Résumé TP Biochimie UM6SS PDF

1ère ANNEE DE MEDECINE Module : CHIMIE-BIOCHIMIE Révision Travaux Pratiques de Chimie - Biochimie Structurale Pr. A. MOUSTAGHFIR Pr. A. ER-RAMLY 2023-2024 1 Manipulation I : Les glucides - Les o...

1ère ANNEE DE MEDECINE Module : CHIMIE-BIOCHIMIE Révision Travaux Pratiques de Chimie - Biochimie Structurale Pr. A. MOUSTAGHFIR Pr. A. ER-RAMLY 2023-2024 1 Manipulation I : Les glucides - Les oses ou monosaccharides (glucose, fructose, …) sont réducteurs mais non hydrolysable. - Les osides ou polysaccharides comme les diholosides (saccharose) ne sont pas réducteurs mais hydrolysable - La propriété réductrice de tous les oses peut être mise en évidence par le cuivre dans le milieu alcalin (par la soude)  on utilise la liqueur de Fehling - La liqueur de Fehling est une solution alcaline du sulfate de cuivre (CuSO4). 2 - Glycose + la liqueur de Fehling + chauffage donne un résultat positif (coloration rouge brique) : donc sucre réducteur - Saccharose + la liqueur de Fehling + chauffage donne un résultat négatif (coloration bleu) : donc sucre non réducteur. - Saccharose après hydrolyse acide + la liqueur de Fehling + chauffage donne un résultat positif (coloration jaune orange rouge) : donc sucre réducteur - Saccharose après hydrolyse acide libère deux sucres simples : le glucose et le fructose - Réaction de SELIVANOFF : permet la différenciation entre deux sucres simples : aldose (comme le glucose) et cétose (comme le fructose). 3 Le test de Seliwanoff donne une coloration : - rouge cerise foncée sont les cétoses (fructose) : en présence d'acide chlorhydrique concentré et a chaud les cétoses se déshydratent rapidement pour donner le 5-hydroxymethylfurfural formant un composé rouge cerise foncé. - rouge cerise faible : sont les aldoses (glucose) déshydratation lente 4 Identification d'une solution inconnue Manipulation II : Les lipides La réaction de saponification : c’est un procédé chimique qui permets la transformation des lipides non solubles dans l’eau en substance solubles dans l’eau. Normalement les lipides ne sont pas solubles dans l’eau, pour qu’il y être, ils doivent réagir avec un alcalin « NaOH » Réaction de saponification d’un triglycéride simple par NaOH Milieu alcalin Alcool Savon Lipide : ester 6 - Acidification par acide acétique transforme le savon soluble en une solution d'acides gras insolubles dans l'eau. - Ajout d’une solution de chlorure de baryum transforme le savon de sodium soluble en savon de baryum insoluble. - Ajout d’une solution saturée de chlorure de sodium précipite le savon de sodium: relargage c’est la floculation des solutions colloïdales par les sels neutres Définition d'indice de saponification : L’indice de saponification d'un corps gras est la quantité de potasse exprimée en mg, nécessaire pour saponifier 1 g du corps gras. 7 La mise en évidence d'un acide gras insaturée peut se faire par Halogénation d’une double liaison de cet acide gras. L’indice d'iode d'un corps gras : la quantité d'iode exprimée en cg qui se fixe sur un gramme de cette substance. Seuls les composes porteurs de doubles liaisons sont susceptibles de fixer l'iode par addition. L'indice d'iode augmente en même temps que la proportion des acides gras insaturés. 8 Manipulation III : Les protides - Les acides amines sont chargés électriquement du fait de la présence dans leurs molécules de groupement -NH2 basique et de groupement -COOH acide, qui sont ionisés sous forme –NH3+ et COO- selon le pH du milieu : amphotérie - Les acides amines sont des structures diioniques amphotères. Dans une solution, en fonction du pH, les acides amines existent sous 3 formes : 9 - Les acide amines sont donc des composes amphotères qui possèdent un point isoélectrique caractéristique (= pH pour lequel le nombre de charges positives équivaut au nombre de charges négatives). La molécule est alors électriquement neutre (Zwitterion) - Une protéine : dans le milieu alcalin, elle prend la forme anionique (-) donc elle donne précipitation avec un cation. - Une protéine : dans le milieu acide, elle prend la forme cationique (+) donc elle donne précipitation avec un anion. - Une protéine : dans le milieu neutre, elle porte la charge positive et la charge négative 10  - + + - Précipitation : signe + ; Pas de Précipitation signe - CARACTERISATION DES ACIDES AMINES ET DES PEPTIDES 1) Réaction du biuret : caractérisation de la liaison peptidique  coloration violette résultante de la substitution d’hydrogène actif de la liaison peptidique par un métal comme le cuivre Cu en milieu alcalin. 2) Réaction de ninhydrine : réaction commune à tous les acides aminés (couleur bleu violacée) à l'exception de la proline (coloration jaune). 12 RÉACTIONS PARTICULIÈRES À CERTAINS ACIDES AMINÉS OU À CERTAINS GROUPES D'ACIDES AMINÉS 3) Réaction xanthoprotéique : caractérise certains acides aminés aromatiques : tyrosine, tryptophane, phénylalanine 4) Réaction de MILL ON : caractérise le groupement phénolique de la tyrosine 5) Réaction à l'acétate de plomb : décèle la présence du soufre dans la cystéine et dans la méthionine 6) Réaction de Sakaguchi : spécifique du groupement guanidique de l'arginine 13