Diagnosi Microbiologica: Isolamento e Reazioni

Diagnosi Microbiologica Domanda

• Isolamento Virale: Cellule suscettibili necessarie, tempo di isolamento varia a seconda del virus. Cellule permissive e suscettibili sono utilizzate, le cellule utilizzate sono specifiche per l'ospite dove circola il virus.
• Natalizumab e Virus JPyV: La somministrazione di Natalizumab può aumentare il rischio di riattivazione del virus JPyV dopo un anno di trattamento. Il virus non necessita di molte dosi per essere riattivato e interagisce direttamente con la proteina Vp1. Aumenta la capacità d'infezione primaria del virus JVC.
• Piattaforma WASP: Sistema automatizzato per semina e analisi di colture batteriche e per la tipizzazione molecolare dei virus/batteri, automatizza antibiogramma per sensibilità batterica.
• Reazioni Sierologiche: La formazione dell'immunocomplesso in reazioni di neutralizzazione è evidenziata dalla perdita dell'attività biologica dell'antigene. I reazioni di immunoblotting utilizzano micropiastre. La reazione di precipitazione è molto sensibile.
• Neutralizzazione: Utile per la ricerca e la titolazione di anticorpi specifici. Nei soggetti immunocompetenti può dar luogo a falsi negativi; per esempio, IgM falsamente negativi possono essere dovuti alla presenza di fattore reumatoide nel siero. Utile per determinare la carica virale.
• High Resolution Melting Analysis (HRMA): Tecnica post-PCR, non utilizzabile per genotipizzazione, il syber green è simile ad intercalante.
• CMI/MIC: Concentrazione minima inibitoria (CMI) indicata come concentrazione minima di un antibiotico necessaria per inibire la crescita batterica.
• Droplet Digital PCR (ddPCR): Tecnica utilizzata per l'amplificazione di circa 2 milioni di goccioline e permette l'identificazione di sequenze non note con sonde TaqMan.
• LFIA: Test rapido per la ricerca di antigeni batterici in 10-15 minuti.
• Tecnologie MALDI-TOF: Analizza il profilo proteomico dei batteri.
• CMI e Indice I: L'indice I indica la sensibilità del batterio ad alta concentrazione di un antibiotico.
• Tests per Tipizzazione Batterica: Il metodo Vitek è un saggio automatizzato usato per la tipizzazione batterica.
• LAL (Limulus Amebocyte Lysate): Metodica per misurare il contenuto di enterotossine e per valutare il contenuto di antigene capsulare.
• Tecniche per Mutazioni Puntiformi: HRMA è una metodica post-PCR.
• Tecniche Rapide: La colorazione di Gram, la microscopia elettronica e la RT-PCR sono definite tecniche rapide in microbiologia.
• Microarray: Possono essere utilizzati con molecole di DNA, proteine e carboidrati. Il numero dei target è minore rispetto alla PCR in tempo reale, ed è più sensibile. I probe non sono mai prodotti senza una densità opportuna di molecole.
• PML e Natalizumab: In pazienti con sclerosi multipla trattati con Natalizumab è preferibile monitorare gli anticorpi e il DNA per il virus JC nel sangue. Utilizzo di un campione di sangue come riferimento iniziale.
• Titolazione delle Particelle Infettanti: Metodi come il saggio TCID50 sono usati per titolare le particelle infettanti.
• PCR e analisi del DNA: Il metodo ddPCR, è usato per determinare il numero assoluto di copie del target. L'ibridazione allele specifica è una tecnica di ibridazione su fase liquida.
• HMR: Metodica post-PCR che permette la genotipizzazione. In questo caso il test utilizza sonde fluorescenti.
• Test per Antigenemia: La PCR è utilizzata per la ricerca dell'antigenemia.
• Metodi per l'attività antibiotica: La diluizione dell'antibiotico in brodo e il metodo del disco diffusione sono utilizzati.
• Identificazione batterica (microscopia ottica): Colorazione di Ziehl-Nielsen per micobatteri, inchiostro di china.
• Identificazione batterica (API): Profilo biochimico del microorganismo.
• Test per la discriminazione batterica: Test che differenziano stafilococchi da altri batteri Gram-positivi e/o da batteri Gram-negativi.
• Analisi Genotipica: Identificazione batterica basata su analisi genotipica.
• Resistenza agli antibiotici: Target comune di analisi è il gene per la resistenza all'ampicillina.
• Piramsequenziamento NGS: Tecnologie di nuova generazione per l'analisi del DNA.
• Shell Vials: Tecnica per rendere più rapida la rilevazione della positività virale.
• Terreni di coltura: L'agar deve rimanere liquido fino a 37 gradi centigradi per essere solidificato.
• Colorazione batterica: La colorazione con inchiostro di china evidenzia la capsula batterica.
• Metodi di identificazione: La MALDI-TOF confronta il profilo ottenuto con un database per l'identificazione batterica.
• Break-Point clinici: Definiti sulle concentrazioni raggiunte nei vari distretti corporei basati su studi clinici e sulla MIC di riferimento nazionale.
• Riattivazione JCPyV/PML: Maggiore riattivazione in individui affetti da HCV o HIV.
• Ricerca Virale: Metodi indiretti per ricerca virologica come l'isolamento del virus o la ricerca di genoma.
• Genetica resistenza virale: Dipendente dalla presenza di mutazioni che inducono resistenza.