Edición Genética: CRISPR-Cas9

Edición Genética: CRISPR-Cas9

• CRISPR-Cas9 es una técnica que permite editar genes con precisión. Se basa en un sistema inmunológico bacteriano para combatir virus.
• CRISPR-Cas9 utiliza una molécula guía de ARN (ARNsg) para dirigir la enzima Cas9 a una secuencia específica de ADN. La ARNsg es complementaria a la secuencia a editar.
• La enzima Cas9 corta el ADN en la ubicación señalada por la ARNsg. Para que funcione, la secuencia objetivo debe incluir una secuencia PAM (motivo de reconocimiento de protospacer).
• Después de cortar el ADN, la célula lo repara usando sus propios mecanismos de reparación. Esto permite insertar, eliminar o modificar genes específicos.

Componentes de CRISPR-Cas9

• Molécula Guía de ARN (ARNsg): actua como "buscador" para la enzima Cas9.
• Enzima Cas9: "corta" el ADN en la ubicación específica.
• ADN de reparación: se puede introducir para facilitar la reparación del ADN cortado.

Pasos del Proceso de Edición Genética con CRISPR-Cas9

• Diseño del ARNsg: se diseña la ARNsg que complementaria a la secuencia a editar y se asegura de que se encuentre cerca de una secuencia PAM.
• Entrega de CRISPR-Cas9: el complejo CRISPR-Cas9 (ARNsg + Cas9) se introduce en las células objetivo mediante técnicas como la transfección o la inyección directa.
• Corte del ADN: el complejo entra en la célula, la ARNsg guía la enzima Cas9 a la secuencia objetivo y corta el ADN.
• Reparación del ADN: la célula repara el daño utilizando dos mecanismos principales:
  • Reparación por unión de extremos sin homología (NHEJ): es el mecanismo más común, puede generar mutaciones.
  • Reparación mediada por homología (HDR): permite insertar ADN específico en el lugar cortado.