Biotecnología: Vectorización y Clonación
48 Questions
4 Views

Choose a study mode

Play Quiz
Study Flashcards
Spaced Repetition
Chat to lesson

Podcast

Play an AI-generated podcast conversation about this lesson

Questions and Answers

¿Qué tipo de colonias se generan cuando se inserta un fragmento de ADN en el polylinker?

  • Colonias amarillas
  • Colonias blancas (correct)
  • Colonias verdes
  • Colonias rojas

    • Los bacteriófagos infectan solo células humanas.

    False

    ¿Cuál es uno de los fagos más utilizados como vector de clonación?

    fago lambda (fago λ)

    Los ________ artificiales de levaduras pueden transportar insertos mayores de 1 Mb.

    <p>cromosomas</p> Signup and view all the answers

    Asocia cada tipo de vector con su capacidad para transportar ADN:

    <p>BAC = hasta 300 Kb YAC = mayores de 1 Mb Plásmido bacteriano = hasta 10 Kb Fago λ = hasta 20 Kb</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué vectores pueden comportarse tanto como plásmidos como fagos?

    <p>Vectores lanzadera</p> Signup and view all the answers

    Los vectores híbridos no pueden replicar ADN de cadena sencilla.

    <p>False</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué se necesita hacer para que un vector híbrido produzca ADN de cadena sencilla?

    <p>Infectar la célula hospedadora con M13.</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es el primer paso en la recuperación del fragmento amplificado?

    <p>Inserción del gen en el plásmido</p> Signup and view all the answers

    El ADNc puede ser utilizado para crear librerías de ADN a partir de ARNm de una población celular.

    <p>True</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es el objetivo principal del uso de pulsos eléctricos de alto voltaje en la transformación celular?

    <p>Aumentar la permeabilidad de las membranas</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué permite obtener la clonación según el contenido?

    <p>Cantidades ilimitadas de la secuencia de interés.</p> Signup and view all the answers

    La _______ se utiliza en el tratamiento del ataque al corazón.

    <p>hormona de crecimiento humano</p> Signup and view all the answers

    Las células transformadas siempre portan ADN extraño funcional.

    <p>False</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál de las siguientes opciones se puede clonar debido a las ventajas de la clonación?

    <p>Genomas enteros de organismos</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué son los marcadores genéticos en un vector recombinante?

    <p>Genes de resistencia a antibióticos y enzimas que producen reacciones coloreadas.</p> Signup and view all the answers

    Relacione los tipos de investigación con sus aplicaciones:

    <p>Investigación básica = Estudio de secuencias genéticas Investigación básica y aplicaciones diversas = Aplicaciones en biotecnología Clonación de ARN = Creación de librerías de ADNc</p> Signup and view all the answers

    En la detección basada en vectores, las células sensibles a la ampicilina y tetraciclina son ____.

    <p>no transformadas</p> Signup and view all the answers

    Relaciona los tipos de células obtenidas tras la transformación con su descripción:

    <p>Células no transformadas = Sensibles a antibióticos A y T Células transformadas con vector recombinante = Resistentes a A y sensibles a T Células transformadas con vector no recombinante = Resistentes a T y A Células transformadas por ADN no deseado = Contienen ADN no funcional</p> Signup and view all the answers

    El plásmido es un tipo de ADN que se encuentra solo en células eucariotas.

    <p>False</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué tipo de resistencia se observa en las células transformadas con el vector recombinante?

    <p>Resistencia a ampicilina y sensibilidad a tetraciclina</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué se requiere para limpiar desechos tóxicos utilizando bacterias?

    <p>Modificación de bacterias mediante genes</p> Signup and view all the answers

    El inserto de ADN extraño se coloca en el interior de un gen de resistencia funcional.

    <p>False</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuáles son los dos antibióticos utilizados en la detección de células transformadas?

    <p>Ampicilina y tetraciclina.</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es la función principal de las enzimas de restricción?

    <p>Cortar ADN en sitios específicos</p> Signup and view all the answers

    Los extremos cohesivos generados por las enzimas de restricción son inertes y no reactivos.

    <p>False</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué enzima se utiliza para sellar las uniones entre los fragmentos de restricción?

    <p>ADN ligasa</p> Signup and view all the answers

    Las enzimas de restricción generan fragmentos de __________.

    <p>restricción</p> Signup and view all the answers

    Match the following processes with their correct definitions:

    <p>Corte de ADN = Acción realizada por las enzimas de restricción en sitios específicos. Extremos cohesivos = Fragmentos con una forma que permite unirse a otros fragmentos de ADN. ADN recombinante = ADN formado a partir de fragmentos de ADN de diferentes fuentes. ADN ligasa = Enzima que une fragmentos de ADN.</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es la función principal de la enzima de restricción en el ADN?

    <p>Cortar el ADN en secuencias específicas</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué se obtiene tras la multiplicación de células que contienen ADN recombinante?

    <p>Copias del ADN y del fragmento introducido</p> Signup and view all the answers

    La ADN ligasa es responsable de la separación de fragmentos de ADN.

    <p>False</p> Signup and view all the answers

    Las enzimas de restricción solo realizan un corte en el ADN.

    <p>False</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué es un sitio de restricción en el ADN?

    <p>Es una secuencia específica de nucleótidos donde una enzima de restricción corta el ADN.</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué se requiere para aplicar técnicas de clonación molecular adecuadas?

    <p>Cantidad suficiente de ácidos nucleicos</p> Signup and view all the answers

    El proceso de clonación molecular comienza con la inserción de un fragmento de ADN de interés en un _____ .

    <p>vector</p> Signup and view all the answers

    Empareja las siguientes etapas del proceso de clonación molecular:

    <p>Inserción de fragmento de ADN = Uso de tecnología de ADN recombinante Introducción del vector = Colocación en célula hospedadora Selección de células = Identificación de células con ADN recombinante Multiplicación de células = Aumento de la cantidad de células que portan ADN</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué se obtiene tras el proceso de unión de fragmentos de ADN con ADN ligasa?

    <p>ADN recombinante</p> Signup and view all the answers

    La secuencia GAATTC es un ejemplo de un sitio de restricción altísimamente específico.

    <p>True</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es la finalidad de introducir el vector en una célula viva?

    <p>Permitir que la célula reproduce y multiplique el ADN recombinante.</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es la bacteria más utilizada en clonación?

    <p>E. coli</p> Signup and view all the answers

    Las células vegetales no se usan en experimentos de clonación.

    <p>False</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué tipo de plásmido se utiliza en la clonación de plantas?

    <p>Plásmido Ti</p> Signup and view all the answers

    La bacteria E. coli se utiliza comúnmente como _____ para el clonaje de plásmidos.

    <p>hospedadora</p> Signup and view all the answers

    Asocia los siguientes tipos de células con su descripción:

    <p>Células vegetales = Utilizadas para obtener organismos transgénicos Células animales = Usadas en experimentos de inserción de genes extraños Levaduras = Eucariotas unicelulares que crecen en medios de cultivo E. coli = Bacteria más usada en clonación</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué característica debe tener una cepa bacteriana para favorecer la estabilidad de los vectores?

    <p>Carecer de exonucleasas</p> Signup and view all the answers

    La elección de la célula hospedadora es independiente del vector de clonación empleado.

    <p>False</p> Signup and view all the answers

    Menciona dos especies de células que pueden usarse como hospedadoras en clonación.

    <p>Bacillus subtilis y E. coli</p> Signup and view all the answers

    Study Notes

    Clonación molecular

    • Es un proceso de amplificación in vivo de secuencias de ADN genómico o ADNc, basado en la tecnología del ADN recombinante.
    • Requiere un análisis estructural y funcional de ácidos nucleicos (AN) con suficiente cantidad.
    • Implica la aplicación de técnicas de biología molecular.
    • La PCR se usa para la amplificación.
    • La clonación molecular no es lo mismo que la clonación animal.

    Enzimas de restricción (endonucleasas de restricción)

    • Son enzimas bacterianas que cortan moléculas de ADN en secuencias específicas llamadas sitios de restricción.
    • Generalmente producen múltiples cortes.
    • Las enzimas de restricción más útiles cortan el ADN generando extremos cohesivos, que son muy reactivos.
    • ADN ligasa es una enzima que sella las uniones entre los fragmentos de restricción

    Proceso de clonación molecular

    • Se inserta un fragmento de ADN de interés en un vector.
    • Se introduce el vector en una célula hospedadora.
    • Se seleccionan y multiplican las células que portan el ADN recombinante.
    • Se recupera el fragmento amplificado

    Vectores de clonación

    • Son moléculas de ADN que pueden replicarse de manera autónoma en una célula huésped y que permiten la inserción de ADN extraño sin perder su capacidad de replicación autónoma.
    • Actúan como vehículos de clonación, transportando los fragmentos que se quieren clonar al interior de la célula hospedadora.
    • Características de los vectores:
      • Tienen un origen de replicación (ORI).
      • Tienen un sitio múltiple de clonación o polylinker.
      • Tienen un marcador de selección (ej., genes de resistencia a antibióticos).
      • Algunos contienen un promotor que permite la transcripción del inserto. Algunos ejemplos son plásmidos, fagos, cósmidos, fagemidos, cromosomas artificiales

    Tipos de vectores

    • Plásmidos: Moléculas circulares de ADN bicatenario extracromosómico de origen bacteriano con capacidad autónoma de replicación. Pueden transportar insertos pequeños (3.5-5 kb) y tener 20 copias por célula. Ejemplos: pBR322, pUC18
    • Fagos: Son virus que infectan bacterias. Algunos tipos insertan temporalmente su material genético en el cromosoma bacteriano. Ejemplo: Fago lambda (λ).
    • Cósmidos: Vectores híbridos de ADN recombinante de fago λ y plásmidos. Permiten empaquetar insertos de mayor tamaño (hasta 50 kb).
    • Fagémidos: Vectores híbridos de plásmido y fago M13. Pueden replicar ADN de cadena simple y doble. Usados para producir sondas monocatenarias.
    • Cromosomas artificiales: Vectores de gran tamaño para transportar fragmentos grandes de ADN. Los más comunes son BAC (Cromosoma Artificial Bacteriano) y YAC (Cromosoma Artificial de Levadura).

    Células hospedadoras

    • Son células en las que se introduce el vector de clonación para su amplificación mediante replicación.
      • Bacterianas: E. coli es la más utilizada.
      • Eucariotas: Levaduras, células vegetales, células animales (de insectos o mamíferos). Uso en experimentos de clonación para insertarlos en genes extraños.
    • Agrobacterium tumefaciens: bacteria del suelo, causa tumores o "agallas" en plantas, usada en la clonación de vegetales.

    Técnicas de introducción del vector

    • Transformación bacteriana: Captación e internalización de moléculas de ADN desnudas por parte de la bacteria. Se busca que sean "competentes" para este proceso.
    • Transfección: Similar a la transformación pero en células eucariotas (principalmente animales). Se utiliza agentes químicos para introducir los vectores recombinantes. Agentes: fosfato de calcio, liposomas.
    • Transducción: Introducción de material genético extraño a una célula por la acción de un virus. El vector recombinante se empaqueta en el interior de la cápside del virus.
    • Electroporación: Se aplican pulsos eléctricos de alto voltaje a una mezcla de células y vectores para aumentar la permeabilidad de las membranas y permitir el paso de los vectores al interior de las células.
    • Biolística: Se utilizan microesferas de metal (oro o tungsteno) cubiertas de ADN para impactar células y que se incorpore el ADN extraño.

    Selección e identificación de clones

    • Se utilizan marcadores:
    • Genes de resistencia a antibióticos: detección de células que contienen el vector.
    • Proteínas fluorescentes: identificación de células que contienen el vector mediante luz UV.
    • Genes letales: selección de células que contienen el vector.
    • Estrategia cromogénica: se emplean bacterias lactosas negativas y vectores con genes de resistencia y LacZ. Las colonias con el vector recombinante aparecen en color azul, mientras que las que no tienen el inserto son blancas.

    Bibliotecas de ADN

    • Son colecciones de vectores recombinantes clonados.
    • Tipos:
    • Genómicas: Contienen el genoma completo.
    • Cromosómicas: Parte de un cromosoma específico.
    • ADNc: Recopilación de genes transcritos en un tipo de célula en un momento específico, no contiene intrones, promotores o secuencias reguladoras.
    • Métodos de análisis de bibliotecas: identificar el clon o clones (hibridación, inmunológica), método del paseo cromosómico (en base a solapamiento) y secuenciación para descifrar la secuencia del ADN insertado.

    Aplicaciones de la clonación molecular

    • Investigación básica: Estudios filogenéticos, diversidad genética, expresión génica.
    • Investigación aplicada:
      • Producción industrial de proteínas recombinantes (ej., insulina, hormona del crecimiento, factor VIII, vacunas).
      • Biorremediación: Creación de microorganismos para degradar productos tóxicos (ej., petróleo).
      • Producción de cultivos transgénicos (plantas y animales).
      • Terapia génica: Transferir genes normales a células somáticas para corregir enfermedades genéticas.

    Studying That Suits You

    Use AI to generate personalized quizzes and flashcards to suit your learning preferences.

    Quiz Team

    Related Documents

    Clonación de Ácidos Nucleicos PDF

    Description

    Este cuestionario profundiza en los conceptos clave relacionados con la vectorización en biotecnología. Se abordan temas como los tipos de vectores, el uso de ADNc y la transformación celular. Ideal para quienes estudian biología molecular o biotecnología.

    More Like This

    Use Quizgecko on...
    Browser
    Open
    Browser
    Browser