CRISPR-Cas9 : Édition du génome
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Questions and Answers

Quel est le rôle principal de l'ARN-guide dans le système CRISPR-Cas9?

  • Synthétiser de nouvelles séquences d'ADN.
  • Couper le double brin d'ADN à un endroit spécifique.
  • Guider l'enzyme Cas9 vers la séquence d'ADN cible. (correct)
  • Remplacer une séquence d'ADN mutée par une séquence correcte.

Quelle est la principale caractéristique qui rend la technologie CRISPR-Cas9 plus avantageuse que les méthodes précédentes de découpe de génome ?

  • Sa capacité à réparer directement les mutations génétiques complexes.
  • Sa simplicité et sa facilité de mise en œuvre en laboratoire.
  • Sa capacité à pouvoir être programmée pour cibler des séquences spécifiques d'ADN. (correct)
  • Sa capacité à être universellement applicable à toutes les maladies génétiques.

Quelle convention internationale interdit les modifications génétiques transmissibles à la descendance et dont la France est signataire?

  • La convention de Kyoto.
  • La convention d'Oviedo. (correct)
  • La convention de Paris.
  • La convention de Genève.

Comment l'enzyme Cas9 agit-elle une fois guidée vers la séquence d'ADN cible par l'ARN-guide?

<p>Elle coupe les deux brins de l'ADN. (C)</p> Signup and view all the answers

Quel est le but de l'utilisation de CRISPR-Cas9 dans le traitement des maladies génétiques?

<p>De corriger ou remplacer les séquences d'ADN mutées. (A)</p> Signup and view all the answers

Quel terme décrit le mieux les maladies génétiques dues à de multiples mutations et facteurs?

<p>Multifactorielles. (B)</p> Signup and view all the answers

Lors du processus d'édition génomique avec CRISPR-Cas9, qu'est-ce qui est comparable à la fonction 'rechercher' dans un traitement de texte?

<p>L'ARN-guide. (D)</p> Signup and view all the answers

Qu'est-ce qu'un site PAM dans le contexte du système CRISPR-Cas9?

<p>Une séquence d'ADN nécessaire pour que Cas9 puisse couper l'ADN. (B)</p> Signup and view all the answers

Quelle est la fonction principale du système CRISPR-Cas9 chez les bactéries ?

<p>Un mécanisme de défense contre l'ADN étranger. (C)</p> Signup and view all the answers

Qui a détourné le système CRISPR-Cas9 pour en faire un outil de biotechnologie ?

<p>Jennifer Doudna et Emmanuelle Charpentier. (D)</p> Signup and view all the answers

Comment l'ARN-guide localise-t-il la séquence d'ADN cible ?

<p>En scannant le chromosome jusqu'à trouver une séquence complémentaire. (A)</p> Signup and view all the answers

Quelle est la longueur approximative de la séquence spécifique reconnue par l'ARN-guide ?

<p>20 paires de bases. (B)</p> Signup and view all the answers

Qu'est-ce qu'un 'duplex' ARN-ADN dans le contexte de CRISPR-Cas9?

<p>Un complexe formé par l'ARN-guide et l'ADN-cible. (C)</p> Signup and view all the answers

Qu'est-ce qu'une séquence PAM, et quelle est sa fonction?

<p>Une séquence d'ADN adjacente à la séquence cible, nécessaire pour la coupure par Cas9. (C)</p> Signup and view all the answers

Quelle est la séquence nucléotidique spécifique du PAM pour l'enzyme Cas9 couramment utilisée?

<p>NGG (B)</p> Signup and view all the answers

Comment la protéine Cas9 coupe-t-elle l'ADN?

<p>En clivant les liaisons qui unissent les sucres et les phosphates du squelette de l'ADN. (C)</p> Signup and view all the answers

Quels sont les deux mécanismes principaux de réparation de l'ADN après une coupure par CRISPR-Cas9?

<p>La jonction d'extrémités non homologues (NHEJ) et la recombinaison homologue. (B)</p> Signup and view all the answers

Pourquoi la thérapie génique avec CRISPR nécessite-t-elle un 'véhicule' pour transporter Cas9?

<p>Car Cas9 est une protéine de grande taille. (B)</p> Signup and view all the answers

Que cherchent les chercheurs en développant d'autres enzymes Cas?

<p>Des enzymes plus petites pour faciliter le transport, et ayant d'autres séquences PAM cibles. (A)</p> Signup and view all the answers

Quel type d'enzymes Cas est étudié pour éviter les coupures à des endroits non souhaités?

<p>Les enzymes Cas dites 'haute fidélité'. (A)</p> Signup and view all the answers

Quel est l'avantage majeur du système CRISPR-Cas9 par rapport aux techniques de découpage du génome précédentes?

<p>Il est plus rapide et plus facile à mettre en œuvre. (D)</p> Signup and view all the answers

Si une séquence d'ADN cible est ACGGACCTTACCTGAAAAAT, quelle serait la séquence complémentaire de l'ARN-guide?

<p>UGCCTGGAATGGACTTTTTA. (B)</p> Signup and view all the answers

Pourquoi est-ce important pour la thérapie génique d'avoir accès au gène incriminé dans le traitement d'une maladie?

<p>Pour cibler le gène spécifique à modifier ou à corriger. (A)</p> Signup and view all the answers

Flashcards

CRISPR-Cas9

Une technique d'édition génétique qui utilise une enzyme, Cas9, guidée par un ARN-guide pour couper des séquences d'ADN spécifiques.

Mutation délétère

Une mutation dans une séquence d'ADN qui peut entraîner une maladie génétique.

ARN-guide

La partie de CRISPR-Cas9 qui guide l'enzyme Cas9 vers la séquence d'ADN à couper.

Cas9

L'enzyme qui coupe le double brin d'ADN dans CRISPR-Cas9.

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Site PAM

Une courte séquence d'ADN qui aide l'enzyme Cas9 à reconnaître la séquence d'ADN à couper.

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Remplacement de séquence

Le processus de remplacement de la séquence d'ADN coupée par une nouvelle séquence.

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Programmable

La capacité à choisir et à programmer la séquence d'ARN-guide pour cibler une séquence d'ADN spécifique.

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Convention d'Oviedo

Une convention internationale qui interdit les modifications génétiques transmissibles à la descendance.

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Qu'est-ce que CRISPR-Cas9 ?

CRISPR-Cas9 est un système naturel trouvé chez les bactéries qui leur sert de défense contre l'ADN étranger.

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Quel est le rôle de l'ARN-guide ?

L'ARN-guide est une molécule qui se lie à une séquence d'ADN spécifique.

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Qu'est-ce que l'enzyme Cas9 ?

L'enzyme Cas9 est une nucléase qui coupe l'ADN à l'endroit indiqué par l'ARN-guide.

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Que signifie la séquence PAM ?

Le site de coupe de l'enzyme Cas9 est défini par la présence de la séquence PAM (Protospacer Adjacent Motif).

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Pourquoi CRISPR-Cas9 est-il précis ?

La probabilité de trouver une séquence précise de 20 paires de bases dans un génome est très basse, ce qui rend CRISPR-Cas9 très spécifique.

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Donnez un exemple de séquence PAM.

La séquence PAM est généralement constituée de trois nucléotides, comme NGG, où 'N' peut être n'importe quel nucléotide.

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Comment les cellules réparent-elles les coupures d'ADN ?

Les cellules peuvent réparer les coupures d'ADN introduites par CRISPR-Cas9 par deux mécanismes: NHEJ et la recombinaison homologue.

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Quel est le résultat de la réparation par NHEJ ?

La réparation par NHEJ peut entraîner des délétions d'ADN, inactivant le gène.

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Comment la recombinaison homologue corrige-t-elle l'ADN ?

La réparation par recombinaison homologue utilise un brin d'ADN donneur pour corriger la séquence d'ADN.

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Pourquoi les chercheurs recherchent-ils des enzymes Cas plus courtes ?

Les chercheurs développent des enzymes Cas plus courtes pour faciliter leur transport dans les cellules.

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Quel est l'objectif des chercheurs concernant les séquences PAM ?

Les chercheurs explorent d'autres séquences PAM afin de cibler des mutations génétiques avec une plus grande variété de séquences.

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Quelles sont les enzymes Cas « haute fidélité » ?

Des enzymes Cas dites « haute fidélité » sont étudiées pour améliorer l'efficacité et minimiser les effets hors-cible.

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Comment CRISPR-Cas9 est-il livré dans les cellules ?

Les chercheurs développent des méthodes pour délivrer CRISPR-Cas9 dans les cellules cibles, telles que les vecteurs viraux.

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Pourquoi l'accès à l'ADN est-il plus facile dans le sang ?

L'accès à l'ADN incriminé est plus facile dans le sang que dans les organes internes.

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Study Notes

CRISPR-Cas9 : Édition du génome

  • Fonctionnement de base: CRISPR-Cas9 permet de couper l'ADN à un endroit précis. C'est un outil puissant pour corriger des mutations génétiques responsables de maladies.
  • Principe de fonctionnement: L'ARN guide, une séquence variable complémentaire de la séquence cible dans l'ADN, guide la nucléase Cas9 à l'endroit souhaité. L'enzyme Cas9 coupe le double brin d'ADN.
  • Analogie avec un traitement de texte: L'ARN guide joue le rôle de "rechercher", la nucléase Cas9, de "couper" un mot erroné. Le remplacement du mot erroné est une étape ultérieure, hors du système CRISPR-Cas9 proprement dit.
  • Avantages de CRISPR-Cas9: Comparé à d'autres techniques, CRISPR-Cas9 est programmable et plus simple à mettre en œuvre.
  • Spécificité de l'ARN guide: Le génome humain, très grand, est ciblé avec précision grâce à un ARN guide complémentaire de seulement 20 nucléotides.
  • Système naturel: Découvert chez les bactéries comme mécanisme de défense, détourné en 2012 en outil de biotechnologie.
  • Séquence PAM: Une séquence particulière (NGG) est nécessaire pour que la nucléase Cas9 puisse couper l’ADN. Son absence empêche la coupure.
  • Réparation de l'ADN: Après la coupure, la cellule peut réparer la lésion par jonction d’extrémités non homologues (NHEJ) ou par recombinaison homologue.
  • Difficultés actuelles: La réparation efficace et ciblée reste un défi. L'efficacité reste faible dans les cellules testées.
  • Développement et améliorations: D'autres enzymes Cas sont en cours de recherche pour plus de spécificité ou de facilité de transport afin d'accéder plus facilement aux endroits désirés.
  • Encadrement éthique: L’utilisation est encadrée, notamment par la convention d’Oviedo. Les modifications transmissibles à la descendance sont interdites.

Améliorations et applications futures

  • Recherche d'enzymes Cas plus courtes: Des enzymes Cas plus petites sont recherchées pour faciliter le transport et l'accès à des régions du génome difficiles d'accès.
  • Spécificité améliorée: Des enzymes Cas à haute fidélité sont développées afin de réduire les coupures non ciblées.
  • Identification d’autres PAM: D'autres séquences PAM sont en cours d’exploration pour cibler des mutations dans des contextes différents.
  • Applications potentielles: Les thérapies géniques nécessitent des méthodes d'accès aux gènes ciblés. L'accès au sang est plus facile que l'accès à des organes internes comme le foie.

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Testez vos connaissances sur le système CRISPR-Cas9, un outil révolutionnaire pour l'édition du génome. Ce quiz couvre son fonctionnement, ses avantages, et son analogie avec des techniques classiques. Découvrez comment cet outil de pointe modifie notre approche des maladies génétiques.

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