Western Blot Technique
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Questions and Answers

¿Cuál es el primer paso en un Western blot?

  • Electrotransferencia (correct)
  • Electroforesis de 2D
  • Inmunodetección
  • Modificaciones post-traduccionales

¿Cuál es el sustrato colorimétrico que se utiliza cuando se emplea el anticuerpo secundario con la fosfatasa alcalina?

  • Luminol
  • Peroxidasa de rábano
  • Nitroblue tetrazolium/bromocloroindolil fosfato (NBT/BCIP) (correct)
  • Alkaline Phosphatase (AP)

¿Qué tipo de membrana se utiliza comúnmente en un Western blot?

  • Membrana de nylon
  • Membrana de nitrocelulosa (correct)
  • Membrana de difluoruro de poli vinilideno (PVDF)
  • Membrana de celulosa

¿Qué enzima se utiliza en el método quimio luminiscente?

<p>Peroxidasa de rábano (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el propósito de la electrotransferencia en un Western blot?

<p>Transferir proteínas del gel de poliacrilamida a una membrana (C)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es la función del anticuerpo secundario en este laboratorio?

<p>Detección de la presencia de un anticuerpo primario (A)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es la dirección en la que migran las proteínas durante la electrotransferencia?

<p>Del polo negativo (cátodo) hacia el polo positivo (ánodo) (D)</p> Signup and view all the answers

¿Qué tipo de anticuerpos secundarios se utilizarán en este laboratorio?

<p>Anti-Rabbit IgG (whole molecule) (A)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el nombre del método que requiere menor cantidad de buffer y toma menos tiempo?

<p>Método semi-dry blot (A)</p> Signup and view all the answers

¿Qué componente es necesario para preparar un montaje (sándwich) para la transferencia de proteínas?

<p>Electrodo con carga negativa (cátodo) y electrodo con carga positiva (ánodo) (A)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el resultado visual de la reacción con nitroblue tetrazolium/bromocloroindolil fosfato (NBT/BCIP)?

<p>Un precipitado violeta (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es la membrana más económica y fácil de bloquear?

<p>Nitrocelulosa (A)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el propósito del paso de bloqueo en la inmunodetección?

<p>Para evitar interacciones no específicas entre la membrana y el anticuerpo (A)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el nombre del tinte utilizado en este laboratorio para comprobar la transferencia de proteínas?

<p>Ponceau S (D)</p> Signup and view all the answers

¿Por qué se utiliza una solución bloqueadora en la inmunodetección?

<p>Para evitar la unión no específica del anticuerpo a la membrana (C)</p> Signup and view all the answers

¿Qué es el objetivo del proceso de optimización en la transferencia de proteínas?

<p>Mejorar la eficiencia de la transferencia (C)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el peso molecular de la proteína GAPDH?

<p>37 KDa (A)</p> Signup and view all the answers

¿Qué tipo de anticuerpos se pueden utilizar en la inmunodetección?

<p>Ambos, anticuerpos monoclonales y policlonales (A)</p> Signup and view all the answers

¿Qué es el resultado de una tinción con Amido Black?

<p>Bandas de color negro (A)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el objetivo de la detección de proteínas en la inmunodetección?

<p>Detectar la proteína de interés en la membrana (B)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el nombre del anticuerpo primario utilizado en este laboratorio?

<p>Anti-GAPDH (A)</p> Signup and view all the answers

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