

Study Notes

Er zijn verschillende hoofdstukken in het theoriegedeelte: Fermentatie Technieken, Biomoleculen, Metabolisme, Eiwitten in de praktijksituatie, en Eiwitzuiveringsmethoden.
In dit gedeelte wordt er gefocust op Fermentatie Technieken en Eiwitten in de praktijksituatie.

Concentratie bepalingen van eiwitten kunnen worden gedaan met behulp van UV-absorptie bij 280 nm, waarbij Tyrosine en Tryptofaan worden gemeten.
Een andere methode is de E260/E280 verhouding, die een maat voor zuiverheid is.
De extinctiecoëfficiënt (ε) zegt iets over de hoeveelheid Tyr en Trp in het eiwit.
Er moet ook rekening worden gehouden met de blanco, omdat bufferionen die binden aan glaswand kunnen bijdragen aan de E280 meting.
De conformatie van eiwitten verandert met de temperatuur, en bij te hoge temperaturen kan denaturatie optreden.

Enzymen zijn eiwitten en hebben dus dezelfde eigenschappen.
Enzymen zijn temperatuurgevoelig, pH-gevoelig, en hebben een specifieke activiteit.
De activiteit van een enzym kan eerst toenemen bij een stijgende temperatuur, maar uiteindelijk afnemen door denaturatie.
De pH-gevoeligheid van enzymen is belangrijk, omdat de optimale pH-waarde verschillend is voor verschillende enzymen.
Enzymen hebben ook een specifieke activiteit, die afhankelijk is van de hoeveelheid substraatmoleculen dat bindt aan de actieve plaats.

De zuiverheid van eiwitoplossingen kan worden bepaald met behulp van activiteit van enzymen, verhouding enzymactiviteit en totale eiwitconcentratie, en molmassa.
Er zijn verschillende methoden om eiwitoplossingen te bereiden, zoals het gebruik van buffers en zouten.

Het doel van eiwitzuiveren is het isoleren van de gewenste component en het verwijderen van ongewenste componenten.
Er zijn verschillende methoden voor eiwitzuiveren, zoals chromatografie, affiniteitschromatografie, en ionwisselingschromatografie.
Chromatografie is een techniek waarbij gebruik wordt gemaakt van het verschil in voorkeur van moleculen voor de mobiele fase of de stationaire fase.
Affiniteitschromatografie is een speciale vorm van chromatografie, waarbij gebruik wordt gemaakt van specifieke binding tussen een molecuul en een ligand.
Er zijn verschillende typen kolomchromatografie, zoals verdelingschromatografie, adsorptiechromatografie, ionwisselingschromatografie, en gelpermeatiechromatografie.