Podcast
Questions and Answers
¿Cuáles son las condiciones que debe reunir un buen tampón de separación en electroforesis capilar?
¿Cuáles son las condiciones que debe reunir un buen tampón de separación en electroforesis capilar?
Un buen tampón debe tener alta capacidad de tamponamiento al pH de separación, pequeñas variaciones de pH con la temperatura, ser transparente a la radiación UV-Vis, baja conducción eléctrica y no influir negativamente en la separación.
¿Qué se logra mediante el acondicionamiento del capilar por presión?
¿Qué se logra mediante el acondicionamiento del capilar por presión?
El acondicionamiento por presión elimina compuestos adsorbidos y genera una superficie fresca debido a la desprotonación de grupos SOH.
¿Qué características debe tener una fuente de alto voltaje en electroforesis capilar?
¿Qué características debe tener una fuente de alto voltaje en electroforesis capilar?
Debe ser de corriente continua, trabajar en modo de intensidad constante y voltaje constante, aplicar voltajes entre 1 y 30 kV y permitir cambiar la polaridad de los electrodos.
¿Por qué es importante el almacenamiento adecuado del capilar en electroforesis capilar?
¿Por qué es importante el almacenamiento adecuado del capilar en electroforesis capilar?
Signup and view all the answers
Menciona dos modos de inyección de la muestra en electroforesis capilar.
Menciona dos modos de inyección de la muestra en electroforesis capilar.
Signup and view all the answers
¿Qué fórmula se utiliza para calcular la eficiencia (N) en electroforesis capilar?
¿Qué fórmula se utiliza para calcular la eficiencia (N) en electroforesis capilar?
Signup and view all the answers
Define la selectividad en el contexto de la electroforesis capilar.
Define la selectividad en el contexto de la electroforesis capilar.
Signup and view all the answers
¿Cuál es la relación matemática que define la resolución (Rs) en electroforesis capilar?
¿Cuál es la relación matemática que define la resolución (Rs) en electroforesis capilar?
Signup and view all the answers
¿Qué ocurre con los grupos silanoles en un pH igual o mayor a 3?
¿Qué ocurre con los grupos silanoles en un pH igual o mayor a 3?
Signup and view all the answers
¿Qué provoca el flujo electroosmótico en un sistema líquido en contacto con una superficie cargada?
¿Qué provoca el flujo electroosmótico en un sistema líquido en contacto con una superficie cargada?
Signup and view all the answers
¿Qué es la 'doble capa' en el contexto de la electroforesis capilar?
¿Qué es la 'doble capa' en el contexto de la electroforesis capilar?
Signup and view all the answers
¿Qué factores pueden controlar la cantidad de cargas en la pared del capilar durante la electroforesis?
¿Qué factores pueden controlar la cantidad de cargas en la pared del capilar durante la electroforesis?
Signup and view all the answers
¿Cómo se expresa la selectividad (α1,2) en electroforesis capilar?
¿Cómo se expresa la selectividad (α1,2) en electroforesis capilar?
Signup and view all the answers
¿Qué es la movilidad electroforética y cómo se relaciona con la carga del analito?
¿Qué es la movilidad electroforética y cómo se relaciona con la carga del analito?
Signup and view all the answers
Explica brevemente el concepto de potencial Zeta (𝛏) en el contexto de la electroforesis capilar.
Explica brevemente el concepto de potencial Zeta (𝛏) en el contexto de la electroforesis capilar.
Signup and view all the answers
¿Cuáles son los dos factores principales que provocan el desplazamiento de solutos iónicos en un capilar?
¿Cuáles son los dos factores principales que provocan el desplazamiento de solutos iónicos en un capilar?
Signup and view all the answers
Define la viscosidad del medio (𝛈) y su importancia en la electroforesis capilar.
Define la viscosidad del medio (𝛈) y su importancia en la electroforesis capilar.
Signup and view all the answers
¿Qué representa la movilidad total o aparente (𝜇a o 𝜇t) en el análisis electroforético?
¿Qué representa la movilidad total o aparente (𝜇a o 𝜇t) en el análisis electroforético?
Signup and view all the answers
¿Cómo afecta el radio del analito (r) a su movilidad electroforética?
¿Cómo afecta el radio del analito (r) a su movilidad electroforética?
Signup and view all the answers
Describe brevemente cómo se controla el flujo electroosmótico en la electroforesis capilar.
Describe brevemente cómo se controla el flujo electroosmótico en la electroforesis capilar.
Signup and view all the answers
¿Qué diferencia hay en la movilidad de cationes y aniones en un campo eléctrico dentro de un capilar?
¿Qué diferencia hay en la movilidad de cationes y aniones en un campo eléctrico dentro de un capilar?
Signup and view all the answers
¿Cómo afecta el campo eléctrico a la velocidad de migración de los iones en electroforesis capilar?
¿Cómo afecta el campo eléctrico a la velocidad de migración de los iones en electroforesis capilar?
Signup and view all the answers
¿Qué efecto tiene el pH del tampón en la separación electroforética de compuestos?
¿Qué efecto tiene el pH del tampón en la separación electroforética de compuestos?
Signup and view all the answers
Nombra un modo electroforético utilizado en la electroforesis capilar y su característica principal.
Nombra un modo electroforético utilizado en la electroforesis capilar y su característica principal.
Signup and view all the answers
¿Cómo influye la fuerza iónica del tampón en la velocidad de migración de iones?
¿Cómo influye la fuerza iónica del tampón en la velocidad de migración de iones?
Signup and view all the answers
¿Qué impacto tiene la adición de disolventes orgánicos sobre la velocidad de migración en electroforesis capilar?
¿Qué impacto tiene la adición de disolventes orgánicos sobre la velocidad de migración en electroforesis capilar?
Signup and view all the answers
¿Cuál es una aplicación analítica de la electroforesis capilar en la industria farmacéutica?
¿Cuál es una aplicación analítica de la electroforesis capilar en la industria farmacéutica?
Signup and view all the answers
Menciona un tipo de análisis que se realiza mediante electroforesis capilar.
Menciona un tipo de análisis que se realiza mediante electroforesis capilar.
Signup and view all the answers
Describe brevemente el papel de los recubrimientos en la pared interna del capilar en electroforesis capilar.
Describe brevemente el papel de los recubrimientos en la pared interna del capilar en electroforesis capilar.
Signup and view all the answers
¿Qué papel juegan las micelas en la separación de solutos durante la electroforesis capilar?
¿Qué papel juegan las micelas en la separación de solutos durante la electroforesis capilar?
Signup and view all the answers
Describe la clasificación de los surfactantes en el contexto de la electroforesis capilar.
Describe la clasificación de los surfactantes en el contexto de la electroforesis capilar.
Signup and view all the answers
¿Cómo se separan los analitos cargados en la electroforesis capilar?
¿Cómo se separan los analitos cargados en la electroforesis capilar?
Signup and view all the answers
¿Cuál es la diferencia en la elución entre compuestos hidrofílicos y compuestos hidrofóbicos?
¿Cuál es la diferencia en la elución entre compuestos hidrofílicos y compuestos hidrofóbicos?
Signup and view all the answers
¿Qué mecanismo combinatorio se emplea en la separación en la cromatografía de la electroforesis capilar?
¿Qué mecanismo combinatorio se emplea en la separación en la cromatografía de la electroforesis capilar?
Signup and view all the answers
¿Cómo se basa la separación en la electroforesis capilar en gel?
¿Cómo se basa la separación en la electroforesis capilar en gel?
Signup and view all the answers
¿Qué rol tienen los tensoactivos en la cromatografía micelar electrocinética?
¿Qué rol tienen los tensoactivos en la cromatografía micelar electrocinética?
Signup and view all the answers
¿Qué se emplea en electroforesis capilar en gel para la separación?
¿Qué se emplea en electroforesis capilar en gel para la separación?
Signup and view all the answers
¿Cuál es la diferencia principal entre el tampón frontal y el tampón terminal en un isotacoferograma?
¿Cuál es la diferencia principal entre el tampón frontal y el tampón terminal en un isotacoferograma?
Signup and view all the answers
¿Por qué se realiza la electroforesis capilar en ausencia de FEO?
¿Por qué se realiza la electroforesis capilar en ausencia de FEO?
Signup and view all the answers
¿Qué tipo de moléculas se separan principalmente mediante electroforesis capilar en gel?
¿Qué tipo de moléculas se separan principalmente mediante electroforesis capilar en gel?
Signup and view all the answers
¿Qué sucede en un isotacoferograma a medida que avanza el tiempo?
¿Qué sucede en un isotacoferograma a medida que avanza el tiempo?
Signup and view all the answers
¿Qué implica la separación electroforética en función de la conductividad de los tampones?
¿Qué implica la separación electroforética en función de la conductividad de los tampones?
Signup and view all the answers
Study Notes
Análisis Químico II - Bloque III - Tema 16: Electroforesis Capilar
-
Introducción (16.1): Electroforesis capilar (CE) es una técnica separativa que ocurre dentro de un capilar, basada en la migración diferencial de partículas cargadas en una solución bajo un campo eléctrico.
-
Importancia Industrial y de Investigación: La electroforesis capilar es crucial en industrias y en investigación para la separación y análisis de diversos tipos de componentes, tales como iones, vitaminas, ácidos nucleicos, proteínas, y células.
-
Características de la CE (16.1):
- La separación se lleva a cabo en un capilar de sílice fundida.
- Requiere campos eléctricos elevados durante la separación.
- Ofrece tiempos de análisis rápidos y menor consumo de reactivos que métodos tradicionales.
- La técnica es simple y fácil de automatizar.
- Permite realizar determinaciones simultáneas de varios compuestos (cationes, aniones y neutros).
- La detección de los componentes puede realizarse durante la separación.
Instrumentación (16.2)
-
Capilar de Sílice Fundida:
-
Debe ser inerte químicamente y eléctricamente.
-
Transparente a la radiación UV-Vis.
-
Robusto y flexible (generalmente recubierto de poliimida).
-
Económico.
-
Capilares ideales tienen un diámetro interno de (20-200 µm), longitud efectiva y total de (15-100 cm).
-
Características del capilar: Acondicionamiento por presión para remover compuestos adsorbidos y generar una superficie fresca. Termostatización (por aire o líquido refrigerante) para regular la temperatura.
-
-
Componentes del Sistema: Incluye: Capilar, tampón de separación, fuente de alto voltaje, sistema de inyección de la muestra, sistemas de detección y registro de la señal.
-
Fuente de Alto Voltaje:
- Debe estar conectada a dos electrodos de platino.
- Capaz de operar en modo de intensidad constante y voltaje constante.
- Capacidad de trabajar con voltajes entre 1 y 30 kV.
- Capacidad de cambiar la polaridad de los electrodos.
- Capaz de aplicar potencial en forma de rampa programada.
-
Sistema de inyección de la muestra:
- Inyección hidrodinámica: Se inyectan volúmenes pequeños (10-100 nL) usando presión hidrodinámica.
- Inyección electrocinética: Utiliza fuerza electroestática para introducir la muestra en el capilar.
-
Sistemas de detección:
- Absorción UV-Vis (universal, DAD espectro).
- Fluorescencia.
- Fluorescencia inducida por láser.
- Amperométricos.
- Conductimétricos.
- Espectrometría de masas.
- Otros (radiométricos, índice de refracción, etc.).
Fundamento Teórico de la Electroforesis Capilar (16.3)
-
Ionización de grupos silanoles: Los grupos silanol en la pared del capilar son fácilmente ionizables cerca del pH 4; esto genera una carga negativa en la pared del capilar influenciada por el pH del tampón.
-
Flujo electroosmótico (EOF): Fenómeno que se produce al aplicar un campo eléctrico a un líquido en contacto con una superficie cargada. La superficie del capilar es cargada negativamente y EOF mueve el analito y el electrolito.
-
Movilidad total o aparente (µ o μa): Considera la movilidad electroforética y el flujo electroosmótico para la muestra
Aplicaciones Analíticas (16.4)
- Análisis cualitativo: Determinación de compuestos basados en diferentes tiempos de migración.
- Análisis cuantitativo: Curvas de calibración para determinar la concentración de componentes en base a diferentes picos.
- Aplicaciones: Determinación de pequeños iones, compuestos farmacéuticos, herbicidas, pesticidas, carbohidratos, etc.
Modalidades de la Electroforesis Capilar (16.5)
- Modos electroforéticos: Electroforesis capilar en zona (CZE), electrocromatografía de enfoque isoeléctrico (CIEF), Isotacoforesis capilar (CITP); Electroforesis capilar en gel (CGE)
- Modos Cromatográficos: Cromatografía micelar electrocinética (MEKC) Electrocromatografía capilar (CEC).
Studying That Suits You
Use AI to generate personalized quizzes and flashcards to suit your learning preferences.
Related Documents
Description
Este cuestionario aborda preguntas clave sobre las condiciones necesarias para una efectiva electroforesis capilar. Se explorarán conceptos como la selectividad, la inyección de muestra y el almacenamiento de capilares. Ideal para estudiantes de química analítica y biotecnología.