Targeted Drug Delivery System (TDDS) Fundamentals PDF

제제설계학 5 조 Ⅱ. 나노캐리어 논문제목: Fundamentals of a targeted drug delivery 1. Liposomes system(TDDS) Ⅰ. Introduction 1. DDS(drug delivery system) 5 세대 - 1 세대 : 생물학적 막을 통한 약물 흡수에 의존하는 약물 (아스...

제제설계학 5 조 Ⅱ. 나노캐리어 논문제목: Fundamentals of a targeted drug delivery 1. Liposomes system(TDDS) Ⅰ. Introduction 1. DDS(drug delivery system) 5 세대 - 1 세대 : 생물학적 막을 통한 약물 흡수에 의존하는 약물 (아스피린 경구제, 페니실린 주사제) - 2 세대 : 서방형제제나 장용정과 같이 약물의 방출 속도나 지속 시간을 조절하는 약물 - 3 세대 - 인지질 이중층 단일막 or 다중막으로 이루어진 : 삼투압 펌프 혹은 농도차에 의한 확산을 소포 이용한 니코틴 패치 등 약물이 체내에서 - 일반적으로 내부에 수성 중심을 가짐 원하는 속도와 농도로 방출되는 약물 - 소분자 약물, 단백질, 핵산 등의 운반체로 사용 - 4 세대: TDDS - retain, release, target, evade 만족 - 5 세대: 나노 로봇, gene therapy - 단점: 불안정하여 특수한 저장조건 요함 2. TDDS 란? ⚫ Riposome 의 종류 (크기와 생산 구조에 따라 나뉨) : 파울 에를리히의 ‘magic bullet’ (숙주 유기체의 스트레스를 최소화하고, 병원균에 선택적인 치명적 작용을 가한다는 타겟팅 개념)에서 출발 ⚫ TDDS 의 이점 1) 약물 성분을 specific 한 신체 부위에 전달 2) 비특이적인 독성↓, 다중부위 상호작용↓ 3) 치료 효능에 필요한 약물 양↓ 1) SUVs: 가장 작은 단일막 + 대사 지연, 체내 안정성↑, 용해도↑ 가능 2) MVLs: 큰 막 안에 작은 소포 여러 개 -> 3 조에서 발표한 내용이라 그냥 넘어감 ⚫ TDDS 의 4 가지 핵심 요구사항 1) 내용물을 목적지 전까지 안정하게 retain 할 것 ⚫ 현재 미국, 유럽에서 시판 중인 liposomal 제품은 14 개 2) 신체의 방어 evade 할 것 - Doxil: FDA 최초 승인 리포좀 제형, 난소암, 3) Target 에 물질을 선택적으로 축적할 것 카포시 육종, 흑색 종을 적응증으로 가짐 4) 원하는 작용 부위에서 약물을 release 할 것 - AmBisome: 전신진균 감염에 사용 추가적으로 생화학적으로 불활성, 생체 적합성, - 대부분의 리포좀 제형의 구조는 SUVs 비면역원성, 생체 내 분해특성 그리고 비교적 효율적인 : 200nm 이하의 크기로 체내 순환 시간이 제조 공정을 지니며 약물 방출의 예측 가능한 방출 길어 투여 간격이 늘어남. 질병 부위 패턴을 지녀야 이상적인 TDDS 수동적 타겟팅 가능. ⚫ TDDS 의 3 가지 구성요소 1) Coordinated drug behavior. 2) Target 부위 3) Pharmaceutical carrier ⚫ Lipsome 제법 - 비이온성 계면활성제는 산화 및 가수분해되기 1) Film-Hydration Method 필름 수확법 쉬운 인지질(중성 or 음전하)과 달리 안정하고 독성이 적음. 리포좀보다 더 넓은 범위의 온도(25- 37°C)에서 안정 - 제작 용이, 저렴한 비용, 저장 간편 ⚫ Niosome 제법 1) Sonication - 전통적 제법으로 주로 소수성 약물 적재 - AmBisome 이 이 제법으로 만들어짐 ① 유기용매에 지질 녹이고 회전 증발시킴 ② 플라스틱 벽면에 얇은 필름이 생김 - 간단하며 소포 크기를 조절할 수 있고, 유기 ③ 수용성 용액을 넣어주면 이 필름이 뭉치면서 용매를 사용하지 않아 친환경 적이라는 장점 다중층 소포(MLVs)가 생김 - 에너지 소비가 크다는 단점 ④ Size reduction 기술을 통해, MLVs 를 SUVs 로 ① 계면활성제와 콜레스테롤 혼합물에 약물을 만들 수 있음 포함한 수용성의 완충용액 부음 2) Size-Reduction 기술: Extrusion (압출법) ② Probe Sonicator 로 60°C 3 분간 초음파 3. Transferosomes - polycarbonate 막을 통과시키면 파열 후 재배열 과정을 거쳐 크기가 줄어듦. - 반복 수행 시 크기 점진적 감소 2. Niosomes - 유연하고 변형 가능(deformable)한 천연 인지질 막 소포 - 막의 10~25%를 구성하는 edge activator 가 인지질 이중층을 유연하게 만들어 줌. (edge activator 는 Sodium cholates, Tweens and Spans 등의 계면활성제임) ⚫ 리포좀과의 유사점 - 리포좀과 네오좀과 달리 각질층 통과 능력이 - 양친매성 분자 단일막 or 이중층 소포 뛰어남. → 스스로 납작해져서 봉입 약물의 손실 없이 피부 - 크기 10~1000nm 장벽 통과 - 생체 적합 및 DDS 사용 가능 → 수분이 있는 쪽을 향해 이동하는 특성인 주수성 ⚫ 리포좀과의 차이점 (Hydrotaxis)을 추진력으로, 건조된 각질층에서 - 리포좀의 Double chain 인지질과 달리 Single 촉촉한 피부 안쪽으로 이동함. chain 의 비이온성 계면활성제로 구성 → 비폐색적 조건에서 더 효율적으로 통과함. (꼬리가 2 개가 아니라 1 개) (붕대로 감으면 각질층이 불어서) ⚫ Transferosome 제법 ① Polymer+ drug 와 surfactant+물, 두 개의 1) Rotary Evaporation-Sonication Method 상을 이용한 Emulsion 을 만듦 ② Sonification 을 통해 계면활성제 막을 구성 ③ 용매를 증발시켜 폴리머 분자 사이의 유기용매가 증발하며 폴리머가 응축 - sonication+필름 수확법 ① 인지질과 edge activator 를 녹인 유기용매를 회전 증발기를 이용해 증발시킴 ② 벽면에 남은 필름에 수용액을 넣어 소포 ⚫ Polymeric NP 의 특성 형성 - Size: DLS ③ sonication 또는 압출법을 이용해 크기 조절 - Zeta potential: 응집과 관련 4. Polymeric Nanoparticles (NP) - Molar mass distribution 에 따른 안정성 변화 - Drug Association: 나노입자 내에 약물의 양 - 고분자(예: PLA, PLG, PLGA 등)를 이용한 NP ① Ultracentrifugation & Ultrafiltration-centrifugation 방법 : 초원심분리기를 통해 자유 약물과 나노입자 내 약물을 분리하고 자유 약물의 농도를 구해서 전체에서 빼는 방법. - Lyophilization (동결건조), spray drying (분무건조) 등이 주로 사용되어 안정성 높임 ⚫ Polymeric NP 의 장점 - PLGA 고분자는 FDA 승인을 받았음 - 생체 적합, 낮은 독성, 생분해성 - 치료 예시: BBB 통과 가능 PLGA +Rapamycin: anti-glioma activity (Nanosphere) - Nanocapsule 과 Nanosphere 로 나뉨 PLGA +Fenofibrate: diabetic retinopathy (Nanosphere) ① Nanocpasule→ Reservoir system PLGA-PEG + Paclitaxel: breast/brain cancers (Nanocapsules) : 약물이 외피 특성을 지닌 고분자 막 내에 5. Solid lipid Nanoparticles (SLNs) 존재하여 외피의 두께와 방출 특성에 따라 속도가 조절됨. ② Nanosphere→ Matrix system : 고분자 matrix 사이에 약물이 균일하게 분산된 형태로, 약물의 확산 속도나 Matrix 의 특성에 따라 속도가 조절됨. ⚫ Polymeric NP 제법 1) Solvent Evaporation 용매 증발법 - 지질 단층막이 solid lipid core 를 둘러싼 구조 - Solid lipid: wax. triglyceride 등의 천연 지질 ⚫ SLNs 제법 ⚫ Albumin NP 의 장점 1) High Pressure Homogenization - gp60, SPRAC, Transferrin, TRAIL 리간드 (고압 균질화 방식) 결합을 통해 종양 특이적 타겟팅 가능 - 양물 방출 조절 가능 - 약물 내성 우회 기전 - 안정성(ex: siRNA 약물 전달) - 치료 예시: Abraxane®(nab-paclitaxel)- breast, lung, pancreatic cancer →FDA 승인을 받아 상용화 됨! Doxorubicin binding Nanoparticles- breast cancer Noscarpine binding Nanoparticles- breast cancer - 유기용매를 사용하지 않고 만들어 친환경적 ① 약물을 지질에 녹여 emulsion 을 만듦 ② 고압 가하여 분쇄 ⚫ SLNs 장점 - 생체 적합, 생분해성, 낮은 독성 - 치료 예시: BBB 통과 가능 7. Nanocrystal Breast cancer: Paclitaxel-loaded SLNs Lung cancer: Naringenin-loaded SLNs Brain cancer: Doxorubicin, Etoposide 6. Albumin Nanoparticles ⚫ Albumin NP 제법 1) 탈용매 기술 - 나노크기로 결정구조를 유지하는 입자 - 강자성체만이 아닌 상자성체로도 구성 가능 ① 강자성체: 외부 자기장 없어도 자화되는 물질 ② 반강자성체: 외부 자기장이 있을 때 자화되지만, 그 자화가 자기장 방향과 반대 방향으로 번갈아 배열됨 ③ 상자성체: 외부 자기장이 있을 때만 자화 ① 수층에 약물을 녹이고 유기용매를 조금씩 (반강자성체, 상자성체는 입자 크기와 무관하게 그냥 떨어뜨림 물질 자체의 특성으로 생각하면 되고, 아래의 내용은 ② 유기용매가 알부민 근처에 있는 물 분자를 강자성체의 보자성에 대한 내용임) 탈수시킴 ③ 알부민 사이의 소수성 상호작용이 증가하여 서로 응축됨 ④ Glutaraldehyde 와 같은 교차 결합제를 넣어 안정화해주면 입자가 형성됨  ⚫ Nanoemulsion 의 장점 - 표면적이 커서 표면 활성과 자유에너지 높음 → 세포막과의 융합이 더 잘 됨 - 열역학적 불안정성에 따른 약물 방출 촉진 - Emulsifier(계면활성제)를 사용해 독성이 낮음 - 층 분리(크리밍), 응집 발생 적어 안정성 높음 ⚫ Nanoemulsion 의 활용 1) Antigen presenting ① Repetitive antigen display ⚫ 보자성 (Hc, coerctivity 항자기성) : 외부 자기장으로 자화시킨 후, 외부 자기장을 제거해도 자성체에 남아있게 되는 강자상체의 자화 유지 능력 - 나노입자 표면에 antigen 을 많이 합성한 후, - Ds(임계지름) 기점으로 작을 경우 단일 세포 내부로 들어가 신호 체계를 활성화 도메인(S-D), 클 경우 다중 도메인(M-D)을 ② Cross-presentation 이룸 - Dp(초상자성 임계지름)보다 큰 입자에서 보자성이 증가하다가 Ds 기점으로 감소 - Dp 보다 작은 직경은 보자성이 0 으로 초상자성 물질의 거동과 유사함 ➔ Hyperthermia 고열 치료에 응용 : 자기장유도가열기술 ① 임계지름보다 크게 만들어 자화 유지 능력을 갖고 암을 타겟팅 - 나노입자 표면의 antigen 이 분해되어 ② 고주파 교류 자기장을 가해 전류가 발생 antigen 만 세포 내부로 들어가 신호 전달 ③ 열을 이용해 타겟을 태움 2) Vaccine - 표면에 단백질을 결합헤 면역반응 유도 8. Nanoemulsion - 독감, HIV, HBV 백신이 임상 시험 중 - 입자평균지름 50~1000nm (대부분 100~500nm) - 방출속도 조절해 투여 횟수 감소 - 수중유(w/o) 또는 유중수(o/w) - 고온에 장기적으로 안정하여 냉장체인이 필수적이지 않아 개발도상국에서 사용 가능 9. Dendrimer - 말단의 amino group 이 음전하의 세포막과 정전기적 상호작용을 하여 타겟팅에 도움을 줌 - 세대가 증가할수록 독성이 증가함 - 나무를 뜻하는 그리스어“Dendron” 유래 - 세대(G1, G2…)를 거듭할수록 고분자 형태가 커지고 말단(S)에 많은 functional group 존재 - functional group 이 거대분자적 특성을 결정 - 약물 캐리어로서 기능 ⚫ 단분산성(Monodispersity) - DNA 를 겉에 붙여서 세포 내부로 gene transfection 할 수도 있음 ⚫ Dendrimer 의 intracellular delivery - 일반적인 고분자 NP 는 Molar mass distribution 이 다분산성이지만, Dendrimer 는 단분산성임. - 나뭇가지 붙어가며 계층적으로 규칙성 있게 성장하고 여러 차례의 정제 과정을 거치기 때문 → 균일한 구조가 유지되므로 재현성을 제공함 ⚫ Dendrimer 활용 1) PAMAM - 말단 부분의 기능기에 약물, ligand, 항체, gene 등을 부착하여 세포 내부로 ethylenediamine endocytosis 후 약물 작용 가능 - ethylenediamine 핵 사용하여 고분자화 Ⅲ. 표적 메커니즘 2) RES (세망 내피계) 회피 1. Passive targeting : 신체의 자연스러운 반응으로 인한 약물 표적 40kDa 를 넘는 적절한 분자량을 가져야 하며, RES 를 회피해야 하고, EPR 효과를 증가할 수 있는 환경적 여건이 갖춰질 때 효과적인 Passive targeting 이 가능함 - RES: 림프절, 지라, 골수 등의 세망 세포나 간, 부신 등 특별한 기관 내부의 혈관 ⚫ 메커니즘 내피세포 등을 말함. - 약물이 loading 된 나노입자가 RES 회피 및 (예: 간의 쿠퍼 세포, 뇌의 미세아교세포, 폐포 EPR 효과에 의해 종양과 같은 병리학적 대식세포… 간단하게 외부 물질을 제거하는 단핵구 및 부위에 축적됨 대식세포라고 생각하기) - 나노입자가 정맥 투여되면 이물질로 1) EPR 효과(Enhanced permeability and retention) 인식되어 옵소닌화되고 RES 에 의해 빠르게 제거됨 ➔ 나노입자가 EPR 효과에 의해 축적되기 위해서는 순환계에 6 시간 이상 머물러야 하는데, 이 시간 동안 RES 를 회피해야 함 ⚫ Passive targeting 조건: 크기 40kDa 이상 40-50 kDa 이하의 분자는 신장에서 빠르게 걸러짐 - 1986 년 Maeda 의 연구 혈장 알부민에 결합하는 Evans blue 염료, 트랜스페린(90kDa) 및 IgG(160kDa)과 같은 혈장 단백질 등이 종양 조직에 축적됨. 그러나 - 암세포와 주변 혈관에서 나타나는 효과로 네오카르지노스타틴(12kDa) 및 오보뮤코이드(29kDa)와 혈관 투과성이 증가하고 림프의 배출이 감소 같이 작은 단백질은 종양 내에 축적되지 않았음 ① 정상적인 혈관은 크기가 2~4nm 이상인 ➔ 분자량이 신장 역치(40kDa)를 넘는 거대 분자가 분자를 통과시키지 않는 tight junction 을 정맥 주사되면 종양 조직에 우선적으로 축적되는 갖추고 있어 나노입자가 순환계 내에 유지됨 경향이 있음 ② 악성 종양이 만들어 낸 새로운 혈관은 무질서하고 림프계가 잘 발달되어 있지 않음. - Dreher 등의 연구 덱스트란 분자량이 증가하면 혈관 투과성이 크게 ③ 새로운 혈관의 넓은 틈새로 나노캐리어가 감소하지만, 혈장 반감기가 증가하며 덱스트란이 들어옴. 40~70kDa 일 때 가장 높은 종양 축적이 나타났음 ④ 림프계로 배출되지 않아 정체됨. ➔ 혈관 투과와 혈장 반감기 사이의 균형이 필요함 - EPR 효과에 미치는 요인: PGs, VEGF, Peroxynitrite, MMPs, NO, Bradykinin, 혈압 ⚫ Passive targeting 의 한계 - 종양 사이질에서 나노 입자의 효율적인 국소화를 촉진하지만 암세포에 의한 나노 입자의 흡수를 촉진할 수는 없음 - 세포로의 직접적인 흡수를 촉진하기 위해서는 능동적 표적화가 필요함  2. Active targeting, 스마트 약물 전달 ① 개념 - 리간드와 수용체의 친화성을 이용해 약물이 - 압타머(aptamer): 안정된 삼차구조를 특정 질환 부위에만 선택적으로 도달 유지하면서 특정 분자에 특이적으로 강하게 - 특수한 구조적 설계를 통해 타겟팅 결합할 수 있는 핵산 - 온도나 pH 에 반응하는 물리적 타겟팅 - SELEX(Systematic Evolution of Ligands by EXponential enrichment) 기술을 이용하여 (리간드-수용체만 중점적으로 다룸) 발굴, 선별됨 ⚫ 대표적인 리간드-수용체 사례 - 항체의 대체 기술로 주목 1) Antibody-targeted nanocarriers ② 항체 VS 압타머 - 항체(~150kDa)에 비해 분자량(~20kDa)이 ① 개념 작아 생산하기 쉬움 - 항체나 항체조각이 종양 항원에 특이적으로 - 동물세포를 이용하여 생산하는 항체에 비해 결합하여 종양 부위에 직접 약물을 전달함 화학적 공법으로 합성하여 생산성과 품질 - 설계 요소 재현성이 높음 : 항체의 구성, 출처, 나노입자에 결합되는 - 열과 화학물질에 더 안정적이어서 생산, 이용 방식(직접 or PEG 같은 연결분자에 의해) 편리하고 응용 가능 - 암세포의 표피 성장 인자 수용체(EGFR)와 - 항체를 개발하기 힘든 물질들(ex. 종양의 혈관 내피 성장 인자(VEGF) 등이 당단백질)에도 특이적으로 결합하는 주된 타겟임 aptamers 개발 가능 - 다양한 항체나 항체 조각과 결합된 약물로는 - 화학적 잔기 치환이나 기능성 고분자를 gemtuzumab(젬투주맙), 붙이는 등의 여러 가지 변형이 항체보다 trastuzumab(트라스투주맙), 쉬워서 기능성과 응용 방법 개선 가능함 tositumomab(토시투모맙) 등이 있음 - 생체 내에서 면역반응을 거의 일으키지 않음 ② 활용 사례 - 트라스투주맙(유방암 치료제) ③ 활용 사례 : 항-HER2 단일클론 항체인 트라스투주맙을 - 스트립 바이오센서(ANSB) 시스템 결합한 자성 나노복합체(TMCN)가 MCF-7 유방암 세포에서 HER2 를 선택적으로 인식 - HER2 는 세포 성장, 접착, 이동 및 분화를 조절하는 막 티로신 키네이스 수용체로, 인체 유방암의 25-40%에서 과발현 - 대표적인 제품: 허셉틴 ✓ 순환 암세포(백혈병, 림프종, 골수종…)를 민감하고 빠르게 비침습적 검출 2) Aptamers-targeted nanocarrier ✓ 두 종류의 특수 압타머 이용 - thiol-TD05: 황 원자 포함된 티올 그룹을 통해 금 나노입자(Au-NPs)에 결합. (금 나노입자의 독특한 광학적 특성 → 바이오센서에서 높은 민감도로 목표 물질 검출) - biotin-TE02: 테스트 영역에 고정  ✓ 측면 흐름 장치(lateral flow device)로 - 악성 세포의 성장과 분열에는 많은 양의 샘플의 흐름에 따라 검출 진행됨 철이 필요하여, 종양 세포에서는 트랜스페린 →검체가 ASNB 에 도입 수용체(TfR)가 과발현 →암세포가 금 나노입자와 결합한 thiol- - 트랜스페린을 리간드로 사용하여 종양 TD05 와 상호작용 세포로 약물을 전달하는 표적화 전달 →세포가 결합된 금 나노입자는 시스템이 개발 계속해서 biotin-TE02 가 고정된 테스트 영역으로 이동 →바이오틴-스트렙타비딘 결합을 통해 세포가 테스트 영역에 고정되어 적절한 신호를 생성 →적색 밴드 생성 or 정량적 측정 - 다중벽 탄소나노튜브(MWCNT) 기반 나노 초음파 대조제 - 트랜스페린을 결합한 나노입자는 수용체 매개 세포 내 흡수 경로를 통해 암 세포 내로 진입을 촉진 ② 활용 사례 ✓ 전립선암 조기 진단 바이오마커인 ✓ 뇌혈관 장벽(BBB)을 통과하고 GLUT-1 전립선 특이 막 항원(PSMA)에 특이적 (혈뇌장벽의 포도당 수송체)와 결합하여 결합 교모세포종(glioblastoma multiforme, ✓ 다중벽 탄소나노튜브(MWCNT)에 GBM) 등 중추신경계(CNS) 질환을 폴리에틸렌 글리콜(PEG)을 결합한 표적화 형태인 MWCNT-PEG 에 PSMA 압타머를 부착 (PEG: 생체 적합성 높이고 체내 4. Inverse targeting 순환시간 연장하는 역할) - RES 를 회피하기 위해 다당류 또는 lipid ✓ 초음파 영상에서 암세포 위치 표시 micromolecule 을 나노입자 표면에 접목하는 →비침습적 진단 기술로서 활용 것 3. Transferrin-targeted nanocarriers ⚫ 활용 사례 - lipid microemulsion (LM) emulsified with poloxamer 338 : 간과 비장과 같은 RES 가 풍부한 장기에 흡수되는 문제를 피하고자, 기존 LM 의 유화제인 레시틴을 폴록사머 338 로 대체한 PLM(Poloxamer-modified Lipid Microemulsion)을 개발 → 폴록사머 338 이 LM 표면을 친수성으로 ① 개념 만들어 옵소닌 결합을 감소 - 트랜스페린(약 80kDa): 철을 결합하는 혈액 글리코프로테인, 고유한 두 개의 철 결합 부위를 이용해 혈장에서 자유 철(Fe)의 수준을 조절하고 세포 성장에 관여함.  5. 추가적인 targeting 방법 소개 Q. 정상세포에서도 타겟 바이오마커가 발현될 수도 있지 않은가? ⚫ Dual targeting 은 치료 활성 자체를 가진 운반체 → 어려움. 따라서 개선해 나가고 있음. 그리고 암에 걸려 분자에 치료 약물을 loading 하여 동시에 두 가지 죽게 생겼는데 그 정도 부작용은 감수하고 우선 암세포 시너지 효과를 내는 접근법 죽일 수 있다면 그냥 쓴다고 함. ⚫ Double targeting 은 지리적 타겟팅과 시간적 타겟팅을 동시에 진행하는 방법으로, 지리적 Q. SLN 에 어떻게 친수성 약물을 봉입하는지? → 친수성은 사실 잘 못 씀. 할 수도 있다는 것. 내부가 타겟팅은 약물이 종양 부위와 같은 특정 위치로 solid phase 이기 때문에 소수성 약물을 씀. 전달될 수 있도록 하는 것이고 시간적 타겟팅은 약물이 특정 속도, 또는 특정 자극에 반응하여 Q. 리포좀이 불안정하니까 특수한 저장 조건이 필요하다고 전달되도록 조절된 방출을 의미 했는데, 그 저장 조건이 뭔지? ⚫ Combination targeting 은 표적에 직접 접근할 수 → 리포좀 조성, 완충용액 pH 를 고려해야 함. 일반적으로 실온에서 20 도 부근 좁은 범위의 온도 내에서 보관 있는 분자 특이성을 가진 캐리어, 폴리머 등을 보관하기 어려움, 표면적이 넓으니까 불안정하여 모양이 장착한 표적 전달 방법 망가지기 쉬움. 그냥 바로 사용하는 게 가장 좋고 리포좀 특성에 따라 잘 보관해야 함. 예를 들어 양이온 성분을 많이 썼다면 (-) charge 의 첨가제를 좀 넣어서 응집을 방해할 수 교수님 말씀 파란색 있고…. 항체는 가변 구역이 아미노산 20 개를 이용해 다양하게 근데 리포좀은 걍 구식임 변화시킬 수 있는 반면, 압타머는 염기서열 4 개를 Q. 항체를 리포좀에 붙여서 타겟할 때 약물 전달 비율? 이용하기에 특이성이 낮다. 따라서 압타머의 변형이 쉽다는 종류에 따라 다 다름 이야기는 특이성 측면이 아닌 압타머의 형태적 측면에서의 변형을 말한다. 따라서 아직까지는 항체를 이용한 타겟팅 그리고 항체도 크고 리포좀도 커서 잘 안 붙임. 항체의 변이 전략이 많이 이용된다. 영역만 때서 붙이는 경우가 많음, 그리고 딱 인지질 이중층에 똥그란 기본 리포좀은 불안정해서 잘 안 쓰는 듯. Q. Nanoemulsion 에서 열역학적 불안정성이 높다고 했는데 항체는 soluble 하니까 ADC 가 오히려 더 많이 쓰임. 어떻게 약물의 안정성을 유지하는 가? → 열역학적으로 안정해야 하면서 불안정해야 함 (?) 표면적이 크면 엔트로피 우세한 방향으로, 즉 지질이 막에서 탈출하려는 반응이 더 우세하다. 따라서 열역학적으로 불안정한 것이다. 약물의 활성성분이 안정하다는 것은 동역학적으로 안정하다는 게 아니고 성분 자체가 화학적 변형이 일어나지 않고 그 본질을 유지한다는 의미다. Q. 압타머에서 SELEX 과정이 뭔지? →SELEX 는 무작위 서열의 올리고 뉴클레오타이드를 준비해서 표적과 결합할 수 있는 다양한 서열을 확보한다. 그 다음에 표적을 제시하여 약하게 결합한 서열을 세척해 나가면서 특이성을 높여 나가는 방법이다. 그리고 특이성 높은 서열을 찾으면 PCR 로 증폭하고 선별한다. 앱타머는 그냥 서열가지고 찾는 게 아니라 단일 가닥이라서 여러가지 접힘 구조를 고려해야 함. 그래서 올리고뉴클레오타이드에 다양한 변이를 줘서 매칭되는 애들을 찾는 것.