Diagnosi Microbiologica: Isolamento e Reazioni
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Questions and Answers

A proposito dell'isolamento virale diresti che:

  • Il tempo di isolamento di differenti virus è sempre medesimo
  • Si fa su cellule permissive e suscettibili (correct)
  • Le cellule usate sono specie specifica dell'ospite dove circola il virus (correct)
  • Si fa su cellule solo suscettibili (correct)
  • Cosa diresti dell'effetto del Natalizumab in pazienti MS per riattivazione virus JPyV?

  • Solo dopo un anno di somministrazione può dare rischio per JVC (correct)
  • Aumenta la capacità di infezione primaria di JVC
  • Bastano poche dosi per riattivare il virus
  • Riattiva il virus interagendo direttamente con la proteina Vp1
  • Cosa diresti della piattaforma WASP?

  • È un sistema automatizzato per tipizzazione molecolare virus
  • È un sistema automatizzato per tipizzazione molecolare batterica (correct)
  • È un sistema automatizzato per semina e analisi colture batteriche
  • Serve per fare automatizzato antibiogramma per sensibilità batterica ad antibiotici
  • Parlando di reazioni sierologiche diresti che:

    <p>Nelle reazioni di neutralizzazione la formazione dell'immunocomplesso è evidenziata dalla perdita dell'attività biologica dell'antigene (A), Le reazioni di immunoblotting utilizzano come fase solida pozzetti di micropiastre (D)</p> Signup and view all the answers

    Diresti che:

    <p>La reazione di neutralizzazione può essere utile per la ricerca e la titolazione di anticorpi specifici verso un agente di infezione (C), IgM falsamente negativi possono essere dovuti alla presenza del fattore reumatoide nel siero dai soggetti IgG+ e FR+ (D)</p> Signup and view all the answers

    Cosa non è high resolution melting analysis (HRMA):

    <p>Utilizza dye di saturazione (A)</p> Signup and view all the answers

    La CMI O MIC indica

    <p>La concentrazione minima in cui un antibiota è in grado di inibire la crescita batterica (B)</p> Signup and view all the answers

    La droplet digital PCR ddPCR, BIORAD

    <p>Dà informazioni solo quantitative (A), Può utilizzare sonde TaqMan (C), Permette l'amplificazione di circa 2 milioni di goccioline (D)</p> Signup and view all the answers

    Il test LFIA

    <p>Serve per la ricerca di anticorpi anti virus influenza (A), Può essere utilizzato per la ricerca di antigeni batterici con risposta in 10-15 minuti (C)</p> Signup and view all the answers

    Con la tecnologia MALDI TOF

    <p>Si ricerca il profilo proteomico dei batteri (C)</p> Signup and view all the answers

    Nel caso della CMI di un antibiotico cosa significa l'indice I

    <p>Batterio sensibile ad alta concentrazione di antibiotico (A)</p> Signup and view all the answers

    Quale delle seguenti tecniche è un saggio automatizzato per tipizzazione batterica

    <p>Vitek (C)</p> Signup and view all the answers

    A proposito di LAL diresti che:

    <p>Si utilizza l'amebocita di limulus polyphemus (C)</p> Signup and view all the answers

    Quale delle seguenti tecniche possono maggiormente servire per ricercare una mutazione puntiforme conosciuta

    <p>HRMA (D)</p> Signup and view all the answers

    Quale delle seguenti tecniche è meglio considerata come tecnica rapida

    <p>Colorazione di Gram (A)</p> Signup and view all the answers

    Cosa diresti dei microarray

    <p>Possono essere fatti con molecole di DNA, proteine, carboidrati (B)</p> Signup and view all the answers

    I probe dei microarray non sono mai prodotti:

    <p>con tecnica a getto di inchiostro (A), senza analisi della loro autofluorescenza (B)</p> Signup and view all the answers

    In pazienti con sclerosi multipla in terapia con Natalizumab cosa è preferibile monitorare per il rischio di PML

    <p>Con anticorpi e DNA per il virus JC nel sangue (C)</p> Signup and view all the answers

    Il primo ed il secondo campione di sangue per dimostrare un aumento del titolo anticorpale nei confronti di un agente devono essere prelevati

    <p>A distanza di 2-3 settimane (C)</p> Signup and view all the answers

    La titolazione delle singole particelle infettanti si può fare

    <p>Utilizzando il metodo delle placche (B), Utilizzando il saggio della LE50 (C), Utilizzando il saggio della TCID50 (D)</p> Signup and view all the answers

    HMRA

    <p>è una metodica post PCR (A), permette di identificare variazioni genetiche non note (B), utilizza il syber green come intercalante (C)</p> Signup and view all the answers

    Quale dei seguenti è un test per ricerca antigenemia?

    <p>ELISA (D)</p> Signup and view all the answers

    Quale dei seguenti metodi non è utilizzato per l'analisi dell'attività antibiotica?

    <p>Diluizione del batterio (C)</p> Signup and view all the answers

    Con quale metodo si può rilevare la presenza di micobatteri in un campione?

    <p>Colorazione ziehl nielsen (B)</p> Signup and view all the answers

    Cosa si identifica con il test API?

    <p>Profilo biochimico (C)</p> Signup and view all the answers

    Il test che ricerca la presenza di catalisi può discriminare?

    <p>Gli stafilococchi da altri gram positivi (+) (A), Stafilococco aureus da altri stafilococchi (C)</p> Signup and view all the answers

    Nell'identificazione batterica mediante analisi genotipica:

    <p>Il target maggiormente utilizzato è il 16s rDNA (B)</p> Signup and view all the answers

    L'identificazione genotipica batterica si effettua utilizzando:

    <p>Tutti i suddetti target genetici (D)</p> Signup and view all the answers

    Il pirosequenziamento e NGS sono tecniche di nuova generazione per l'analisi del DNA.

    <p>True (A)</p> Signup and view all the answers

    La tecnica delle shell vials permette:

    <p>Tutte le suddette (C)</p> Signup and view all the answers

    L'agar per produrre terreni solidi rimane liquido fino alla temperatura di:

    <p>37 gradi (D)</p> Signup and view all the answers

    La colorazione con inchiostro di china evidenzia:

    <p>Capsula batterica (C)</p> Signup and view all the answers

    Con la tecnica MALDI-TOF l'identificazione batterica è resa possibile per:

    <p>Identificazione viene effettuata paragonando il profilo ottenuto con un database di profili delle varie specie batteriche (C)</p> Signup and view all the answers

    I break-point clinici sono definiti sulla base:

    <p>Dalla MIC di riferimento nazionale (C)</p> Signup and view all the answers

    La riattivazione del JCPyV e possibile sviluppo di PML è maggiore:

    <p>In individui trattati con Infliximab (D)</p> Signup and view all the answers

    Quale dei seguenti metodi è un test indiretto per la ricerca virologica:

    <p>Ricerca IgM specifiche per virus (B)</p> Signup and view all the answers

    La ricerca genotipica della resistenza virale agli antivirali dipende:

    <p>Dalla presenza di nuove mutazioni mai identificate (B), Dalla possibilità di estrarre il genoma dalle cellule in vitro (C), Dalla conoscenza delle mutazioni che inducono resistenza (D)</p> Signup and view all the answers

    Flashcards

    Isolamento virale

    Si effettua su cellule permissive e suscettibili specifiche per il virus.

    Effetto del Natalizumab

    Riattiva il virus JCV solo dopo un anno di trattamento.

    Piattaforma WASP

    Sistema automatizzato per semina e analisi di colture batteriche.

    Reazioni sierologiche

    In neutralizzazione, immunocomplessi si formano con perdita dell'attività biologica.

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    Neutralizzazione anticorpale

    Utile per titolare anticorpi specifici contro un'infezione.

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    High Resolution Melting Analysis (HRMA)

    Tecnica post-PCR per analisi delle variazioni genetiche.

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    Concentrazione Minima Inibente (CMI)

    È la minima concentrazione di antibiotico che inibisce la crescita batterica.

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    Droplet Digital PCR (ddPCR)

    Permette l’amplificazione in milioni di goccioline e fornisce dati quantitativi.

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    Test LFIA

    Usato per ricerca di antigeni batterici in rapida risposta.

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    Tecnologia MALDI-TOF

    Identificazione batterica attraverso profili proteomici.

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    Indici break-point clinici

    Stabiliti da concentrazioni raggiunte nei vari distretti e studi clinici.

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    Droplet PCR e identificazione

    ddPCR distingue sequenze e fornisce numeri assoluti di copie target.

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    Shell vials

    Tecnica per rilevare rapidamente la positività virale.

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    Colorazione Ziehl Nielsen

    Usata per rilevare micobatteri in campioni clinici.

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    Test API

    Identifica profili biochimici dei batteri.

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    Ricerca di catalasi

    Discernere Staphylococci da altri gram positivi.

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    Identificazione genotipica batterica

    Utilizza il 16s rDNA come target principale.

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    Analisi di attività antibiotica

    Condotta con metodi come diluizione e disco di diffusione.

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    Microscopia elettronica

    Tecnica per osservare dettagli cellulari a risoluzione elevata.

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    Metodi di titolazione

    Misurano il numero di particelle infettive nei campioni.

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    PCR e genotipizzazione

    Usa PCR per identificare mutazioni note.

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    Genotipizzazione e SNP

    HRM utilizza sonde fluorescenti per genotipizzazione.

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    Ricerca genotipica resistenza virale

    Dipende dalla conoscenza di mutazioni per la resistenza.

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    Identificazione batterica

    Realizzata confrontando profili proteici con database.

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    Study Notes

    Diagnosi Microbiologica Domanda

    • Isolamento Virale: Cellule suscettibili necessarie, tempo di isolamento varia a seconda del virus. Cellule permissive e suscettibili sono utilizzate, le cellule utilizzate sono specifiche per l'ospite dove circola il virus.
    • Natalizumab e Virus JPyV: La somministrazione di Natalizumab può aumentare il rischio di riattivazione del virus JPyV dopo un anno di trattamento. Il virus non necessita di molte dosi per essere riattivato e interagisce direttamente con la proteina Vp1. Aumenta la capacità d'infezione primaria del virus JVC.
    • Piattaforma WASP: Sistema automatizzato per semina e analisi di colture batteriche e per la tipizzazione molecolare dei virus/batteri, automatizza antibiogramma per sensibilità batterica.
    • Reazioni Sierologiche: La formazione dell'immunocomplesso in reazioni di neutralizzazione è evidenziata dalla perdita dell'attività biologica dell'antigene. I reazioni di immunoblotting utilizzano micropiastre. La reazione di precipitazione è molto sensibile.
    • Neutralizzazione: Utile per la ricerca e la titolazione di anticorpi specifici. Nei soggetti immunocompetenti può dar luogo a falsi negativi; per esempio, IgM falsamente negativi possono essere dovuti alla presenza di fattore reumatoide nel siero. Utile per determinare la carica virale.
    • High Resolution Melting Analysis (HRMA): Tecnica post-PCR, non utilizzabile per genotipizzazione, il syber green è simile ad intercalante.
    • CMI/MIC: Concentrazione minima inibitoria (CMI) indicata come concentrazione minima di un antibiotico necessaria per inibire la crescita batterica.
    • Droplet Digital PCR (ddPCR): Tecnica utilizzata per l'amplificazione di circa 2 milioni di goccioline e permette l'identificazione di sequenze non note con sonde TaqMan.
    • LFIA: Test rapido per la ricerca di antigeni batterici in 10-15 minuti.
    • Tecnologie MALDI-TOF: Analizza il profilo proteomico dei batteri.
    • CMI e Indice I: L'indice I indica la sensibilità del batterio ad alta concentrazione di un antibiotico.
    • Tests per Tipizzazione Batterica: Il metodo Vitek è un saggio automatizzato usato per la tipizzazione batterica.
    • LAL (Limulus Amebocyte Lysate): Metodica per misurare il contenuto di enterotossine e per valutare il contenuto di antigene capsulare.
    • Tecniche per Mutazioni Puntiformi: HRMA è una metodica post-PCR.
    • Tecniche Rapide: La colorazione di Gram, la microscopia elettronica e la RT-PCR sono definite tecniche rapide in microbiologia.
    • Microarray: Possono essere utilizzati con molecole di DNA, proteine e carboidrati. Il numero dei target è minore rispetto alla PCR in tempo reale, ed è più sensibile. I probe non sono mai prodotti senza una densità opportuna di molecole.
    • PML e Natalizumab: In pazienti con sclerosi multipla trattati con Natalizumab è preferibile monitorare gli anticorpi e il DNA per il virus JC nel sangue. Utilizzo di un campione di sangue come riferimento iniziale.
    • Titolazione delle Particelle Infettanti: Metodi come il saggio TCID50 sono usati per titolare le particelle infettanti.
    • PCR e analisi del DNA: Il metodo ddPCR, è usato per determinare il numero assoluto di copie del target. L'ibridazione allele specifica è una tecnica di ibridazione su fase liquida.
    • HMR: Metodica post-PCR che permette la genotipizzazione. In questo caso il test utilizza sonde fluorescenti.
    • Test per Antigenemia: La PCR è utilizzata per la ricerca dell'antigenemia.
    • Metodi per l'attività antibiotica: La diluizione dell'antibiotico in brodo e il metodo del disco diffusione sono utilizzati.
    • Identificazione batterica (microscopia ottica): Colorazione di Ziehl-Nielsen per micobatteri, inchiostro di china.
    • Identificazione batterica (API): Profilo biochimico del microorganismo.
    • Test per la discriminazione batterica: Test che differenziano stafilococchi da altri batteri Gram-positivi e/o da batteri Gram-negativi.
    • Analisi Genotipica: Identificazione batterica basata su analisi genotipica.
    • Resistenza agli antibiotici: Target comune di analisi è il gene per la resistenza all'ampicillina.
    • Piramsequenziamento NGS: Tecnologie di nuova generazione per l'analisi del DNA.
    • Shell Vials: Tecnica per rendere più rapida la rilevazione della positività virale.
    • Terreni di coltura: L'agar deve rimanere liquido fino a 37 gradi centigradi per essere solidificato.
    • Colorazione batterica: La colorazione con inchiostro di china evidenzia la capsula batterica.
    • Metodi di identificazione: La MALDI-TOF confronta il profilo ottenuto con un database per l'identificazione batterica.
    • Break-Point clinici: Definiti sulle concentrazioni raggiunte nei vari distretti corporei basati su studi clinici e sulla MIC di riferimento nazionale.
    • Riattivazione JCPyV/PML: Maggiore riattivazione in individui affetti da HCV o HIV.
    • Ricerca Virale: Metodi indiretti per ricerca virologica come l'isolamento del virus o la ricerca di genoma.
    • Genetica resistenza virale: Dipendente dalla presenza di mutazioni che inducono resistenza.

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    Questo quiz esplora concetti fondamentali nella diagnosi microbiologica, inclusi l'isolamento virale, l'impatto di Natalizumab sul virus JPyV e il sistema automatizzato WASP. Analizzerai anche le reazioni sierologiche e le tecniche di immunoblotting utilizzate nella pratica clinica. Testa la tua conoscenza in questo campo critico della microbiologia.

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