Bacteriologia e Análises Bacteriológicas - PDF

BACTERIOLOGIA Gabriela Jorge da Silva Bacteriologia e Análises Bacteriológicas Mestrado Integrado em Ciências Farmacêuticas 1 Faculdade de Farmácia da Universidade de Coimbra Identificação bacteriana Porque se identificam as bactérias? Amostras clínicas Águas...

BACTERIOLOGIA Gabriela Jorge da Silva Bacteriologia e Análises Bacteriológicas Mestrado Integrado em Ciências Farmacêuticas 1 Faculdade de Farmácia da Universidade de Coimbra Identificação bacteriana Porque se identificam as bactérias? Amostras clínicas Águas Alimentos Formas farmacêuticas, cosméticos Gabriela Jorge da Silva, FFUC 2 Uma classificação de Procariotas  Bactérias filamentosas (Actinomycetes)  Bactérias “verdadeiras” Cocos e bacilos Gram-positivo e Gram-negativo  Espiroquetas  Micoplasmas  Rickettsiae e Clamydiae Gabriela Jorge da Silva, FFUC 3 Bactérias frequentemente associadas a infecção  Bacilos Gram-negativo Família Enterobacteriaceae Bacilos não fermentadores  Cocos Gram-positivo Staphylococcus spp. Streptoccocus spp. Gabriela Jorge da Silva, FFUC 4 Identificação  Características fenotípicas  Morfologia microscópica: forma, tamanho, reacção ao Gram  Capacidades metabólicas  Serologia  Análise de ácidos gordos Gabriela Jorge da Silva, FFUC 5 Identificação  Caracterização genotípica Menos frequente, amostras específicas  Sondas de ácidos nucleicos que detectam sequências específicas de uma dada bactéria  Amplificar sequências específicas de DNA por PCR  Sequenciar genes de rRNA Gabriela Jorge da Silva, FFUC 6 Características fenotípicas Amostra (geralmente polimicrobiana) Isolamento Objectivo: Identificação e enumeração de microrganismos (em alguns casos: urina, alimentos, águas…) 1ª Aula laboratorial: escolha de meios, observação de colónias Identificação Testes bioquímicos Gabriela Jorge da Silva, FFUC 7 Identificação fenotípica Capacidades metabólicas  Características da cultura Meio de cultura usado: selectivo ou não…. (aula laboratorial: escolha dos meios segundo o tipo de bactérias que se espera encontrar na amostra) Observação do tipo de colónias: tamanho, aspecto, forma, cor… (aula laboratorial) Gabriela Jorge da Silva, FFUC 8 Observação das colónias  Forma  Elevação  Margem  Superfície  Opacidade  Côr Exemplos: Gabriela Jorge da Silva, FFUC 9  Observação de colónias-1 Serratia marcescens E. coli em EMB E. coli Lac + Pigmentos MacConkey Meios selectivos Pseudomonas aeruginosa Côr -Tipo de meio - Pigmentos Hektoen Gabriela Jorge da Silva, FFUC 10 Observação de colónias-2 Aspecto Mycobacterium tuberculosis Klebsiella pneumoniae Gabriela Jorge da Silva, FFUC 11 Observação de colónias-3 Streptococcus pyogenes Staphylococcus aureus Gabriela Jorge da Silva, FFUC 12 Identificação bacteriana Enterobactérias Características fenotípicas Gabriela Jorge da Silva, FFUC 13 Enterobactérias Observação microscópica Bacilos ou cocobacilos Gram-negativo 0,5- 2 µ de largura a 4 µ de comprimento Gabriela Jorge da Silva, FFUC 14 Testes bioquímicos - Identificação com base numa chave dicotómica - Testes comerciais - Automatização Fermentação de açúcares Gabriela Jorge da Silva, FFUC 15 Api 20E, BioMérieux, France Características metabólicas de identificação de Enterobacteriaceae  Fermentam a glucose  Reduzem os nitratos a nitritos  Não produzem citocromo-oxidase Gabriela Jorge da Silva, FFUC 16 A- Fermentação de hidratos de carbono Glicose Glicólise Ác. Pirúvico Gabriela Jorge da Silva, FFUC 17  Como se visualiza a fermentação de uma açúcar? Meio de cultura pH ~7.0 Meio de cultura + pH